超声辅助提取生姜黄酮及其抑菌活性研究

为了开发利用生姜中黄酮类化合物，选取生姜为原料，采用超声波辅助提取技术，以乙醇为溶剂，乙醇浓度、料液比、超声时间、超声强度及超声温度为主要考察因素，通过L18（3^7）正交实验，确定了超声辅助提取生姜中黄酮类化合物的最佳提取工艺为：以90％的乙醇水溶液为溶剂，在温度80℃，超声波强度80Hz，料液比1：20，提取时间50min的条件下提取2次，提取效率最高．采用滤纸片法研究了黄酮提取液对不同菌株的抑菌能力，结果表明，生姜黄酮对4种供试菌均有一定的抑菌效果，且对革兰氏阳性菌和阴性菌的抑菌效果没有明显差异．     

家蚕耐热基因SSR标记筛选定位及开发应用

利用家蚕减数分裂过程中,雌性染色体上基因不发生交换而雄性染色体上基因发生交换的特点,用耐热家蚕品系东34和高敏感家蚕品系欧17以及2种类型的回交群体((欧14×东34)♀×欧17 ♂和欧17 ♀×(欧17×东34)♂)为研究材料,从公布的SSR分子连锁图中共选择84个分子标记特异引物进行耐热分子标记筛选.在第8连锁群上...     

昆虫激素体外调节家蚕滞育激素受体基因的表达

为了深入研究家蚕滞育的分子机理,从家蚕基因组中扩增了1395 bp和972 bp 2个不同长度的滞育激素受体基因Bmdhr启动子片段,以pGL3.0 Basic为载体,分别构建荧光素酶报告质粒,利用家蚕细胞瞬时表达系统分析其转录活性以及昆虫保幼激素类似物（JHA）、蜕皮激素（20-OH-ecdysone）和滞育激素（DH）对其活性的影响．结果表明：1395 bp的Bmdhr启动子活性显著低于972 bp的Bmdhr启动子,这说明Bmdhr启动子在-941～-1364 nt区间存在负调控元件．JHA浓度为2,4,6μg/mL时,极显著地增强启动子活性;浓度为1μg/mL时活性显著减弱,而为8μg/mL时则活性极显著减弱．20-OH-ecdysone对Bmdhr启动子活性的影响具有剂量效应,低浓度（1,2μg/mL）时显著增强启动子活性;浓度为4μg/mL时,启动子的活性显著减弱;但当浓度继续升高时,启动子活性又极显著增强．DH对Bmdhr启动子活性的影响同样具有剂量效应,其浓度为10～40 nM时,显著增强启动子活性;而当其浓度达到60 nM时,启动子活性变化不显著．     

用SSR标记构建家蚕中系品种资源指纹图谱

利用微卫星标记SSR(Simple Sequence Repeat),在DNA水平上构建了96个中国系统二化性家蚕品种的DNA指纹图谱。57对SSR引物共扩增出507条有效带,最多的一对引物扩增出了24个片段,最少的仅有1个,平均为8.9个/引物,表明各品种之间存在丰富的微卫星多态性。家蚕品种间遗传距离最大值为0.2572,最小值为0.095,根据每个品种间的遗传距离,利用UPGMA聚类法进行了聚类分析,发现SSR扩增片段具有品种特异性,能准确地对各品种进行分类和鉴别。     

家蚕马氏管免疫相关蛋白基因BmNOS的研究

借助蛋白双向电泳(2-D)技术对感染家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)不同时相的家蚕幼虫马氏管蛋白进行分离,并对其中14个差异蛋白点进行质谱分析.结果表明:10个蛋白点得到成功鉴定,其中的一个可信结果为家蚕一氧化氮合酶(Bombyx mori Nitric...     

