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| HtrA1表达被沉默的滋养细胞株HPT-8/pSilencer4.1-HtrA1的构建 | |
| 作者单位： | ;1.西安交通大学医学部第一附属医院妇产科;2.榆林市第二医院妇产科 |
| 摘 要： | 目的构建pSilencer4.1/HtrA1质粒,稳定转染人滋养细胞株HPT-8。方法免疫组化SABC方法检测HtrA1在HPT-8细胞中的表达;构建pSilencer4.1/HtrA1质粒;将pSilencer4.1/HtrA1质粒、pSilencer4.1空白质粒转染HPT-8,观察转染后细胞HtrA1的表达情况。结果 HPT-8约90%左右的细胞胞质被染成棕黄色,胞核未见明显染色。转染pSilencer4.1/HtrA1质粒的HPT-8细胞的G418筛选质量浓度为200μg/mL。RT-PCR、Western blot法鉴定转染细胞HtrA1的表达,结果显示转染Psilence4.1/HtrA1重组质粒的细胞中HtrA1表达水平较空白质粒、正常细胞明显下降(P均<0.05)。空白质粒组、HPT-8组间吸光度值无统计学差异(P>0.05)。结论成功构建了稳定的、HtrA1沉默表达的滋养细胞株HPT-8/pSilencer4.1-HtrA1,为下一步的研究奠定了实验基础。 |
| 关 键 词： | 滋养细胞 HPT-8 HtrA1 质粒 |
Construction of trophoblastic cell line HPT-8/pSilencer4.1-HtrA1 with silenced expression of HtrA1 |
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