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人doppel蛋白及其类似蛋白PrPΔ32-121对SH-SY5Y细胞的细胞毒性作用
引用本文:徐琨,王新,田婵,石崧,王桂荣,石琦,周瑞敏,姜惠英,楚雍烈,董小平.人doppel蛋白及其类似蛋白PrPΔ32-121对SH-SY5Y细胞的细胞毒性作用[J].西安交通大学学报(医学版),2010,31(1).
作者姓名:徐琨  王新  田婵  石崧  王桂荣  石琦  周瑞敏  姜惠英  楚雍烈  董小平
作者单位:1. 西安交通大学医学院病原生物学与免疫学系,陕西西安,710061;中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室,北京,100052
2. 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室,北京,100052
3. 西安交通大学医学院病原生物学与免疫学系,陕西西安,710061
基金项目:国家科技攻关项目,国家重点基础研究发展规划(973计划),国家自然科学基金,科研院所基金 
摘    要:目的 体外观察细胞瞬时表达的人Dpl(doppel)蛋白对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的作用,并与其结构类似蛋白--截短型PrP(PrPΔ32-121)加以比较.方法 通过PCR方法获得人PRND基因及截短型PRNP基因并克隆至真核表达载体,瞬时转染SH-SY5Y细胞后,观察蛋白表达及其定位情况;采用MTT实验检测转染细胞的生长状态;用流式细胞仪、Western blot等方法检测转染细胞的凋亡状态.结果 两种蛋白均可在转染细胞中表达,并存在于细胞膜上;MTT结果显示,在转染24h后均出现明显的细胞毒性作用;细胞凋亡相关实验发现,转染细胞Annexin V/PI双染阳性细胞数量增多,pro-casepase-3和Bcl-2因子水平降低.结论 瞬时表达的Dpl蛋白与截短型PrP可产生类似的神经细胞毒性作用,并诱导启动细胞凋亡过程.

关 键 词:doppel蛋白  朊蛋白  细胞毒性作用  细胞凋亡
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