粒-巨噬细胞集落刺激因子对大鼠血钙及甲状腺C细胞数的影响

甲状腺C细胞位于甲状腺滤泡旁或滤泡细胞间，其主要的生理作用是分泌降钙素（calcitonin，CT）。有报道粒一巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte macrophage-colony stimulating factor，GM—CSF）与核因子调节降钙素受体的表达和功能。但是GM—CSF与血钙浓度及甲状腺c细胞之间的关系尚不清楚，也未见相关报道。我们采用GM—CSF刺激大鼠，然后用全自动生化分析仪检测血钙浓度并用免疫组化的方法观察C细胞数量及形态，旨在探讨GM—CSF与C细胞的关系。     

T_3、T_4在甲状腺组织中定位免疫组化研究

本文应用活体粗针穿刺和PAP免疫组化技术对17例初发GD、7例治疗后GD、13例AT、5例正常甲状腺及某些肿瘤甲状腺组织中T_3、T_4的定位及其相对含量进行了研究。T_3、T_4在甲状腺组织中的定位分布相似,主要位于滤泡腔胶质中,功能亢进者所有胶质均呈浓染着色,且部分滤泡细胞近滤泡腔缘的胞浆中也出现较弱的染色反应。GD未治疗者甲状腺组织内T_3、T_4相对含量显著增加,经治疗后明显下降。AT病变中的嗜酸性变细胞基本失去了制造T_3、T_4的功能。     

Fas，FasL，Bcl—2在自身免疫性甲状腺疾病发病机理中的作用

目的 了解细胞凋亡相关蛋白Fas，FasL和Bcl-2的表达在自身免疫性甲状腺疾病发病机制及病理变化中的作用及意义。方法 采用免疫组织化学方法，检测20例桥本甲状腺炎、20例Graves病及20例甲状腺腺瘤(对照组)患者甲状腺标本中Fas，FasL和Bcl-2的表达及分布。结果 Fas在所有的标本中表达，主要分布于甲状腺滤泡细胞的表面和细胞质上。除了3例甲状腺瘤标本外，其余的都有FasL表达。Bcl-2表达于15例桥本甲状腺炎，19例Graves病以及17例甲状腺瘤的甲状腺滤泡细胞上。在甲状腺瘤的滤泡细胞上表达中等强度的Fas，很少或是没有表达FasL。在桥本甲状腺炎中Fas和FaasL免疫染色强阳性甲状腺滤泡细胞多分布于浸润淋巴滤泡附近，浸润淋巴细胞中Fas，FasL免疫染色相对较弱。在Graves病中，Fas的表达强度与桥本甲状腺炎类似，但是FasL的表达却更弱。在Graves病和甲状腺瘤组织中，Bcl-2的表达两者类似。但在桥本甲状腺炎组织中，分布于浸润淋巴细胞附近的甲状腺滤泡细胞以及生发中心的淋巴细胞上，Bcl-2的表达很弱。结论 Fas，FasL和Bcl-2的表达在桥本甲状腺炎和Graves病中相似。FasL的高表达和Bcl-2的低表达可能引起桥本甲状腺炎滤泡细胞的凋亡。进一步证明了这三种细胞凋亡因子在自身免疫性甲状腺疾病发病机制中的作用。在桥本甲状腺炎中，滤泡细胞的凋亡并非由浸润淋巴细胞其FasL发挥作用直接杀伤，但是它们能通过提供细胞因子提高滤泡细胞自身Fas，FasL的表达，从而导致滤泡细胞的凋亡。     

大鼠颌下腺细胞中降钙素的定位及含量测定

目的探讨大鼠颌下腺细胞中是否表达降钙素(CT),为进一步证明颌下腺与甲状腺C细胞具有同源性提供依据。方法采用细胞培养、免疫细胞化学SP法以及原位杂交法进行降钙素的细胞定位及基因定位,并用酶联免疫法(ELISA)测定培养液中降钙素的含量。结果大鼠颌下腺上皮细胞呈CT免疫反应阳性,阳性物质分布于胞质,胞核呈阴性反应。上述细胞同样含有CT mRNA杂交信号,信号物质亦分布于胞质内,胞核呈阴性反应。ELISA法测定大鼠颌下腺细胞培养液中降钙素的含量明显高于对照组。结论大鼠颌下腺上皮细胞能分泌CT,提示大鼠颌下腺上皮细胞可能与甲状腺C细胞具有同源性。     

