大鼠切牙不同程度氟牙症的超微结构观察

目的观察大鼠饮用不同剂量氟水后发生中、重度氟斑牙的下颌切牙超微结构。方法给SD雄性大鼠分别自由饮用0、25、50、100mg/L的含氟水,于不同的时间点用数码相机对大鼠下颌切牙进行唇侧正位照相,将中、重度氟斑牙的左、右侧下颌切牙分别进行扫描电镜及透射电镜的超微结构观察。结果正常鼠切牙的釉质是一层由成釉细胞形成的棕色色素薄层,呈橘黄色、棕黄色;中度氟斑牙表面呈现不同程度棕、白色相间的水平状条纹,透光度降低;重度氟斑牙牙面出现白垩色外观,不透明。扫描电镜显示正常大鼠下颌切牙牙面平整、致密,仅在颈部有小的点窝;中、重度氟斑牙牙面粗糙,点窝在牙冠和牙颈部都明显存在,颈部甚至出现堆积的无釉柱状突起。透射电镜显示随着氟斑牙严重程度加重成釉细胞呈现一系列细胞凋亡的迹象。结论不同程度的氟斑牙分泌期成釉细胞呈现一系列细胞凋亡迹象,且氟斑牙越严重,细胞凋亡的改变越明显。     

高氟对小鼠磨牙牙胚发育的影响

目的 探讨高氟环境对小鼠磨牙牙胚发育的影响.方法 建立小鼠急性氟中毒动物模型,采用HE染色方法,观察高氟环境下颌第一磨牙牙胚发育的蕾状期、帽状期、钟状形态发生期、分化期、分泌期、成熟期成釉细胞形态的变化,并同时观察正常对照小鼠的牙胚发育情况.结果 对照组磨牙发育为钟状期时,实验组仍处于帽状期.实验组钟状分化、分泌期成釉细胞细胞变矮,部分细胞极性消失,细胞排列紊乱.结论 过量氟的摄入可使磨牙发育明显延迟.过量氟对钟状分化、分泌期成釉细胞的细胞形态有较强影响.     

整合素β1在小鼠两种不同发育模式的切牙和磨牙牙胚中的表达

目的 探讨整合素β1在小鼠切牙和磨牙牙胚发育中的作用.方法 采用免疫组织化学方法,观察整合素β1在小鼠切牙发育的分泌前期、分泌期、转换期、成熟期以及磨牙胚发育的蕾状期、帽状期、钟状形态发生期、分化期、分泌期、成熟期的表达.结果 整合素β1在小鼠切牙发育的分泌前期、分泌期、转换期、成熟期成釉细胞表达阳性.中间层、星网层表...     

钙粘附分子在小鼠牙胚发育中的时空表达

目的　观察钙粘附分子 (cadherins)在小鼠牙胚发育表达的时空顺序及分布 ,揭示钙粘附分子对牙齿发育的形态发生和细胞分化的作用及意义。方法　采用免疫组织化学方法 ,观察钙粘附分子在牙胚发育的蕾状期、帽状期、钟状早期、钟状中期、钟状晚期的表达。结果　钙粘附分子在牙胚发育的不同时期均有表达 ,尤其在钟状中期的成釉细胞、成牙本质细胞染色强阳性。结论　钙粘附分子参与牙齿形态发生及细胞的分化 ,推测钙粘附分子与牙釉质、牙本质的发育、分泌、矿化密切相关     

正常兔牙造釉细胞形态学特点

<正>家兔是建立氟斑牙动物模型较为合适的动物,为了观察氟化物对兔牙造釉细胞的损伤,首先要对正常兔牙造釉细胞进行形态学观察。     

染氟成釉细胞差异表达基因的初步筛选

目的利用基因芯片技术筛选染氟成釉细胞的差异表达基因,以观察氟对离体成釉细胞基因表达的影响,探讨氟牙症发病过程中的基因变化,为进一步从分子水平研究氟牙症的发病机制提供线索。方法利用基因芯片分别检测离体培养的成釉细胞和经5mg/L的氟化钠处理48h后的成釉细胞的基因表达谱,并利用生物信息学方法对检测结果进行分析。结果实验组相对于对照组上调2倍以上的基因数为379个,下调2倍以上的基因数为1 014个,差异基因涉及细胞的生物过程调节、细胞的分化、代谢、细胞器、细胞内组分、金属离子的结合、DNA的结合、受体活性、磷酸酶活性、信号转导活性、蛋白质结合作用、转移酶活性、组织的矿化等方面。结论氟化物影响了成釉细胞内基因的表达,氟牙症的发生可能不仅仅是个理化过程,可能与多个生物调节机制有关。     

