小反应体积实时定量PCR的可行性评价

目的 从扩增稳定性、扩增效率以及可靠性等多方面评估实时定量PCR(RtPCR)反应小体积的可行性,同时确定适合小体积体系的模板量.方法 将实验分为10、15、20μL 3个体积组,每组分别采用0.1、0.2、0.3、0.4μL的大鼠cDNA为模板,进行大鼠β-actin mRNA的RtPCR扩增.通过扩增曲线和熔解曲线考察反应的稳定性,以梯度模板拟合标准曲线获得反应的扩增效率,其线性相关程度反映模板量是否合适.另外,构建大鼠降植烷诱导的关节炎(pristane-induced arthritis, PIA)模型,采用选定的反应体系,分别对模型组和正常组大鼠脾脏TNF-α mRNA进行扩增,通过TNF-α的相对表达趋势反映小体积扩增的可靠性.结果 在大鼠β-actin mRNA的RtPCR扩增中,10、15、20μL 3个体积组均能特异稳定地进行扩增,并保证高扩增效率.而且每个体积组中的模板梯度表现出很好的线性相关趋势.同时选用10μL和20μL反应体积、0.2μL模板对关节炎大鼠脾脏进行TNF-α mRNA扩增,结果一致表现出了预期的显著性上调.结论 实验证实10μL、15μL等小反应体积应用于RtPCR扩增中是可行的,具有较好的稳定性和可靠性,同时0.1～0.4μL cDNA模板在3种体系的合适模板范围内.这种较小的PCR反应体积,不仅节省了试剂和实验材料,对一些来之不易的临床标本尤为重要,也利于高通量大规模的RtPCR检测的实现.     

客车价值再定义:黄海欲做"和谐公交"领路人

2010年"十一"假期前夕,北京的堵车现象像传染病似地在全国蔓延开来,深圳、成都、南京、济南……城市交通开始由"半身不遂"转向"全面瘫痪",甚至很多三线城市也出现了少见的交通拥堵.     

南昌生米大桥主桥总体设计

南昌生米大桥是南昌市外环快速路跨赣江的重要城市桥梁.主桥为(75+2×228+75) m中承式钢管混凝土系杆拱.介绍该桥桥型构思、方案比选以及主桥的总体设计.     

圆梦

那还是三十多年前的事了,师傅收了我这个关门弟子.师傅个高,技术精,工作起来认真得近乎刻板,唯一的嗜好便是钓鱼,一辆破旧的"永久"自行车便是他的交通工具,骑着它,师傅几乎跑遍了厂区周围的大小池塘和水库.     

摩托车离地间距调节装置

摩托车离地间距也称间隙,是指车身最低点与地面的垂直距离。加大离地间距故然可提高摩托车的可通过性,适应野外骑行的需要,但在平坦的公路上高速奔驰时,过高的离地间距又会影响摩托车的稳定性能。因此,不同类型的摩托车设计的离地间距是有差异的。若能研究开发一种离地间距调节装置,以同时满足摩托车的越野和道路驾乘之需还是很有必要。     

高压氧对人血淋巴细胞DNA氧化损伤的影响

目的 探讨高压氧治疗对人体血液淋巴细胞ＤＮＡ氧化损伤的影响。方法 １６名健康男性志愿者随机分为甲,乙两组,均属于ＨＢＯ（０．２５ＭＰａ）治疗环境中,每天暴露２０分钟３次,中间吸空气分钟,共３天。甲组单纯ＨＢＯ处理,乙组在ＨＢＯ暴露前三天开始静脉注射维生素Ｃ１ｇ,每日１次。分别于第一天ＨＢＯ暴露前和暴露后即刻,１２小时,２４小时,第２天和第３天ＨＢＯ暴露前和暴露后即刻采集静脉血样,经单细胞凝胶电泳分     

采用ECC的积极意义——浅析深圳地铁正线信号系统扩容

根据西门子公司ATC系统地面信号联锁系统的特点,利用元件控制计算机(ECC)单元对这两个独立的信号总线网络的中继和耦合功能,既可实现既有线路系统的扩容,又能做到集中控制,从而大幅降低系统设备的投资与运营成本。     

春风悠悠乐无极

春风悠乐（CF125），一款为丰富年轻人绚丽生活而生的高端踏板车，打造着时尚的主题，靓丽的标签，极致而奢华，经典而完美，注定会成为市场侧目的焦点。