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2.
《西安交通大学学报(医学版)》2019,(3):459-464
目的比较随机引物与精确引物PCR扩增实施绿脓杆菌芳香硫酸酯酶(Pseudomonas aeruginosa arylsulfatase, PAAS)定点饱和突变的整体效率及成本,以建立高效实用的定点饱和突变方案。方法以大肠杆菌碱性磷酸酶(Escherichia coli alkaline phosphatase, ECAP)与PAAS融合表达质粒为模板,分别用针对PAAS目的位点的随机引物、精确引物等量混合物及单个精确引物,进行全质粒PCR扩增构建定点饱和突变体库;碱裂解细胞后高通量测定PAAS突变体与ECAP活性比值进行筛选,比较3种定点饱和突变建库方案需筛选的单克隆数量、所获突变体种类、整体耗时、整体成本及影响因素。结果用随机引物PCR对M72位定点饱和突变有明显密码子偏好性,筛选超600个单克隆仅获得10种预期突变体,但对G138位定点饱和突变未见明显的密码子偏好性且筛选不到150个单克隆获得18种预期突变体;精确引物等量混合物对M72位实施定点饱和突变,筛选不超过190个克隆成功获得19种预期突变体;单个精确引物对M72位逐个PCR实施定点饱和突变,仅各筛选2个单克隆就获得19种预期突变体。单个精确引物逐个PCR实施定点突变所获饱和突变体库完整,需筛选的单克隆数最少,总耗时和总成本最低;相比之下,用随机引物和精确引物等量混合物实施定点饱和突变时,所需筛选的单克隆数、整体耗时及成本均显著增加。结论解析序列-活性关系时,用单个精确引物逐个PCR实施定点饱和突变有显著整体成本和效率优势;仅筛选阳性突变体时,用精确引物等量混合物进行PCR建库在成本和效率上更有优势。 相似文献
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电子海图系统中雷达图像与海图图形叠加技术研究 总被引:1,自引:1,他引:0
针对电子海图系统中关于雷达视频与海图图形实时叠加,提出了叠加的新方法。电子海图系统综合显示层为八层,其中的四层作为雷达图像显示。运用TMS 34020的32位端口像素综合能力,将海图图形4路4位像素信息与雷达图像4路4位像素信息进行叠加,合成4路8位信息送BT458/9实现最终在显示器上的叠加。 相似文献
5.
此文通过分析纵倾状态下船舶吃水差传统计算方法中的误差,提出了一种适合于纵倾,特别是在较大纵倾状态下船舶吃水差的精确计算方法,该方法通常可以在具备一定船舶资料的条件下采用,也可以在船舶装载软件的设计中采用。 相似文献
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7.
结合电气化改造工程,对电化区段25Hz相敏轨道电路预叠加UM--71电码化的可靠性及优点进行阐述,对一些技术难点进行分析。 相似文献
8.
超静定结构力法分析中一个新的叠加公式 总被引:1,自引:1,他引:0
揭示了超静定结构力法分析中的一个新现象,即力法分析不必只基于一个基本结构,还有同时基于两个不同基本结构的叠加公式,而传统的叠加公式只是本文所给叠加公式的特例。 相似文献
9.
以二维弹性力学问题为研究对象,采用线性非连续元离散边界积分方程,给出了系数矩阵计算的精确表达式,对二维弹性力学问题进行了数值计算,对非连续边界元配位点对计算结果精度的影响进行了讨论,结果表明准奇异积分计算是配位点影响计算结构精度的主要因素。 相似文献
10.
现代导航信息技术的应用和发展,电子海图与雷达图像/ARPA数据信息的叠加显示成为可能和必然,为船舶的导航和避碰提供安全保障。此文分析了NaviSailor3000型电子海图的雷达/ARPA功能,针对使用中容易出现的雷达图像叠加偏移,ARPA数据误差大的现象,提出了判断和修正的具体方法。 相似文献