芳香硫酸酯酶定点饱和突变方案的比较

目的比较随机引物与精确引物PCR扩增实施绿脓杆菌芳香硫酸酯酶(Pseudomonas aeruginosa arylsulfatase, PAAS)定点饱和突变的整体效率及成本,以建立高效实用的定点饱和突变方案。方法以大肠杆菌碱性磷酸酶(Escherichia coli alkaline phosphatase, ECAP)与PAAS融合表达质粒为模板,分别用针对PAAS目的位点的随机引物、精确引物等量混合物及单个精确引物,进行全质粒PCR扩增构建定点饱和突变体库;碱裂解细胞后高通量测定PAAS突变体与ECAP活性比值进行筛选,比较3种定点饱和突变建库方案需筛选的单克隆数量、所获突变体种类、整体耗时、整体成本及影响因素。结果用随机引物PCR对M72位定点饱和突变有明显密码子偏好性,筛选超600个单克隆仅获得10种预期突变体,但对G138位定点饱和突变未见明显的密码子偏好性且筛选不到150个单克隆获得18种预期突变体;精确引物等量混合物对M72位实施定点饱和突变,筛选不超过190个克隆成功获得19种预期突变体;单个精确引物对M72位逐个PCR实施定点饱和突变,仅各筛选2个单克隆就获得19种预期突变体。单个精确引物逐个PCR实施定点突变所获饱和突变体库完整,需筛选的单克隆数最少,总耗时和总成本最低;相比之下,用随机引物和精确引物等量混合物实施定点饱和突变时,所需筛选的单克隆数、整体耗时及成本均显著增加。结论解析序列-活性关系时,用单个精确引物逐个PCR实施定点饱和突变有显著整体成本和效率优势;仅筛选阳性突变体时,用精确引物等量混合物进行PCR建库在成本和效率上更有优势。     

油气管道的清管与化学处理

文中首先介绍了清除油气管道内结蜡的两种方法及两种化学除蜡剂。然后提出了一种清管器与化学处理法相结合的一种清管工艺。最后叙述了管内壁防腐技术及清管器的选择原则。     

加快上海海洋工程发展步伐

这几年我国的造船业、海洋工程有了突飞猛进的发展，取得了举世瞩目的业绩。但与世界先进国家相比，海洋工程还有一定的差距。作者提出若干建议，以抓住机遇，利用好优势，采取有力措施，加快发展海洋工程步伐，走向世界的前列。     

印度大力投资炼油业

在全球经济高速增长、工业化程度不断提高以及人口增长的情况下，印度未来的能源需求正成为令人关注的问题。印度是亚洲第三大发展中经济体，其人口占全球人口总数的15％，但油气资源仅占全球的0．5％。随着生活水平的不断提高，印度不得不进口大量低硫柴油和天然气，以防电力供应不足。     

深水开发中的海底管道和海洋立管

随着中国海洋石油天然气工业的发展,越来越多的油气资源在水深约500米的深水区被勘探和发现.不管用于处理的浮式装置采用什么类型,海底管道和海洋立管始终是海洋基础结构中的关键部分.本文探讨了在中国海域具有重大应用潜力的各种各样的管道和立管概念,重点论述了类型选择、工业标准、工程挑战、解决方案和海上安装.不同类型间进行了简单的对比,给出几个例子展示了所提出的概念.最后得出结论,某些管道和立管方案在中国的深水开发中是非常有潜力的和可行的.     

世界深海油气钻采装备的发展趋势及我国现状

本文首先阐明海洋油气资源开发向深海海域发展的必然性,进而对世界深海油气钻采装备的发展特点和趋势、我国海洋油气钻采装备的发展现状和差距进行分析,指出加快发展我国深海油气钻采装备,是推进国家海洋强国战略、减缓国家能源危机和我国参与国际大洋开发竞争的迫切需要.     

管道水压试验的又一方法：选用小型柱塞泵的经济分析

主要分析了在长输管道水压试验中选用小型柱塞泵打压的使用情况及经济效益情况。