T细胞CTLA-4、TCRVβ8基因克隆、重组及表达 |
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作者姓名: | 王晶 朱江 朱本章 马卫国 |
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作者单位: | 1. 西安交通大学医学院第一附属医院内分泌科,陕西西安,710061 2. 陕西省第三人民医院,陕西西安,710061 3. 西安医学院附属医院,陕西西安,710077 |
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摘 要: | 目的克隆Graves’病患者甲状腺组织T淋巴细胞的CTLA-4胞外段和TCRVβ8目的基因,重组为CTLA-4-TCRVβ8基因并表达出融合蛋白。方法RT-PCR从Graves病患者甲状腺组织中克隆T淋巴细胞的CTLA-4胞外段和TCRVβ8基因,依次与表达质粒进行连接,双酶切及测序鉴定获得正确的重组子;原核表达融合蛋白,SDS-PAGE及Western-Blotting检测蛋白表达情况。结果基因克隆扩增出CTLA-4和TCRVβ8目的基因片段,测序结果证实序列与已发表的一致。重组基因原核表达出与预期分子质量大小相符的目的蛋白。结论成功构建和表达了CT-LA-4-TCRVβ8基因,为探索Graves’病免疫耐受治疗提供了基因产品。
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关 键 词: | Graves'病 CTLA-4 TCRVβ 基因表达 融合蛋白 |
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