氟对体外器官培养人牙胚骨形成蛋白表达的影响

目的　通过研究氟对牙胚发育早期骨形成蛋白 (BMP)表达的影响 ,初步探讨氟在早期牙胚发育中的可能作用机制。方法　 4个月的人胚胎 ,取乳牙胚用RPMI16 4 0培养液进行器官培养 8d。免疫组化法研究 2 5mg·L-1和 5 0mg·L-1的氟对分泌前期牙胚的影响 ,观察培养第 2、4、6、8天时BMP表达的变化。采用图像分析仪对免疫组化染色结果进行灰度分析。结果　BMP的表达主要在造釉器。成釉细胞 ,中间层细胞和星网状层细胞均有BMP表达 ,牙乳头细胞或成牙本质细胞不表达BMP。 2 5mg·L-1氟时从培养第 6天开始BMP表达增强 ;5 0mg·L-1氟时从培养第 2天到第 6天BMP的表达增强 ,培养第 8天时BMP的表达降低。结论　氟可能通过促进BMP某一亚型或某几个亚型的表达而在牙胚发育中起作用     

氟诱导牙胚分泌期造釉细胞凋亡的实验研究

目的　探讨氟与分泌期造釉细胞凋亡的关系 ,进一步明确氟斑牙的发病机制。方法　通过建立孕鼠急性氟中毒动物模型 ,用透射电镜、缺口末端标记法 (TUNEL)观察胎鼠牙胚分泌期造釉细胞凋亡。结果　孕鼠高氟引起胎鼠牙胚分泌期造釉细胞下囊腔的形成 ,囊腔上方的造釉细胞发生了程序性细胞凋亡 (PCD)。结论　氟对造釉细胞的毒性作用是通过程序性细胞死亡的方式进行     

氟对小鼠釉鞘蛋白基因表达的影响

目的探讨氟对小鼠釉鞘蛋白基因表达的影响。方法在建立小鼠中度及重度氟斑牙模型的基础上,应用原位杂交技术观察对照组(饮用去离子水)、低氟组(饮水F-为50 mg/L)、高氟组(饮水F-为150 mg/L)小鼠下切牙发育过程中,釉鞘蛋白mRNA在成釉细胞增殖分化期、分泌期及成熟期的表达情况。结果对照组小鼠下切牙形态正常,牙齿表面呈半透明、乳白色,光滑而有光泽。镜下釉鞘蛋白mRNA在成釉细胞增殖分化期表达为阴性;分泌初期细胞内及新生釉基质中开始出现弱阳性表达;至分泌期,细胞内及新生釉基质中均呈强阳性表达;成熟釉质中无釉鞘蛋白mRNA的阳性表达。低氟组小鼠下切牙表面有或宽或窄的白垩色釉质矿化不良区与矿化较好的釉质条带相交替,镜下釉鞘蛋白mRNA在釉牙本质界附近的釉基质中有弱阳性表达。高氟组小鼠的下切牙表面大面积白垩色区域伴局灶性釉质缺损,镜下成釉细胞排列紊乱;在成釉细胞分泌期,釉基质分泌几乎中断;釉鞘蛋白mRNA在新生釉基质表面及釉牙本质界处阳性表达,在成釉细胞分泌期,其表达多次中断,并且在深层釉基质中也可见到釉鞘蛋白mRNA的较强阳性表达。结论氟影响釉鞘蛋白mRNA在成釉细胞、釉基质中的表达,过高浓度的氟周期性抑制成釉细胞分泌釉基质的功能,从而导致釉质的矿化不全、矿化不均及局灶性缺损。     

