| 大鼠海马组织RNA、DNA和蛋白质共提取方法的研究 |
| |
| 引用本文： | 胡丽丽,赵小鸽,倪 磊,等.大鼠海马组织RNA、DNA和蛋白质共提取方法的研究[J].西安交通大学学报(医学版),2014(2):276-280. |
| |
| 作者姓名： | 胡丽丽 赵小鸽 倪 磊 等 |
| |
| 作者单位： | ;1.西安交通大学医学院遗传学与分子生物学系;2.西安交通大学医学院环境与疾病相关基因教育部重点实验室、生物医学基础研究中心 |
| |
| 摘 要： | 目的探讨Trizol法同时提取大鼠单侧海马组织RNA、基因组DNA和蛋白质的可行性及优势。方法 Trizol法提取成年雄性Sprague-Dawley大鼠单侧海马组织RNA、基因组DNA以及蛋白质;商业化试剂盒提取另一侧海马组织基因组DNA,RIPA裂解液提取蛋白质。用超微量分光光度计和SYBR实时定量RT-PCR法检测Trizol法提取的RNA的质量,利用超微量分光光度计和聚合酶链式反应(PCR)法比较两种方法提取DNA的效果及质量,采用Western blot法比较两种方法提取蛋白质的效果。结果 Trizol法提取单侧海马RNA的质量浓度介于1 178.32 225.8ng/μL之间,A260/280介于2.012 225.8ng/μL之间,A260/280介于2.012.03,A260/230介于1.882.03,A260/230介于1.882.22,并获得了稳定的β-actin和GR循环域值。Trizol法和试剂盒提取单侧海马DNA的质量浓度分别介于215.72.22,并获得了稳定的β-actin和GR循环域值。Trizol法和试剂盒提取单侧海马DNA的质量浓度分别介于215.7271.8ng/μL和268.6271.8ng/μL和268.6872.5ng/μL之间,均适于充当PCR反应模板。Trizol法和RIPA裂解液提取的蛋白质在Western blot法检测目的蛋白含量的过程中均呈现清晰的条带。结论 Trizol法提取大鼠单侧海马组织RNA的同时提取的DNA和蛋白质,与商业化试剂盒和RIPA裂解液从不同海马组织中分别提取基因组DNA和蛋白质的效果相当。采用Trizol法同时提取海马组织的RNA、DNA和蛋白质,不仅提高了实验效率、节约了实验成本,而且有效避免了因反复实验操作带来的人为干扰及误差。
|
A method to extract RNA,DNA and protein from rat hippocampus |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Trizol 海马 RNA DNA 蛋白质 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
|
