芳香硫酸酯酶定点饱和突变方案的比较

目的比较随机引物与精确引物PCR扩增实施绿脓杆菌芳香硫酸酯酶(Pseudomonas aeruginosa arylsulfatase, PAAS)定点饱和突变的整体效率及成本,以建立高效实用的定点饱和突变方案。方法以大肠杆菌碱性磷酸酶(Escherichia coli alkaline phosphatase, ECAP)与PAAS融合表达质粒为模板,分别用针对PAAS目的位点的随机引物、精确引物等量混合物及单个精确引物,进行全质粒PCR扩增构建定点饱和突变体库;碱裂解细胞后高通量测定PAAS突变体与ECAP活性比值进行筛选,比较3种定点饱和突变建库方案需筛选的单克隆数量、所获突变体种类、整体耗时、整体成本及影响因素。结果用随机引物PCR对M72位定点饱和突变有明显密码子偏好性,筛选超600个单克隆仅获得10种预期突变体,但对G138位定点饱和突变未见明显的密码子偏好性且筛选不到150个单克隆获得18种预期突变体;精确引物等量混合物对M72位实施定点饱和突变,筛选不超过190个克隆成功获得19种预期突变体;单个精确引物对M72位逐个PCR实施定点饱和突变,仅各筛选2个单克隆就获得19种预期突变体。单个精确引物逐个PCR实施定点突变所获饱和突变体库完整,需筛选的单克隆数最少,总耗时和总成本最低;相比之下,用随机引物和精确引物等量混合物实施定点饱和突变时,所需筛选的单克隆数、整体耗时及成本均显著增加。结论解析序列-活性关系时,用单个精确引物逐个PCR实施定点饱和突变有显著整体成本和效率优势;仅筛选阳性突变体时,用精确引物等量混合物进行PCR建库在成本和效率上更有优势。     

500 t半圆体预制出运工艺与观感质量控制

依据长江口深水航道治理二期工程NⅡA标整治建筑物中半圆体混合堤结构形式,对这种半圆体大型构件出运工艺与预制质量控制的技术关键进行分析总结,供同行参考.     

边角后方交会与公路路线测设

常规的交会定点方法对交会图形有一定的要求。本文讨论了边角同测的后方交会观测方法、计算原理和点位精度分析，并通过理论和实例验证了该方法的可行性。本文所述方法具有操作简便、选点灵活和不受交会图形限制等优点。     

放宽条件定点集结模式下编组站车辆 集结排队系统分析

集结模式决定了货车集结过程的结束条件，定点集结是一种高效率的集结方式，有利于提高运输质量.针对放宽条件定点集结模式下编组站车辆集结过程，建立离散时间批到达批服务排队模型，利用嵌入式马尔可夫链方法求得离去时刻瞬时系统集结车辆队长分布，并求得任意时刻车辆集结队长分布，在此基础上分别分析了最小编成辆数，车组大小分布，车流到达强度，服务时间间隔分布对车辆平均集结队长，集结延误时间，效率，一昼夜发送车流量等系统指标的影响.分析结果表明，各因素对车辆集结排队系统影响明显.因此，利用本文提出的模型能为编组站的精细化管理和车流组织优化提供决策参考.     

海底埋设管线平管起吊运动分析

基于有限元软件OrcaFlex,充分考虑不规则波浪、海流、管土相互作用以及船舶管线耦合运动,建立海底埋设管线平管起吊模型。参考DNV-RP-F110计算埋深管道受到的土壤阻力,依据DNV-RP-C205确定相关水动力系数。通过数值模拟研究分析管线在平管起吊过程中管道的运动响应以及吊绳张力的时间历程变化,为实际海底管线平管起吊提供一定理论参考。     

以“国产化”“自主化”迈向全世界

首先对世界轨道交通发展研究会诞生16周年表示衷心的祝贺,同时对一直关心和支持研究会的领导和各界人士表示崇高的敬意和钦佩,并且对多年来一直关心支持庞巴迪和庞巴迪合资公司的各界领导、专家、用户和朋友表示衷心的感谢!我还清楚的记得,21年前的1998年,国家发改委开始要求城市轨道交通“国产化”,成立国产化专家组,确定国产化定点企业。最近几个月城市轨道交通“自主化”又被提上了日程。而在此之前,中国的铁路建设在“国产化”和“自主化”方面早已先行了一步,不仅实现了“国产化”,也实现了“自主化”,并且在高铁领域走在了世界前列。     

绞吸式挖泥船门架结构强度分析

本船为1艘4000m^3／h绞吸式挖泥船,起吊系统包括龙门架结构和桥架结构。选取两种代表性工况,运用MSC／Patran／Nastran有限元分析软件对起吊系统建模并进行结构强度分析。对龙门架和桥架销座附近结构的应力和位移做了校核,为同类型挖泥船起吊系统的结构安全和结构经济性提供了参考。     

1600t起重船交付使用

由江苏省船舶设计研究所有限公司设计、中船澄西船舶修造有限公司建造并使用的1600t起重船,已于2009年4月初交付使用。该船为1艘钢质、非自航、非旋转、可变幅的浮式起重船,在船首设有起吊能力为1600t的单臂架桁架式起重机构。本船为单底、单壳、纵骨架式钢质箱型全焊接结构,近海航区调遣航行、遮蔽海域起重作业,是目前能通过江阴长江公路大桥、起吊能力最大的浮式起重船。本船船长84．8m,型宽39m,型深6．8m,设计吃水3．6m,结构吃水4．2m,臂架最小仰角时最高固定建筑物距水线小于45m,采用电动驱动方式,     

公交站即时排队诱导系统

针对公交停靠站对车流与客流排队诱导不足的现状,提出了基于无线射频定位技术、计算机及通信技术,以车辆即时一定点停靠与公交站牌智能指示为核心的公交站即时排队诱导系统；分析公交站现行停靠方式的种类及其优缺点、公交站引导设施的现状及问题,介绍了公交站即时排队系统的设计功能、主体结构及功能实现流程；依据专业基础及实践经验,从管理制度和控制技术两个方面提出了保证该系统有效运行的措施.     

浅谈小型航标起吊船艇作业流程及存在问题

东海航海保障中心温州航标处目前共有各类工作船艇5艘,分别为海巡1616轮、海巡16101轮、海巡16102轮、海巡16103轮、海巡16105轮,承担辖区1,000多座航标的日常管理和维护任务。文中以海巡1616为例,着重探讨小型航标起吊船艇作业流程,以及航标作业过程中存在的问题及以后发展的方向。