人CAP1蛋白真核表达及细胞定位与功能 |
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作者单位: | ;1.石河子大学生命科学学院;2.军事医学科学院放射与辐射医学研究所;3.石河子大学医学院 |
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摘 要: | 目的构建CAP1蛋白真核表达质粒并使之在细胞内得以表达,确定CAP1蛋白在细胞中的定位及其对细胞迁移的影响。方法以HeLa细胞cDNA为模板,经PCR获取CAP1编码区cDNA,将该编码区cDNA序列插入pCMV-Myc质粒中,构建带Myc标签的真核表达重组质粒。重组质粒转染至293细胞中,Western blot方法检测其在真核细胞内的表达;重组质粒转染HeLa细胞,免疫荧光法检测其细胞内的定位,划痕实验观察其对细胞迁移的影响。结果成功构建了CAP1真核表达重组质粒,并在真核细胞内成功表达,确定CAP1定位于细胞质中,划痕实验证明CAP1过表达的细胞迁移能力明显下降。结论在真核细胞中成功表达了CAP1重组质粒且CAP1定位于细胞质,其过表达对细胞迁移有抑制作用,为研究CAP1的生理功能奠定实验基础。
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关 键 词: | 细胞骨架 肌动蛋白 CAP1 亚细胞定位 细胞迁移 重组质粒 |
The eukaryotic expression,intracellular location and functions of human CAP1 |
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