| 中国人丙型肝炎病毒复合细胞毒性T淋巴细胞多表位基因真核载体的构建及在COS-7细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 郝晓娟,李端,陈丽萍,赵甫涛,赵英仁,贾战生.中国人丙型肝炎病毒复合细胞毒性T淋巴细胞多表位基因真核载体的构建及在COS-7细胞中的表达[J].西安交通大学学报(医学版),2010,31(4). |
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| 作者姓名： | 郝晓娟 李端 陈丽萍 赵甫涛 赵英仁 贾战生 |
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| 作者单位： | 1. 西安交通大学医学院第一附属医院传染科,陕西西安,710061
2. 唐都医院感染病诊疗中心,陕西西安,710038 |
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| 基金项目： | 国家863专项课题，国家"十一五"重大科技专项 |
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| 摘 要： | 目的 构建中国人丙型肝炎病毒(HCV)复合细胞毒性T淋巴细胞(CTL)多表位基因的真核表达载体,并观察其在真核细胞中的表达.方法 根据生物信息学方法筛选中国人的HCV多个CTL优势表位,合成复合多表位抗原基因(mcf);将其克隆入真核表达载体pEGFP-N1,转染COS-7细胞,在荧光显微镜下观察mcf-EGFP融合蛋白在细胞中的分布和定位,RT-PCR及Western blot检测其mRNA及蛋白表达.结果 成功构建了真核表达载体pEGFP-mcf.将构建的真核表达载体pEGFP-mcf转染 COS-7细胞后,绿色荧光分布于COS-7细胞胞质中;而转染空载体pEGFP-N1后,绿色荧光弥散分布于COS-7细胞胞核及胞质中.RT-PCR检测到转染细胞中mcf mRNA表达;Western blot结果证明合成mcf可在COS-7细胞中表达.结论 该真核表达载体的成功表达及鉴定,为下一步中国人的HCV复合CTL多表位疫苗的研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | 丙型肝炎病毒 细胞毒性T淋巴细胞 表位 |
Construction of the eukaryotic expression vector of compound CTL multi-epitope gene of HCV in Chinese people and expression of the gene in COS-7 cellsHAO Xiao-juan1, LI Duan2, CHEN Li-ping2, ZHAO Pu-tao2, |
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| HAO Xiao-juan,LI Duan,CHEN Li-ping,ZHAO Pu-tao,ZHAO Ying-ren,JIA Zhan-sheng.Construction of the eukaryotic expression vector of compound CTL multi-epitope gene of HCV in Chinese people and expression of the gene in COS-7 cellsHAO Xiao-juan1, LI Duan2, CHEN Li-ping2, ZHAO Pu-tao2,[J].Journal of Xi‘an Jiaotong University:Medical Sciences,2010,31(4). |
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| Authors: | HAO Xiao-juan LI Duan CHEN Li-ping ZHAO Pu-tao ZHAO Ying-ren JIA Zhan-sheng |
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