|
|||||
|
|
| 脑源性神经营养因子融合蛋白真核表达质粒的构建及表达 | |
| 引用本文： | 石秦东,张蓬勃,田玉梅,张军峰,陈新林,刘勇.脑源性神经营养因子融合蛋白真核表达质粒的构建及表达[J].西安交通大学学报(医学版),2009,30(2). |
| 作者姓名： | 石秦东 张蓬勃 田玉梅 张军峰 陈新林 刘勇 |
| 作者单位： | 1. 西安交通大学学院,神经生物学研究所,陕西西安,710061;西安交通大学学院,第一附属医院中心ICU,陕西西安,710061 2. 西安交通大学学院,神经生物学研究所,陕西西安,710004;西安交通大学学院,第二附属医院麻醉科,陕西西安,710004 3. 西安交通大学学院,,神经生物学研究所,陕西西安,710061 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，陕西省科技攻关项目 |
| 摘 要： | 目的 构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的脑源性神经营养因子(BDNF)融合蛋白真核表达质粒,并对其表达和定位进行研究.方法 以人血白细胞DNA为模板,利用一对删除终止密码子的引物进行PCR获得BDNF基因片段,并将其与pEGFP-N1质粒载体连接,构建BDNF-EGFP融合蛋白真核表达质粒.以脂质体Lipofectamine2000 转染Hela细胞,提取总RNA,通过RT-PCR方法检测BDNF-EGFP在转录水平的表达,Western blot 及荧光显微镜进一步观察融合蛋白的表达定位.结果 酶切和PCR鉴定证实BDNF基因片段正确克隆入载体质粒中,转染Hela细胞后,RT PCR证实BDNF EGFP融合蛋白在转录水平有表达,荧光显微镜观察显示BDNF EGFP融合蛋白主要分布于细胞质中,Western blot结果显示Hela细胞培养液中有BDNF EGFP融合蛋白存在. 结论成功构建了BDNF EGFP融合蛋白真核细胞表达质粒,BDNF EGFP融合蛋白能够在Hela细胞中表达,主要位于细胞质中并可以分泌到细胞外. |
| 关 键 词： | 脑源性神经营养因子 绿色荧光蛋白 融合蛋白 Hela细胞 |
Construction and expression of the eukaryotic expression plasmid of BDNF EGFP fusion protein |
|
| SHI Qin-dong,ZHANG Peng-bo,TIAN Yu-mei,ZHANG Jun-feng,CHEN Xin-lin,LIU Yong.Construction and expression of the eukaryotic expression plasmid of BDNF EGFP fusion protein[J].Journal of Xi‘an Jiaotong University:Medical Sciences,2009,30(2). | |
| Authors: | SHI Qin-dong ZHANG Peng-bo TIAN Yu-mei ZHANG Jun-feng CHEN Xin-lin LIU Yong |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
| 本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录！ | |