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运用核酸杂交和聚合酶链式反应(PCR)对临床确诊的61份子宫颈癌Ⅱ~Ⅲ期标本进行了人乳头瘤病毒(HPV)16型E7基因的检测。非同位素地高辛标记探针斑点杂交阳性检出率为45.9%,PCR检测阳性率为54.1%,两种检测结果证实HPV-16型感染与子宫颈癌的发生密切相关。进一步用灵敏的单链构象多态性分析法(SSCP)对33例阳性标本进行分析,发现有27例单链DNA迁移率与正常对照有不同,推测均发生了DNA序列的改变,提示HPV-16E7基因的变异在子宫颈癌组织中是较常见的现象,其与子宫颈癌的发生有一定的关系。 相似文献
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用地高辛配基(Digoxingenin)分别标记,制备HPV-6、HPV-11、HPV-16及HPV-18的DNA探针,应用核酸杂交技术,对37例宫颈癌活检组织DNA作了检测,各型HPVDNA的检出率为:HPV-60%(0/37)、HPV-112.7(1/37)、HPV-1667.5%(25/37)、HPV-1813.5%(5/37),联合应用HPV-16和HPV-18探针共同检测结果为81%(30/37)。结果显示:我国宫颈癌的发生与HPV感染密切相关,联合应用高危型HPV探针可提高检出率并可省时、简便。DIG标记探针因具特异、敏感、安全和简便诸特点,宜推广应用。 相似文献
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为了研究人巨细胞病毒(HCMV)感染的流行病学及鉴定HCMV核酸在尿中分布,我们用HCMVAD169株HindⅢ-EDNA片段制备探针,采用核酸杂交技术对取自西安地区180例3岁~5岁正常儿童的尿标本进行了HCMV相关序列的检测。结果显示出西安地区HCMVDNA阳性者3例(50份尿标本)占6%;咸阳地区HCMVDNA阳性者7例(50份尿标本)占14%;兴平地区HCMVDNA阳性者19例(80份尿标本)占25%。在不同的地区之间,阳性检出率有较明显地差异。 相似文献
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目的 探讨乙型肝炎病毒基因型与肝功能的关系.方法 采用微板核酸分子杂交ELISA法检测93例不同临床类型的乙型肝炎患者的基因型并同时测定肝功能.结果 93例不同临床类型乙型病毒性肝炎患者中,B型24例(25.81%),C型59例(63.44%),D型5例(5.38%),混合型5例(B/D 3例,C/D 2例,占5.38%).93例不同临床类型的乙型肝炎患者中,以C基因型为主,其次为B基因型,部分以D型和混合型存在,无A、E、F型.按照慢性乙型肝炎、亚急性重型肝炎、肝硬化的顺序,C基因型的检出率逐渐增多,B基因型的检出率逐渐减少.肝癌患者C基因型的检出率没有依次增高.C基因型各型乙型肝炎患者的ALT、AST、TBIL均高于B型,ALB低于B型,但差别无统计学意义.结论 西安地区病毒性肝炎以C基因型为主,部分以B、D及混合型存在,未发现A、E、F型.除肝癌外,C型的检出率随临床类型的加重而增多. 相似文献
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宫颈癌的流行病学特点提示癌的发生与感染因素有关。主要涉及两组病毒:单纯疱疹病毒(HSV)和人乳头瘤病毒(HPV)。为了探讨HSV、HPV 与宫颈癌的关系,我们以~(32)P 标记HSV—2DNA 和HPV DNA,分别用Southern 转印和打点杂交技术,同时检测了73例宫颈癌和14例正常宫颈活检标本。在严格状态下杂交,65例宫颈癌中未发现HSV—2DNA,其中19例癌组织RNA 与HSV—2DNA 杂交阳性。研究发现与宫颈癌组织RNA 杂交阳性的HSV—2DNA 位于0.2~0.33,0.58~0.625图谱单位。此外,在25例宫颈癌中检出了HPV_(16) DNA,2例标本检出了HPV_(18) DNA。在非严格状态下杂交,8例经PstⅠ酶切的宫颈癌组织DNA,Southern 转印后分别与HPV_(16) DNA 和HSV—2BglⅡ克隆片段杂交。结果,6例检出了HPV_(16)DNA,1例既检出了HPV_(16)DNA,又检出了HSV—2DNA。初步结果说明HPV、HSV—2与宫颈癌的发生可能有关。 相似文献
