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1.
《西安交通大学学报(医学版)》2019,(3):459-464
目的比较随机引物与精确引物PCR扩增实施绿脓杆菌芳香硫酸酯酶(Pseudomonas aeruginosa arylsulfatase, PAAS)定点饱和突变的整体效率及成本,以建立高效实用的定点饱和突变方案。方法以大肠杆菌碱性磷酸酶(Escherichia coli alkaline phosphatase, ECAP)与PAAS融合表达质粒为模板,分别用针对PAAS目的位点的随机引物、精确引物等量混合物及单个精确引物,进行全质粒PCR扩增构建定点饱和突变体库;碱裂解细胞后高通量测定PAAS突变体与ECAP活性比值进行筛选,比较3种定点饱和突变建库方案需筛选的单克隆数量、所获突变体种类、整体耗时、整体成本及影响因素。结果用随机引物PCR对M72位定点饱和突变有明显密码子偏好性,筛选超600个单克隆仅获得10种预期突变体,但对G138位定点饱和突变未见明显的密码子偏好性且筛选不到150个单克隆获得18种预期突变体;精确引物等量混合物对M72位实施定点饱和突变,筛选不超过190个克隆成功获得19种预期突变体;单个精确引物对M72位逐个PCR实施定点饱和突变,仅各筛选2个单克隆就获得19种预期突变体。单个精确引物逐个PCR实施定点突变所获饱和突变体库完整,需筛选的单克隆数最少,总耗时和总成本最低;相比之下,用随机引物和精确引物等量混合物实施定点饱和突变时,所需筛选的单克隆数、整体耗时及成本均显著增加。结论解析序列-活性关系时,用单个精确引物逐个PCR实施定点饱和突变有显著整体成本和效率优势;仅筛选阳性突变体时,用精确引物等量混合物进行PCR建库在成本和效率上更有优势。 相似文献
2.
常规的交会定点方法对交会图形有一定的要求。本文讨论了边角同测的后方交会观测方法、计算原理和点位精度分析,并通过理论和实例验证了该方法的可行性。本文所述方法具有操作简便、选点灵活和不受交会图形限制等优点。 相似文献
3.
在我国,尽管目前还没能像欧美发达国家那样拥有完善的GIS(地理信息系统Geographic Informaftion System)应用环境,但也步入了GIS应用大发展的时代。作为GIS应用最低端的一种,GPS用于交通导航。由于其简单实用,也得到越来越多车友的青睐。而作为汽车越野活动的爱好者,由于去的往往是荒郊野外,甚至是没有现在道路的地方,使用GPS设备进行定位导航,就更显必要。广州车迷网越野支队7月2日举行的“广州车迷网门首次GPS 定向集结赛”,又是一次越野爱好者GPS定向导航全程式体验。比赛得到了北京合众思壮科技广州公公司的大力支持,提供了13台车载卫星导航系统设备,并为参加活动的车友们进行专门培训,同时负责本次比赛的技术支持工作。 相似文献
4.
集结模式决定了货车集结过程的结束条件,定点集结是一种高效率的集结方式,有利于提高运输质量.针对放宽条件定点集结模式下编组站车辆集结过程,建立离散时间批到达批服务排队模型,利用嵌入式马尔可夫链方法求得离去时刻瞬时系统集结车辆队长分布,并求得任意时刻车辆集结队长分布,在此基础上分别分析了最小编成辆数,车组大小分布,车流到达强度,服务时间间隔分布对车辆平均集结队长,集结延误时间,效率,一昼夜发送车流量等系统指标的影响.分析结果表明,各因素对车辆集结排队系统影响明显.因此,利用本文提出的模型能为编组站的精细化管理和车流组织优化提供决策参考. 相似文献
5.
针对区域性公交疏散中集结点选址问题,分析了影响集结点选址的影响因素,考虑了待疏散人群与公交车的时效性,引入了两组0-1变量,以人群总步行距离最短与公交车总走行距离最短为优化目标,构建了疏散集结点选址优化模型。在求取集结点选址方案的同时,还可得到公交车到达集结点的路径和数量。结合问题特点设计了适用于公交疏散集结点选址优化问题的遗传算法方案,最后通过算例对模型和算法的合理性进行了验证。 相似文献
6.
7.
电商狂欢,快递爆仓,一时间物流车数量的缺口问题浮出水面,成为行业近期普遍关注的焦点。日前,江淮星锐携全系物流车产品首次在北京集结亮相,就吸引了众多物流企业到场参观选购。宅急送、苏宁易购等物流圈"大腕"都悉数到场,足以印证时下物流企业买车的刚性需求已开始集中爆发。有消息称为应对"双11",排名前十的快递企业提前预备了3万多辆车。但从长远看来,车辆的补给显然还远远不够。这为江淮星锐等物流车商提供了大展拳脚的绝佳机会。活动现 相似文献
8.
《交通标准化》2014,(6)
正赛事过程报名阶段——组织物流企业、卡车制造企业及热衷于交通运输事业的企业和机构报名参赛,并对报名者的资格进行初审;培训阶段——特邀国际,国内物流高端专家讲解国际知名物流机构的管理经验、操作程序、应急处置及我国物流发展规划;初赛阶段——以培训中的理论、法规命题考试,各参赛车队的选手代表为各队争取初赛成绩;路赛阶段——从连云港到乌鲁木齐,以培训内容结合现实运营情况,在各个集结点分别设置装卸货物、节油运输、迟滞处理、安全驾驶、倒装移库、事故处置、应急保障等单项考试,各参赛车队在每一单项中均有其比赛成绩;颁奖阶段——参照各参赛队初赛、路赛的各单项成绩评出优胜队,并在丝绸之路经济带交通运输峰会暨首届丝绸之路国际卡车集结赛颁奖仪式上颁奖。 相似文献
9.
针对公交停靠站对车流与客流排队诱导不足的现状,提出了基于无线射频定位技术、计算机及通信技术,以车辆即时一定点停靠与公交站牌智能指示为核心的公交站即时排队诱导系统;分析公交站现行停靠方式的种类及其优缺点、公交站引导设施的现状及问题,介绍了公交站即时排队系统的设计功能、主体结构及功能实现流程;依据专业基础及实践经验,从管理制度和控制技术两个方面提出了保证该系统有效运行的措施. 相似文献
10.
据《21世纪趋势》周刊报道,美国麻省理工研发出一型可悬浮在海里的潜水机器人“奥德赛4号”。
它能在深达6000米的水下活动,并能停留在任何水流中,适时调整自己的位置。同时,还能行驶到预先设定的任何目的地。 相似文献