毛状分裂增强子1诱导肝干细胞向胆管细胞的分化

目的 探讨毛状分裂增强子1(hairy enhancer of split 1,Hes1)调控肝干细胞(liver epithelial progenitor cells, LEPCs)向胆管细胞分化的作用。方法 将pTRE2hyg-Hes1和pTRE2hyg-EGFP-Hes1转染LEPCs,不同浓度强力霉素(doxycycline, DOX)诱导Hes1的表达。通过Western blotting、PCR、RT-PCR、Real-time PCR、免疫细胞化学和免疫荧光技术检测相关分子表达。以谷胱甘肽合成酶(glutathione synthetase, Gss)作为肝细胞分化的标记，以角蛋白19(keratin 19, Krt19)和肝核因子1β(hepatic nuclear factor 1β, HNF1β)为胆管细胞分化标记。结果 RT-PCR和Real-time PCR检测结果显示，随着DOX浓度的增加，Hes1在LEPCs细胞中的表达逐渐增高，当DOX浓度为10μg/mL时，Hes1表达是未加DOX时的11.21倍，第5天Hes1的表达处于高峰，持续到第7天；Weste...