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用单层平皿软琼脂克隆法证明绞股蓝总皂甙对体外培养的P388细胞克隆生长有明显的抑制作用,其IC50为(22.5±1.0)mg·L-1。为进一步探讨其抑制P388细胞生长机理,用放射性同位素掺入法观察了绞股蓝总皂成对P388细胞DNA、RNA及蛋白质合成的影响。结果表明,在绞股蓝总皂甙作用24h内,其主要抑制P88细胞DNA合成,轻度抑制RNA合成,而对蛋白质合成几乎无影响。 相似文献
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2020年注定是不平凡的一年,新冠肺炎疫情让人们认识到病毒的危害,广大人民群众的出行活动也遭受到了严重影响。新冠肺炎疫情对客车制造业的影响显而易见,让原本就不怎么景气的汽车行业雪上加霜。但是,挑战与机遇并存,在抗击疫情中,北汽福田欧辉人积极应对,主动作为,勇于担当,先后研发出超级健康客车、核酸检测车和医疗车,为疫情防控做出了自己的贡献。近日,《城市公共交通》记者对北汽福田欧辉客车技术研究院院长刘继红(以下简称刘总)进行了专访。 相似文献
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葎草花粉主要变应原核酸疫苗pcDNA3.1-LC2的构建及其免疫原性鉴定 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 构建葎草花粉主要变应原核酸疫苗pcDNA-LC2并鉴定其免疫原性.方法 将pTripIEx2-LC2质粒用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切得到LC2葎草花粉变应原基因片段,将其插入pcDNA3.1(-)真核表达载体,在鉴定重组质粒构建成功后,大量制备去内毒素核酸疫苗pcDNA3.1-LC2,应用pcDNA3.1-LC2核酸疫苗免疫小鼠,取免疫血清行双向免疫扩散实验,分析其免疫原性.结果 通过测序确认构建pcDNA3.1-LC2中的672bp的编码框碱基与原序列一致,没有突变及缺失.应用pcDNA3.1-LC2免疫BALB/c小鼠,经双向免疫扩散试验验证pcDNA3.1-LC2在小鼠体内可以表达并产生特异性抗体.结论 成功的构建了葎草花粉主要变应原核酸疫苗pcDNA3.1-LC2,pcDNA3.1- LC2可在小鼠体内表达,并能产生葎草花粉变应原特异性抗体,具有良好的免疫原性. 相似文献
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目的 探讨环氧合酶 2(COX-2)反义核酸对喉癌细胞恶性表型的抑制作用.方法 采用脂质体介导方法,分别构建转染COX 2反义真核表达载体和空载体的喉癌细胞系Hep-2-AS和Hep-2-P细胞.RT-PCR及Western blot分析转染细胞COX-2-mRNA及蛋白表达水平;MTT比色实验、Boyden侵袭小室法和裸鼠成瘤实验分别检测转染细胞的体外增殖速度、体外侵袭力和体内成瘤性.结果 RT-PCR结果显示,Hep-2-AS细胞COX-2/磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)mRNA比值(0.65)明显低于Hep-2(0.92)和Hep-2-P细胞(0.90);Western blot结果提示Hep-2-AS细胞COX-2/βactin比值(0.29)明显低于Hep-2细胞(0.46)和Hep-2-P细胞(0.44);MTT比色实验显示Hep-2-AS细胞较Hep-2-P、Hep-2细胞生长速度减慢,三者倍增时间分别为3.6 d、2.9 d和2.9 d;体外侵袭实验结果表明,Hep 2-AS侵袭细胞数(18.20±5.97)显著低于Hep-2细胞 (45.40±8.12)及Hep-2-P细胞(44.10±6.47)(P<0.01).裸鼠成瘤实验中,Hep 2-P、Hep-2细胞接种裸鼠后第5天肿瘤长出,而Hep-2-AS细胞第7天肿瘤长出;28-d后Hep-2-AS细胞接种组瘤体体积[(764.85±129.61)mm3]低于Hep-2细胞[(1181.73±360.83)mm3]和Hep-2-P细胞接种组 [(1065.21±237.46)mm3],有显著性差异(P<0.01).结论 喉癌细胞中COX-2过表达与细胞的恶性表型相关,反义核酸技术抑制COX 2表达可以逆转喉癌细胞的恶性表型. 相似文献