| SIK2 cDNA及其截短体原核表达重组体的构建及表达 |
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| 引用本文： | 王建校,李珊珊,刘 旭,等.SIK2 cDNA及其截短体原核表达重组体的构建及表达[J].西安交通大学学报(医学版),2014(3):290-294. |
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| 作者姓名： | 王建校 李珊珊 刘 旭 等 |
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| 作者单位： | ;1.石河子大学医学院;2.军事医学科学院放射与辐射医学研究所;3.中国人民解放军第6411工厂职工医院 |
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| 摘 要： | 目的构建SIK2cDNA及其截短体的原核表达重组质粒,在大肠杆菌中诱导表达。方法分别设计SIK2及其截短体引物,采用PCR方法分别扩增SIK2、SIK2-Δ1(280926)、SIK2-Δ2(400926)、SIK2-Δ2(400926)、SIK2-Δ3(1926)、SIK2-Δ3(1400)、SIK2-Δ4(700400)、SIK2-Δ4(700926)五个cDNA片段,并将扩增的cDNA片段插入原核表达载体pGEX-4T-2,构建GST标签的重组质粒。将构建好的重组质粒转化到大肠杆菌BL21中,用IPTG诱导SIK2、SIK2-Δ1、SIK2-Δ2、SIK2-Δ3和SIK2-Δ4五个截短体的原核表达,用考马斯亮蓝染色和Western blot进行鉴定。结果成功构建了SIK2全长及其截短体cDNA的重组质粒,用考马斯亮蓝染色及Western blot鉴定显示,SIK2全长及其截短体重组质粒均在大肠杆菌中诱导表达。结论在大肠杆菌中成功地诱导表达了SIK2重组蛋白及其截短体,为进一步研究SIK2各结构域的功能提供了实验基础。
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| 关 键 词： | 盐诱导激酶 SIK2 GST 融和蛋白 诱导表达 重组质粒 |
Construction of recombinant plasmids and their overexpression of SIK2 cDNA and its truncated mutants |
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