小儿肾病综合征红细胞膜电荷变化

观测３６例肾病综合征（ＮｅｐｈｒｏｔｉｃＳｙｎｄｒｏｍｅ，ＮＳ）患儿红细胞（ＲＢＣ）膜电荷量及１８例ＮＳ患儿ＲＢＣ表面涎酸含量的变化。结果表明，ＮＳ患儿ＲＢＣ膜ＡＢ结合量较正常儿童明显降低（Ｐ＜０．００１）；表面涎酸含量与正常儿童相比无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。提示：ＮＳ时ＲＢＣ膜电荷呈“功能性”降低；ＮＳ患儿尿蛋白量与其ＲＢＣ膜电荷量呈负相关（ｒ＝－０．５３４，Ｐ＜０．００１）。     

Fas,FasL,Bc1-2在自身免疫性甲状腺疾病发病机理中的作用

目的　了解细胞凋亡相关蛋白Fas,FasL和Bcl 2的表达在自身免疫性甲状腺疾病发病机制及病理变化中的作用及意义。方法　采用免疫组织化学方法 ,检测 2 0例桥本甲状腺炎、2 0例Graves病及 2 0例甲状腺腺瘤 (对照组 )患者甲状腺标本中Fas,FasL和Bcl 2的表达及分布。结果　Fas在所有的标本中表达 ,主要分布于甲状腺滤泡细胞的表面和细胞质上。除了 3例甲状腺瘤标本外 ,其余的都有FasL表达。Bcl 2表达于 15例桥本甲状腺炎 ,19例Graves病以及 17例甲状腺瘤的甲状腺滤泡细胞上。在甲状腺瘤的滤泡细胞上表达中等强度的Fas,很少或是没有表达FasL。在桥本甲状腺炎中Fas和FasL免疫染色强阳性甲状腺滤泡细胞多分布于浸润淋巴滤泡附近 ,浸润淋巴细胞中Fas ,FasL免疫染色相对较弱。在Graves病中 ,Fas的表达强度与桥本甲状腺炎类似 ,但是FasL的表达却更弱。在Graves病和甲状腺瘤组织中 ,Bcl 2的表达两者类似。但在桥本甲状腺炎组织中 ,分布于浸润淋巴细胞附近的甲状腺滤泡细胞以及生发中心的淋巴细胞上 ,Bcl 2的表达很弱。结论　Fas,FasL和Bcl 2的表达在桥本甲状腺炎和Graves病中相似。FasL的高表达和Bcl 2的低表达可能引起桥本甲状腺炎滤泡细胞的凋亡。进一步证明了这三种细胞凋亡因子在自身免疫性甲状腺疾病发病机制?     

桥本氏甲状腺炎的过氧化物酶免疫组织化学研究

用免疫组化方法观察30例桥本氏甲状腺炎过氧化物酶的分布及改变。甲状腺过氧化物酶(TPO)在桥本氏甲状腺炎的阳性率及相对含量都明显低于甲亢及正常对照组。TPO阳性见于散在的小滤泡及小细胞团。桥本氏甲状腺炎TPO明显减少和碘有机化障碍有关,TPO减少的主要原因是滤泡细胞受损。     

单纯性肥胖儿童免疫功能的研究

使用流式细胞仪（ＦＣＭ）对１２名单纯性肥胖症儿童及２０名正常儿童进行了９项淋巴细胞亚群检测对比，结果发现肥胖症儿童ＣＤ３＋细胞、ＣＤ４＋细胞及ＣＤ４＋／ＣＤ８＋之比明显降低（Ｐ＜０．０１）；ＣＤ１９＋细胞、ＣＤ５６＋细胞、ＨＬＡ－ＤＲ＋细胞均出现有意义的升高；ＣＤ８＋细胞、ＣＤ２５＋细胞、ＣＤ５７＋细胞虽较正常儿童有所升高，但经统计学处理无明显差异。检测结果表明：单纯性肥胖儿童的免疫功能有较明显紊乱。提示肥胖症儿童的脂肪酸摄取过剩对免疫功能有一定损害。     

血浆铜蓝蛋白在甲状腺肿瘤中的鉴别诊断意义

为了探讨血浆铜蓝蛋白在甲状腺良恶性肿瘤中的鉴别诊断价值，应用免疫组织化学的方法检测了８６例甲状腺肿瘤及肿瘤样病变的ＣＰ表达，发现所有的滤泡性腺癌和９５％的乳头状腺癌表现有ＣＰ的免疫阳性反应，而良性甲状腺肿瘤和肿瘤样病变中除１例嗜酸性细胞腺癌外，均未发现有ＣＰ的免疫染色。提示ＣＰ在甲状腺癌的生长、代谢过程中起重要作用，它可能成为甲状腺癌的标志物，对甲状腺癌的标志物，对甲状腺良恶性肿瘤的鉴别诊断具有重     