41℃温热对黑色素瘤小鼠的组织学影响

观察ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠腹腔荷瘤模型，经温热处理后其平均存活时间及温热后不同时间腹腔各主要脏器和肿瘤组织的光镜和龟镜组织形态学变化。以Ｂ１６黑色素瘤细胞经腹腔注入建立荷瘤鼠模型，小鼠腹部水浴加热４１℃６０ｍｉｎ，处理后不同时间进行组织学和酶组织化学分析。     

PREVENTIVE EFFECT OF BORON ON DAMAGE TO CARTILAGE OF RATS WITH INTAKE EXCESSIVE FLUORIDE

Althoughfluorideinthebodymayhelpthe growthofbonesandteethinitsrangeofsafety,ex cessiveintakeoffluoridefromtheenvironmentcan damagetissuesandorgansinhumanandanimal, thusinducingskeletalfluorosis(SF)[1,2].Control lingoffluoridesources(suchastodefluoridate…     

Legg-Perthes病关节软骨功能状态改变及其影响

目的　评价Legg Perthes病早期关节软骨功能状态及其对该病发展的影响。 方法　选择健康杂种幼犬 2 0只 ,雌雄不限 ,采用自身对照方法 ,任选一侧髋为实验侧 ,另一侧作为对照。应用TH胶股骨颈内注射法制作Legg Perthes病动物模型 ,于注胶后 8周、1 2周时幼犬分批处死取材 ,观察组织学变化 ,行软骨基质及软骨下骨蛋白多糖 (Proteoglycan ,PG)和碱性磷酸酶 (Al kalinephosphatase ,AKP)测定。 结果　随着实验时间延长 ,关节软骨病变与骨骺坏死病变逐渐加重 ,实验侧关节软骨增厚 ,早期即可观察到软骨细胞分布较稀散 ,软骨深层空缺软骨陷窝明显增多 ,软骨基质及软骨下骨PG含量显著下降 ,软骨下骨AKP活性明显降低。结论　Legg Perthes病时关节软骨功能早期已有明显障碍 ,其与股骨头骨骺坏死病变可相互促进 ,互相影响     

五氯硫酚的毒性研究

为安全性评价提供毒理学资料对五氯硫酚用不同种属动物进行了多项毒性试验。结果表明，其经口ＬＤ５０雄性大鼠为９０９０ｍｇ／ｋｇ，而对小鼠大于１０ｇ／ｋｇ，属低毒物质。其蓄积系数大于５，故对小鼠无明显蓄积毒性。对家兔皮肤粘膜刺激作用轻微，但对豚鼠具轻度皮肤致敏作用。Ａｍｅｓ试验及微核试验中未显示诱变性。９０ｄ喂养试验中，中、低剂量组在血象、尿检、生化、病理及生长发育各观察指标未见异常改变，而高剂量组雄性大鼠的总进食量与体重增长明显低于对照，提示亚慢性毒作用阈剂量为９０９ｍｇ／ｋｇ。本研究未证实五氯硫酚具有卟啉原性作用。     

The development of an OxyHb animal model in mice and the study on OxyHb-induced apoptosis of mouse brain cells in vivo

Objective On the basis of developing a new animal model for oxyhemoglobin (OxyHb) injection into subarachnoid space in mice, this research was to explore the temporal dependence and spatial distribution of OxyHb- induced apoptosis in the mouse brain cells in vivo and the mechanism of neurocyte injury induced by OxyHb. Methods The animal model for OxyHb injection into subarachnoid space in mice was developed. Mice were divided randomly into the experimental group (n=40) and the control group (n= 35). The control group received saline injection (50 μL ) and the experimental group received OxyHb injection (50 μL ), both into the subarachnoid space. The mice of the two groups were subdivided according to different postoperative time (3 h, 6 h, 12 h, 24 h and 48 h). The apoptosis or necrosis of cells was distinguished with microscopy (HE staining), transmission electron microscopy and TUNEL method. Results The distribution of apoptosis was mainly in the ipsilateral neocortex and bilateral hippocampal gyrus. The apoptotic mouse brain cells showed morphological changes in the experimental group by HE staining and transmission electron microscopy. The count of TUNEL-positive cells showed substantial increase in the experimental group, and there was a significant difference between the control and experimental groups, and the number of OxyHb- induced apoptotic cells decreased with time. Conclusion OxyHb in subarachnoid space in mice can induce apoptasis, but not necrosis of mouse brain cells in viro. The apoptotic brain cells show the pattern of temporal dependence and spatial distribution. It is suggested that the early treatment should be the method of first choice for treating the hemorrhagic brain injury.     

