结核多表位DNA疫苗免疫效果及其对小鼠耐药结核病的疗效观察 |
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引用本文: | 刘 敏,孙 钢,刘如意.结核多表位DNA疫苗免疫效果及其对小鼠耐药结核病的疗效观察[J].西安交通大学学报(医学版),2014(3):311-314. |
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作者姓名: | 刘 敏 孙 钢 刘如意 |
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作者单位: | ;1.延安大学医学院附属医院呼吸科;2.陕西省人民医院呼吸科;3.西安交通大学医学院第三附属医院;4.西安交通大学医学院 |
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摘 要: | 目的研究比较结核分枝杆菌Hsp70、Ag85A、ESAT-6多表位DNA疫苗和卡介苗(BCG)的免疫效果,观察该疫苗联合抗结核药物治疗耐药结核病小鼠的疗效。方法随机将BALB/c小鼠分成A、B、C组,分别用PBS、BCG和多表位DNA疫苗经皮下免疫,1、3、5周各免疫1次。免疫后眼球采血,分离血清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)间接法测定特异性IgG抗体,用ELISA双抗体夹心法测定IL2和IFN-γ;同时分离小鼠脾细胞,用MTT法测定淋巴细胞增殖指数。为观察多表位疫苗的疗效,小鼠尾静脉注射结核分枝杆菌双耐菌株(耐利福平和耐异烟肼),4周后将感染模型小鼠随机分成D、E、F 3组,其中D组为阴性对照,注射生理盐水;E组用利福平、异烟肼治疗;F组为联合用药组,用结核分枝杆菌Hsp70、Ag85A、ESAT-6多表位DNA疫苗和利福平、异烟肼联合治疗,疗程均为10周。治疗结束后称取小鼠体重,取其肺、肝、脾,称取质量,并作肺和脾脏菌落计数。结果多表位DNA疫苗组小鼠血清特异性IgG抗体、IL2、IFN-γ和淋巴细胞增殖指数均明显高于PBS组和BCG组(P<0.05);多表位DNA疫苗联合抗结核化疗药能明显降低耐药结核病小鼠肺、脾菌落计数和肺、肝和脾脏指数(P<0.05)。结论结核分枝杆菌Hsp70、Ag85A、ESAT-6多表位DNA疫苗能在小鼠体内诱导较强的特异性免疫反应,产生高水平的特异性IgG抗体、诱导IL2和IFN-γ分泌和特异性淋巴细胞增殖,并能显著提高抗结核药物对耐药结核病小鼠的疗效。
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关 键 词: | 结核分枝杆菌 表位 DNA疫苗 免疫 疗效 Hsp70 异烟肼 利福平 |
Immunogenicity of multi-epitope DNA vaccine of Mycobacterium tuberculosis and therapeutic effects of the vaccine combined with chemotherapy in a mouse model infected with multi-drug resistant Mycobacterium tuberculosis |
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