通用腺伴随病毒载体的构建及表达报告基因GFP的实验研究

目的构建基因治疗通用型腺伴随病毒(AAV)载体并检测其转染外源基因作用。方法使用限制性内切酶切除pSSV9int质粒中的AAV病毒Rep和Cap基因元件后,插入了重组腺病毒专用穿梭质粒-pACCMVpLpA的含有CMV启动子、多克隆位点(MCS)和多聚腺苷酸信号(PolyA)的表达盒,构建了重组AAV通用载体质粒pSSHG-CMV。在该质粒MCS插入绿色荧光蛋白(GFP)基因后,使用pSSHG-CMV-GFP、GFP140和pAAV/Ad三种质粒共转染293包装细胞,制备GFP重组AAV。应用斑点杂交实验检测重组病毒滴度,并将该病毒感染新生大鼠NIH3T3细胞,荧光显微镜观察GFP表达。结果重组AAV的滴度在浓缩前可达2×1011cfu/mL,浓缩后可达2×1013cfu/mL,表明成功地构建了重组AAV载体。插入外源基因GFP后,在包装病毒和辅助质粒的联合作用下,能产生具有感染性的重组AAV。感染了重组GFP-AAV的大鼠NIH3T3细胞表达了明显的GFP荧光。结论构建的重组AAV通用载体pSSHG-CMV可转染外源基因,这为进一步的基因治疗奠定了基础。     

CBTC区域控制器若干技术研究

区域控制器是CBTC系统的核心设备,它根据列车和地面的动态信息,实时生成列车行车许可命令,并通过无线通信系统传输给车载子系统,保证其管辖内的所有列车的安全运行,并实现移动闭塞。在移动闭塞设计中,对列车位置的准确识别是移动授权分配的前提,是复杂运营场景的控制基础。在对区域控制器列车位置识别分析的基础上,展开分析列车出入段、跨区切换等复杂运营场景。     

焊接气溶胶静电采样仪研制

应用静电技术及电镜样品制备技术，研制了静电采样仪，并对其主要性能进行了测定，推荐了采样仪的电参数及采样时间，试验结果证明，应用静电采样仪能直接在现场进行焊接气溶胶粒子的采样，采样后不必经中间处理即可在电镜下进行观察分析。     

天津富民桥施工过程主梁应力分析

天津富民桥为(157.081 86.4) m单塔空间索面自锚式悬索桥.通过对天津富民桥施工过程中主梁关键截面的应力跟踪测试及对测试应力数据的处理分析,掌握主梁在施工各阶段的结构受力情况.分析表明,主梁在施工过程中受力比较合理,基本处于受压状态,拉应力较小,均在安全控制范围内.     

庆大霉素中毒豚鼠蜗核SP免疫反应阳性神经元的变化

用免疫组化方法探讨庆大霉素耳中毒时蜗核ＳＰ免疫反应神经元的胞体截面积及细胞数的变化。结果发现庆大霉素１００ｍ ｇ·ｋｇ－ １·ｄ－ １腹腔注射后１ｄ,豚鼠蜗核ＳＰ样神经元胞体截面积立即发生了变化,并持续到连续注药第２１ 天;ＳＰ样神经元细胞数量的相对变化发生在注药３ｄ 以后。结果提示：①庆大霉素中毒豚鼠蜗核神经元的变化和耳蜗的病变可能同时发生或蜗核早于耳蜗病变。②临床上治疗氨基甙类抗生素所致耳聋应兼治中枢病变并尽早实施     

山区公路涵洞建设若干关键问题

涵洞是山区公路排水系统中重要的构造物,其所处的地形、地质、水文条件一般比较复杂．只有恰当地处理好设计及施工过程中的一些关键技术问题,才能充分实现其使用效果,保证路基的安全。     

城市轨道交通系统杂散电流的分布规律研究

针对城市轨道交通直流供电系统特点,建立杂散电流的计算模型并进行仿真,根据仿真结果分析各个参数对杂散电流分布规律的影响,为系统设计提供理论依据。     

侧向限制法软土处理技术研究

结合工程实际,经分析和探索,采用了一种新的深层软土地基处理方法——侧向限制法软土处理技术,取得了较好效果。本文主要介绍侧向限制法软土处理技术的应用、施工及施工工艺、施工注意事项、观测结果等实施情况,以及在其他类似工程的应用结果。     

城市轨道交通上盖开发车辆段7号可动心轨辙叉道岔减振降噪性能研究

城市轨道交通车辆段物业开发是大中城市开发"新型土地资源"的重大举措,其建设规模不断扩大,由此带来的环境振动噪声问题逐年凸显,车辆段内轮轨振动与摩擦、钢轨接头及道岔有害空间处的轮轨冲击是振动噪声的主要来源.针对此,基于面向振源的上盖开发车辆段无缝化减振降噪技术理念,研发城市轨道交通50 kg/m钢轨7号可动心轨辙叉道岔,...     

铁路预应力混凝土连续梁节段胶拼施工技术

梁体采用节段预制装配式施工的项目越来越多,铁路连续梁中采用节段预制胶结拼装施工的尚不多见。结合周淮特大桥跨新运河三联(40+56+40)m预应力混凝土连续梁工况,对预制拼装连续梁、节段拼装架设、胶接拼装、张拉压浆等工艺进行介绍。实践表明施工质量符合设计要求,工艺可行且先进。