芳香硫酸酯酶定点饱和突变方案的比较

目的比较随机引物与精确引物PCR扩增实施绿脓杆菌芳香硫酸酯酶(Pseudomonas aeruginosa arylsulfatase, PAAS)定点饱和突变的整体效率及成本,以建立高效实用的定点饱和突变方案。方法以大肠杆菌碱性磷酸酶(Escherichia coli alkaline phosphatase, ECAP)与PAAS融合表达质粒为模板,分别用针对PAAS目的位点的随机引物、精确引物等量混合物及单个精确引物,进行全质粒PCR扩增构建定点饱和突变体库;碱裂解细胞后高通量测定PAAS突变体与ECAP活性比值进行筛选,比较3种定点饱和突变建库方案需筛选的单克隆数量、所获突变体种类、整体耗时、整体成本及影响因素。结果用随机引物PCR对M72位定点饱和突变有明显密码子偏好性,筛选超600个单克隆仅获得10种预期突变体,但对G138位定点饱和突变未见明显的密码子偏好性且筛选不到150个单克隆获得18种预期突变体;精确引物等量混合物对M72位实施定点饱和突变,筛选不超过190个克隆成功获得19种预期突变体;单个精确引物对M72位逐个PCR实施定点饱和突变,仅各筛选2个单克隆就获得19种预期突变体。单个精确引物逐个PCR实施定点突变所获饱和突变体库完整,需筛选的单克隆数最少,总耗时和总成本最低;相比之下,用随机引物和精确引物等量混合物实施定点饱和突变时,所需筛选的单克隆数、整体耗时及成本均显著增加。结论解析序列-活性关系时,用单个精确引物逐个PCR实施定点饱和突变有显著整体成本和效率优势;仅筛选阳性突变体时,用精确引物等量混合物进行PCR建库在成本和效率上更有优势。     

准比例谐振控制算法在三相逆变电源中的应用研究

非线性负载会在三相车载逆变电源系统中引入谐波,损伤用电设备。为了降低逆变电源输出电压谐波含量,文章研究了基于准比例谐振控制算法的谐波抑制方法 ,主要抑制电源输出的5次和7次谐波。通过仿真模型和实物试验,测试了传统瞬时控制方法和准比例谐振控制方法的差别。结果表明,准比例谐振控制方法既能消除输出电压中的特定次谐波,又可满足系统动态响应性能和稳态精度要求,具有良好的谐波抑制效果。     

深部引水隧洞交岔口稳定性仿真计算分析

深部隧洞交岔口稳定性受围岩性质、隧洞断面等诸多因素影响,围岩的力学特性复杂。依托山西省中部引黄工程,基于ABAQUS有限元软件对隧洞交岔口进行仿真分析,研究了断面突变交岔口的三角区围岩应力场与位移场的演变规律。结果表明,交岔口三角区侧围岩存在明显的应力集中,易受挤压破裂,需提高支护参数;交岔口断面突变处的衬砌连接处是薄弱部位,局部混凝土会出现拉裂现象,在施工过程中可采取控制弯曲变形措施,尽量修圆衬砌避免倒角。     

某型试验船综合全电力推进系统之监控系统设计

本文介绍了某型试验船综合全电力推进系统功能需求，分析了监控系统的设计。该监控系统足一个基于网络、计算机和控制技术的DCS控制系统。     

变频器制动能量的计算

当感应电机被机械倒拖,并由一台变频器驱动时,它将作为一台发电机给变频器回馈能量.     

DF11型机车燃油系统频繁排气故障的分析

1概述 机车燃油系统为柴油机正常工作提供燃料来源,其工作的可靠性对机车正常运行起着非常关键的作用.DF11型机车在新造和大修时发现部分机车燃油系统建立压力时需频繁打开柴油机燃油精滤器上的排气阀,即每次停打燃油泵,待压力消失后,再重开燃油泵时,燃油压力无法建立,打开排气阀后,燃油压力则顺利建立,停打后待压力消失再打,仍然无法建立压力,需再进行排气,如此循环往复,而且各机车状态不尽相同.有的机车燃油泵停下再开时则无法建立压力,间隔仅有数秒钟,有的需几小时甚至十几小时,系统在进行检查时又无任何泄漏处.     

船舶电站运行的负载管理

讲了船舶电站运行的负载管理所包括的主要内容，并举例介绍了一些负载管理的方法和原则。     

盾构法隧道纵向地震响应特性

采用土—结相互作用的动力有限元法,引入无长度的3自由度弹簧单元模拟纵向螺栓接头,分析行波波长、地基刚度与阻尼对盾构法隧道纵向地震响应的影响。分析结果表明:行波从水平方向输入时有突变弯矩产生,突变弯矩随波长和阻尼的增大而减小,而地基刚度系数对突变弯矩的影响相对较小;行波作用下,产生的接头最大轴力及最大弯矩值均随波长的增大而减小,而地基刚度系数及阻尼系数取值对最大弯矩值的影响较小。因此,建议在实际工程设计计算中要重视输入地震动参数的选择,且取较小的阻尼系数。     

汽车点火电子组件电冲击试验台测试电路的设计

探讨了汽车点火电子组件电冲击试验台测试电路的设计，详细研究了抛负载电压电路和浪涌电压电路的设计原理及计算公式，给出了相应的电路图。     

机车转向架模拟负载运行试验装置

运用液压传动技术、计算机测控技术研制转向架模拟负载运行实验装置,提高转向架检修质量。