表皮生长因子受体Ⅲ型变异体(EGFRvⅢ)多克隆抗体的制备及特异性 |
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作者姓名: | 胡红刚 陈珊珊 |
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作者单位: | 北京交通大学理学院,北京100044 |
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摘 要: | 为了制备针对EGFRvⅢ的特异性多克隆抗体,在实验中利用耦联了血蓝蛋白的EGFRvⅢ特异性的PEP3合成短肽进行动物免疫,制备抗血清;构建了pET30a/E33XI原核表达载体,表达和纯化了融合蛋白His-E33(EGFRvⅢ的部分胞外区);以此融合蛋白作为抗原制备了抗体纯化柱,通过柱上纯化的方法从抗血清中提取针对EGFRvⅢ的特异性抗体.利用U87、U251、HeLa和HEK-293细胞进行免疫组化实验来检验抗体的特异性.
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关 键 词: | EGFRvⅢ基因 E33XI片段 原核表达 多克隆抗体 免疫组化 |
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