流式细胞术检测淋巴细胞亚群的研究

使用流式细胞仪检测了１名传染性单核细胞增多症（ＩＭ）患儿不同病期淋巴细胞亚群的动态变化；１２名肥胖患儿及２０名健康对照儿童的淋巴细胞亚群的比较。检测结果：ＩＭ患儿急性期ＣＤ４＋细胞（４．２％）显著减少，ＣＤ８＋细胞（７２．１％）及ＣＤ８＋ＨＬＡ－ＤＲ＋细胞（６６．２％）显著增加，恢复期及完全恢复后，上述亚群即随之好转至完全正常。肥胖儿童与正常儿童比较：ＣＤ３＋细胞、ＣＤ４＋细胞及ＣＤ４＋／ＣＤ８＋均明显降低，ＣＤ１９＋细胞、ＣＤ５６＋细胞、ＨＬＡ－ＤＲ＋细胞、ＣＤ２５＋细胞均出现有意义的升高。     

大骨节病儿童及成人关节软骨细胞凋亡特征的比较

目的探讨细胞凋亡及相关调控因子Bcl-2、Bax在大骨节病(KDB)儿童和成人关节软骨中的表达及分布的异同。方法收集15例大骨节病儿童和12例大骨节病成人,采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的脱氧核糖核酸缺口标记(TUNEL)技术和Bcl-2、Bax免疫组化抗生物素蛋白-生物素-碱性磷酸酶(B-SA)法染色,比较正常儿童和成人与大骨节病儿童和成人关节软骨中软骨细胞凋亡及相关调控因子Bcl-2和Bax的表达。结果KDB儿童关节软骨中层凋亡阳性细胞数较正常关节软骨显著增多(P<0.01);成人KDB关节软骨凋亡阳性细胞分布以表、中层显著(P<0.05)。②KDB儿童关节软骨表、中层Bcl-2、Bax的表达显著高于正常关节软骨中的表达(P<0.01),其中表层最高。③KDB成人关节软骨各层Bcl-2、Bax的表达显著高于正常关节软骨中的表达(P<0.05),其中表层最高。④KBD成人关节软骨各层凋亡细胞、Bcl-2、Bax阳性表达率均较KBD儿童显著增高,且Bax的表达较Bcl-2表达增多。结论KBD成人关节软骨凋亡细胞、Bcl-2、Bax阳性表达率均较KBD儿童显著增高,且Bax的表达较Bcl-2表达增多。     

克山病病区和低硒非病区居民发铜、锌、锰、铁含量的对比研究

用原子吸收光谱法对比测定了克山病病区（陕西彬县和云南牟定）、非病区（陕西礼泉）和低硒非病区（四川南部）健康人发铜、锌、锰、铁含量。发现：①与非病区相比，两病区儿童和成人发铜，两病区儿童和彬县成人发锰和发锌无差异；但牟定成人发锌低，而发锰高；②与低硒非病区相比，彬县成人发铜低，儿童发锌高；牟定儿童发铜高，成人发锌低；两病区成人发锰高；③病区儿童和成人发铁不仅高于礼泉，也高于南部，提示病区低硒人体铁水平与克山病发病的关系值得进一步探讨。     

自身免疫性甲状腺炎和甲亢原位免疫电镜研究

利用ABC免疫酶技术和一组淋巴细胞亚群、巨噬细胞,HLA-DR抗原的单克隆抗体及免疫电镜技术观察了10例甲状腺炎,7例甲亢伴甲状腺炎,6例甲亢。结果发现甲状腺内有大量活化T淋巴细胞浸润。引人注目地是甲状腺上皮细胞可异常表达DR抗原,且随着淋巴细胞浸润的增多,炎性破坏加重,甲状腺上皮细胞DR抗原的异常表达亦增多。I_2~+、T_8~+、T_4~+细胞、M_5~+细胞和Leu7~+细胞均可与甲状腺滤泡上皮细胞接触并侵入上皮细胞内。免疫活性细胞的直接杀伤作用,可能是甲状腺上皮细胞受损的重要因素。     

儿童系统性红斑狼疮附15例临床分析

本文报道了15例儿童系统性红斑狠疮(SLE)。分析了其临床表现、内脏受累及实验改变,并且与17例随机抽取的成年患者进行比较,结果表明儿童SLE的肾脏和心脏损害比成人严重(P<0.05),此外,淋巴细胞转化率降低在儿童患者亦更为普遍(P<0.05)。儿童患者其它器官损害亦多于成人,但统计学上无显著差异。中西医结合治疗效果较为满意。本文还讨论了儿童SLE的发病年龄、性别、临床表现、诊断和治疗等问题。     

甲状腺上皮细胞DR抗原异常表达及影响因素

本文应用单克隆抗体及免疫组化技术对37例自身免疫性甲状腺炎,23例甲亢及13例甲亢伴甲状腺炎甲状腺上皮细胞DR抗原异常表达进行原位研究。结果发现甲状腺上皮细胞DR抗原的异常表达与甲状腺浸润细胞总数、炎性破坏程度及外周血TSH、甲状腺球蛋白抗体、甲状腺微粒体抗体量呈正相关。     

