| 重组人单链白细胞介素12融合基因(rhscIL一12)的构建和真核表达 |
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| 引用本文： | 张梅,司履生,王一理,耿宜苹.重组人单链白细胞介素12融合基因(rhscIL一12)的构建和真核表达[J].西安交通大学学报(医学版),2000,21(4):297-302. |
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| 作者姓名： | 张梅 司履生 王一理 耿宜苹 |
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| 作者单位： | 1. 西安交通大学第一医院血液病研究室，西安 710061
2. 西安交通大学免疫病理研究室，西安 710061 |
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| 基金项目： | 陕西省自然科学基金资助(99SM49) |
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| 摘 要： | 目的克隆人IL-12(hIL-12)p40和p35亚单位cDNA，构建人单链IL-12(rhscIL-12)融合基因，并在哺乳动物细胞中进行表达。方法从经PDBu刺激的EBV转化的人B淋巴母细胞株NC37中提取mRNA，经RT-PCR分别获得hIL-12p40和p35亚单位编码序列的cDNA，运用重组PCR技术将两段基因通过一疏水性多肽接头(Gly4Ser)3DNA序列进行体外基因重组，构建rhscIL-12融合基因，将其插入pcDNA3.1(+)真核表达载体，经脂质体转染COS7细胞进行表达，Westernb1ot进行分析。结果所克隆的hIL-12p40、p35cDNA序列和构建的rhscIL-12融合基因DNA序列均经测序得以证实，融合基因可在COS7中表达其产物rhscIL-12融合蛋白，其分子量为70KD，可与鼠抗人IL-12p40/p70单克隆抗体特异性结合。结论本研究结果为进一步探讨rhscIL-12融合蛋白的生物学活性和特性奠定了基础，也为rhscIL-12融合基因在原核细胞中的表达提供了可能性。
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| 关 键 词： | 人白细胞介素12(hIL-12) 重组人单链白细胞介素12(rhscIL-12) 融合基因 真核表达 |
| 文章编号： | 0258-0659(2000)04-0297-06 |
The construction and eukaryotic expression of reeombinant human single chain in terleukin-12(rhscIL-12) fusion gene |
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