| 不含氨基末端的PIF1解螺旋酶的纯化和初步功能研究 |
| |
| 引用本文： | 顾永清. 不含氨基末端的PIF1解螺旋酶的纯化和初步功能研究[J]. 西安交通大学学报(医学版), 2009, 30(3) |
| |
| 作者姓名： | 顾永清 |
| |
| 作者单位： | 新疆石河子大学医学院,新疆石河子,832002 |
| |
| 基金项目： | 部分工作得到CWAJ奖学金的支持项目 |
| |
| 摘 要： | 目的 从分子水平阐述人类PIF1解螺旋酶的生理功能,纯化只含有解螺旋酶模序,不含N-末端的PIF1蛋白--PIF1△N,并对其生物化学活性进行检测.方法 以Hela细胞的cDNA文库为模版,PCR扩增得到PIF1的540～1 923的cDNA序列,在cDNA的5′端引入六聚组氨酸标签后插入pET20b表达载体,得到重组质粒pET20-PIF1△N.通过共转化此重组质粒和一个编码稀有rRNA的质粒,PIF1△N蛋白在大肠杆菌中得到表达.在4 ℃通过一系列亲和层析柱,用高效液相纯化系统纯化了PIF1△N蛋白,并检测其生物化学活性.结果 从Hela 细胞的cDNA文库中克隆了PIF1蛋白的540～1 923的基因片段,使其在大肠杆菌中成功表达.建立了纯化PIF1△N蛋白的亲和层析方法, 并检测了其ATP酶活性.结论 不含N-末端的PIF1蛋白-PIF1△N,具有依赖镁离子和DNA的ATP酶活性.
|
| 关 键 词： | PIF1解螺旋酶 蛋白纯化 ATP酶 |
The purification and preliminary functional study of N-terminal truncated human PIF1 helicases |
| |
| GU Yong-qing. The purification and preliminary functional study of N-terminal truncated human PIF1 helicases[J]. Journal of Xi‘an Jiaotong University:Medical Sciences, 2009, 30(3) |
| |
| Authors: | GU Yong-qing |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
