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| HEK293细胞中杂合状态下无义突变体L539fs/47对野生型HERG电流的作用 | |
| 作者单位： | ;1.陕西省人民医院心内一科;2.西安交通大学第一附属医院心内科;3.西安交通大学第二附属医院心内科 |
| 摘 要： | 目的研究单独表达无功能的无义突变体L539fs/47在HEK293细胞中杂合状态下对野生型HERG电流的作用。方法用脂质体转染法将野生型HERG及突变体HERG-L539fs/47分别转染HEK293细胞36h后,RT-PCR检测HERG mRNA表达,免疫荧光及免疫印迹检测HERG蛋白定位及表达量,全细胞膜片钳检测IHERG电流密度。结果野生组HERG的mRNA表达量高于L539fs/47突变组(1.066±0.612 vs.0.254±0.397,P<0.01)。免疫荧光检测发现野生型HERG蛋白多于突变体,野生型HERG蛋白主要分布在细胞膜上;而HERG突变体蛋白大部分滞留胞质。免疫印迹显示:不同于野生型HERG135ku及155ku 2个条带,突变体仅60ku 1个条带。全细胞膜片钳检测WT+MT组IHERG较WT组下降55.23%(22.03±2.62 vs.49.20±2.31pApF,P<0.01)。结论 HEK293细胞中杂合状态下截断突变体L539fs/47对野生型HERG电流的不完全负显性抑制作用。 |
| 关 键 词： | HERG 无义突变 不完全负显性抑制作用 HEK293细胞 |
The mutant L539fs/47 has the effect of an incomplete dominant negative inhibition on wild type HERG current in HEK293 cells |
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| Keywords: | |