新生小鼠睾丸组织异体异位移植物中精子形态及功能的研究

目的采用卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)技术探讨新生小鼠睾丸组织异体异位移植到裸鼠体内后所生成精子的受精能力。方法将含有原始生精细胞的新生1-2 d小鼠睾丸组织异体异位移植到BALB/c-nu/nu免疫缺陷小鼠背部皮下。8周后取出移植物,通过常规染色和电镜技术对生精小管中生精细胞组成和形态进行观察;以薄层明胶水解法检测精子顶体蛋白酶活性;采用ISCI技术检测移植物中具有成熟形态精子的受精能力。结果移植物的HE染色发现,新生小鼠睾丸组织在裸鼠体内已启动并进行精子发生过程,生精小管中含有包括精子在内的所有类型生精细胞;移植物组织经处理后,可计数到具有镰刀头状的长尾精子约1×103个/mg移植物;透射电镜标本中观察到的精原细胞和精母细胞均具有正常超微结构;薄层明胶水解法检测可观察到顶体蛋白酶呈阳性反应的精子;ICSI结果显示,单纯ICSI处理组与ICSI+电激活组均有受精和卵裂现象发生。结论仅含有原始生精细胞的新生小鼠睾丸组织在异体异位移植到裸鼠体内后,可以产生形态正常并具有受精能力的精子。     

“硼复方”对过量氟实验大鼠血清脂质过氧化和RNA合成的影响

目的　探讨“硼复方”对氟骨症的治疗效果及血清脂质过氧化物、抗氧化物质和骨、软骨核糖核酸合成的影响。方法　 78只SD大鼠 (4～ 5周龄 ,体重 5 0～ 90 g) ,随机分为对照组、低过剂量氟组、高过剂量氟组及相对应的“硼复方”治疗组。测定过量氟实验大鼠用“硼复方”治疗后血清、四肢骨氟含量 ,血清SOD、ALP、MDA、骨和软骨RNA的变化。结果　①“硼复方”治疗后高过剂量氟组大鼠血清和四肢骨氟分别降低 4 7.81%和 2 9.15 % ;②过剂量氟组大鼠血清SOD在染氟后显著下降 ,“硼复方”治疗后明显恢复 ;③染氟后高过剂量氟组血清MDA明显升高 ,“硼复方”治疗后降低 ;④治疗前后实验鼠骨与软骨中RNA含量无明显差异。结论　用“硼复方”治疗实验大鼠氟骨症有降低体内氟含量 ,减轻过量氟性的过氧化损伤 ,增强机体抗氧化能力的作用 ,但“硼复方”对过量氟导致的骨和软骨含量的减少无明显改善作用     

摄入过量氟实验大鼠肾脏形态损害与体内氟含量及血清MDA的关系

目的探讨氟中毒肾脏病理形态损害发生的机理。方法70只4～5周龄,体重50～90g的Wistar大鼠随机分为对照组、低、中、高剂量氟组,观察3月与5月。光镜观察各实验组大鼠肾脏病理形态学变化,血清MDA含量用硫代巴比妥酸法测定,血清氟用氟离子选择电极法测定。结果摄入过量氟引起肾脏的病理变化为皮质及髓质呈灶状散在分布的肾小管上皮细胞坏死、扩张,间质纤维母细胞及胶原纤维灶状增生。随摄入过量氟的浓度增高,肾损害率由58.33％增高到90.00％。与肾损害率密切相关的因素是肾氟含量。结论滞留在肾脏的过量氟是引起肾脏皮质与髓质肾小管损害的直接因素。