Foxp3在自身免疫性甲状腺病患者外周血和病变组织中的表达

目的检测自身免疫性甲状腺病(AITD)患者Foxp3的表达,探讨调节性T细胞(Treg)与AITD发病的关系。方法采用Real-time PCR检测AITD患者及健康对照者外周血及甲状腺组织中Foxp3mRNA的表达;免疫组织化学方法检测甲状腺内Foxp3蛋白的表达;Western blot方法检测外周血单个核细胞Foxp3蛋白的表达。结果与对照组相比,AITD患者外周血单核细胞Foxp3mRNA表达显著降低(P<0.05);桥本甲状腺炎(HT)患者外周血单个核细胞Foxp3蛋白表达下降(P<0.05),Graves病(GD)患者外周血单个核细胞Foxp3蛋白表达与对照组相比无差异(P>0.05)。与对照组相比,HT患者甲状腺组织Foxp3mRNA和蛋白表达均升高(P<0.05),而GD患者甲状腺组织Foxp3mRNA和蛋白表达水平与对照组相比无显著性差异(P>0.05)。结论 CD4+CD25+Foxp3+Tregs的减少和/或功能的减退可能是诱导AITD尤其是HT发生的因素。     

西安地区乙肝病毒感染的血清流行病学调查——乙肝疫苗接种前的基线研究

我们在西安地区对1384人进行了HBV感染情况的血清流行病学基线研究。结果表明托儿所儿童的抗-HBs阳性率和HBV总感染率(至少在可检测的HBV指标方面)显著低于学龄儿童和成人。8岁以上儿童上述两个率与成人水平很接近。据此我们提出以下原则供在我国进行乙肝疫苗接种决策时参考:(1)在婴幼儿中应尽早普种乙肝疫苗;(2)对3岁以下儿童可考虑推广不做筛选即进行接种的方案。至于3岁以上儿童的按种方案以及学龄儿童是否有必要进行接种的问题,应该进一步加以研究。本研究还为仅用一项或二项HBV感染的血清学指标来做接种前大规模人群筛查的可能性提供了依据。     

Induction of animal model of Graves' disease in BALB/c mice

Objective To construct an animal model of Graves' disease (GD) by immunizing BALB/c mice with hM12 cells co-expressing major histocompatibility complex (MHC) class Ⅱ molecules and human thyrotropin receptor (TSHR) molecules. Methods BALB/c mice in experimental group (H-2d) were immunized with hM12 cells Intraper-itoncally every 2 weeks for six times, while mice in control group were immunized with M12 cells. Five weeks later, the thyroids were histologically examined, and serum samples were tested for thyroid-stimulating antibodies (TSAb) and thyroid hormone levels. Results One BALB/c mouse in experimental group developed Graves'-like disease. Total T4 and T3 levels in this mouse were above the upper limit of normal, TSAb activity was displayed in its serum. The thyroid histologically showed the features of thyroid hyperactivity including thyrocyte hypercellularity and colloid absorption.None of control mice developed Graves'-like disease. Conclusion An animal model with some characteristics of human Graves' disease was successfully induced and the model will facilitate studies aimed directly at understanding the patho-genesis of autoimmunity in Graves' disease.     

Study on T lymphocyte subsets and NK cells in patients with Graves＇ disease combined with type 2 diabetes

Objective To investigate changes in T lymphocyte subsets and NK cells in patients with simple Graves' disease (GD)and Graves' disease combined with type 2 diabetes mellitus (GD/T2DM). Methods Fifteen cases of GD/ T2DM were selected from our hospital from November 2001 to November 2004. Before and after therapy thyroid function, thyroglobulin antibody (TGA), thyroid microsomal antibody (TMA) and blood glucose level were measured, and T lymphocyte subsets (CD3, CD4, CD8, CD4/CD8) and NK cells (CD56) were measured by immunofluorescence double labeling monoclonal antibody and flow cytometry, respectively. At the same time, comparison was made with simple GD (15 cases), T2DM (15 cases) and healthy control (20 cases). Results Before therapy, CD4/CD8, CD4 and NK cells in GD/T2DM were less than normal, and there was no significant difference in comparison with simple GD (P<0.05). In T2DM group, only CD4/CD8 and CD4 were less than those of healthy controls (P<0.05). When thyroid function recovered after 1 to 3 months of methimazole treatment in both GD/T2DM and simple GD groups, various indexes recovered, which were more obvious in simple GD. Conclusion Immune hypofunction of GD may be the key to the immune abnormality of GD/T2DM, which is more significant than that of simple GD or T2DM. The recovery of thyroid function and immune abnormality is not consistent, and the recovery of GD is more significant than that of GD/T2DM.