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| RD-PCR技术在酵母基因表达谱研究中的应用 | |
| 引用本文： | 刘莉扬,马文丽,宋艳斌,张宝,郑文岭.RD-PCR技术在酵母基因表达谱研究中的应用[J].西安交通大学学报(医学版),2002,23(3):246-248. |
| 作者姓名： | 刘莉扬 马文丽 宋艳斌 张宝 郑文岭 |
| 作者单位： | 1. 西安交通大学分子生物学教研室,西安,710049 2. 第一军医大学分子生物学研究所,广州,510515 3. 广州军区总医院分子肿瘤生物研究所,广州,510010 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (No.39880 0 32 )，广州市重点攻关项目 (No .990 4 480 2 2 ) |
| 摘 要： | 目的 应用RD PCR技术分离酵母基因。方法 首先提取酿酒酵母 (Saccharomycescerevisiae)总RNA ,纯化mRNA ;然后 ,反转录成双链cDNA ;再用限制性内切酶Sau3AI酶切 ,在酶切片段上加上接头后 ,用通用引物U进行第一次PCR扩增 ,以这一产物为模板用选择性引物(在通用引物的 3’端延伸两个碱基 )作第二次PCR扩增。 5 %PAGE胶分离基因片段 ,选择单带割胶回收 ,做第三次PCR扩增 ,与载体连接 ,最后进行测序分析。结果 采用这种方法分离得到的基因片段 ,经Blast检索分析 ,确为来自酿酒酵母基因的cDNA片段或表达序列标签 (EST)。结论 RD PCR技术可以有效地分离EST ,可用于酵母基因表达调控的研究。 |
| 关 键 词： | RD-PCR 酿酒酵母 EST |
| 文章编号： | 0258-0659(2002)03-0246-03 |
| 修稿时间： | 2001年9月18日 |
Application of RD-PCR technology in the study of yeast gene expression |
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| Abstract: | |
| Keywords: | RD PCR S cerevisiae EST |
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