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K562细胞cDNA表达文库的构建和鉴定
引用本文:陈刚,张王刚,付杰,李福洋,刘新平,药立波.K562细胞cDNA表达文库的构建和鉴定[J].西安交通大学学报(医学版),2003,24(2):109-111.
作者姓名:陈刚  张王刚  付杰  李福洋  刘新平  药立波
作者单位:1. 西安交通大学第二医院血液内科,陕西西安,710004
2. 西安交通大学第二医院感染科,陕西西安,710004
3. 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室,陕西西安,710032
基金项目:卫生部部属(管)医疗机构临床学科重点项目基金资助(2 0 0 12 13 1)
摘    要:目的 构建K5 6 2细胞表达型cDNA文库。方法 提取K5 6 2细胞总RNA ,分离mRNA ,反转录合成双链cDNA ,消平cDNA末端 ,连接EcoRⅠ适配子 ,磷酸化EcoRⅠ适配子 5’端 ,Sephacryl S4 0 0柱除去小于 4 0 0bpcDNA片段 ,与去磷酸化的λgt11噬菌体连接 ,体外包装后建成cDNA文库。取出 1μL倍比稀释感染E .coliY10 90 ,测定文库大小、重组率 ,并以PCR鉴定cDNA插入片段的大小。结果 构建成含 1.0 2× 10 6重组子的K5 6 2细胞cDNA文库 ,重组子平均插入外源片段长约 1.3kb。结论 所建文库合格 ,适合用于筛选目的cDNA克隆。

关 键 词:白血病  K562细胞  cDNA文库
文章编号:1671-8259(2003)02-0109-03
修稿时间:2002年11月18

Construction and characterization of K562 cell cDNA bank
Chen Gang,Zhang Wanggang,Fu Jie,Li Fuyang,Liu Xinping,Yao Libo.Construction and characterization of K562 cell cDNA bank[J].Journal of Xi‘an Jiaotong University:Medical Sciences,2003,24(2):109-111.
Authors:Chen Gang  Zhang Wanggang  Fu Jie  Li Fuyang  Liu Xinping  Yao Libo
Abstract:
Keywords:K562 cell line  cDNA bank  leukemia
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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