大蚕蛾科绢丝昆虫线粒体基因组A＋T丰富区序列及其系统发育研究

为了研究大蚕蛾科绢丝昆虫的进化关系,分别从蓖麻蚕、樗蚕和柳蚕的蛹中提取线粒体DNA,用PCR方法扩增线粒体A T丰富区及侧翼序列,克隆到pMD18-T载体,进行序列测定.序列分析表明,克隆片段的基因依次为12SrRNA基因3′端、A T丰富区、tRNAMet、tRNAIle、tRNAGln和ND2基因5′端,与家蚕和野桑蚕mtDNA排列顺序相同;在tR-NAGln和ND2基因之间有一段非编码区.根据柳蚕3个tRNA基因的核苷酸序列推定了其二级结构.基于5种大蚕蛾科绢丝昆虫和家蚕mtDNA A T丰富区序列的系统发育树显示,柳蚕与蓖麻蚕、樗蚕的亲缘关系较近,与柞蚕的亲缘关系较远,而与家蚕的亲缘关系更远.本研究结果有助于阐明大蚕蛾科绢丝昆虫以及家蚕的起源和进化.     

微量氰戊菊酯诱导家蚕谷胱甘肽-S-转移酶omega家族基因的表达变化

昆虫谷胱甘肽-S-转移酶是广泛分布于多种需氧生物中的一类由多基因编码的、具有多种功能的重要酶系.从分子水平解析家蚕对微量菊酯类农药的响应及谷胱甘肽-S-转移酶基因表达的变化,有助于从代谢生理研究家蚕对农药的抗性及谷胱甘肽-S-转移酶与家蚕农药耐受性的关系.本实验采用实时荧光定量PCR方法,检测了添食微量氰戊菊酯后,不同时间点家蚕中肠和脂肪体3个GST酶omega家族基因(GSTo1、GSTo2、GSTo3)的转录水平.结果表明:添食氰戊菊酯农药后,3个被测GST基因在两个不同耐受性品种之间的表达水平变化差异较大,在家蚕Mysore添食氰戊菊酯后各时间点,GSTo2和GSTo3基因在中肠组织的转录水平显著上调,3个被测基因在脂肪体组织中的表达量均显著增加.谷胱甘肽-S-转移酶omega家族基因转录水平上调可能与家蚕不同品种对菊酯类农药的耐受性差异有关.     

我国家蚕微孢子虫病检测与防治新技术研究与应用进展

近年来在对微孢子虫的常规光镜、血清学和分子生物学检测方法、化学药物治疗感病家蚕及蚕种检测的抽样方案等方面，发展和改进了一系列对该病的检测和治疗技术，推动了蚕业生产的发展．文中对该领域今后的发展前景作了初步论述．     

家蚕滞育激素受体体外上调下游海藻糖酶基因的表达

家蚕滞育激素（Bombyx mori diapause hormone,BmDH）与滞育激素受体（BmDH receptor,BmDHR）结合,调控其信号通路中的下游基因的表达.在二化性家蚕中,受滞育信号的影响,蛹体卵巢膜上海藻糖酶的活性增强.为了证实 BmDHR对家蚕海藻糖酶基因（Bmtre）表达的调控作用,以 pcDNA3.1为载体,构建了4种由 ie -1启动子驱动的不同 Bmdhr 的表达质粒 pcDNA - ie1- Bmdhr1、pcDNA - ie1- Bmdhr3、pcDNA - ie1- Bmdhr4、pcDNA - ie1- Bmdhr5和（Bmtre 启动子驱动的萤火虫荧光素酶基因（luciferase,luc）报告质粒 p3Z - Bmtre - luc;用脂质体（Lipofectin）包埋1种 Bmdhr 表达质粒或不同摩尔比的 pcDNA - ie1- Bmdhr1/ pcDNA - ie1- Bmdhr5以及报告质粒后,分别共转染源于卵巢的家蚕细胞 BmN,在 DH 作用下体外检测 BmDHRs 对海藻糖酶基因启动子活性的影响.结果表明,4种滞育激素受体 BmDHR -1、BmDHR -3、BmDHR -4和BmDHR -5分别表达时,均能上调海藻糖酶基因启动子的活性;不同摩尔比（1：3,1：1,3：1）的 BmDHR -1/ BmDHR -5也均能上调海藻糖酶基因启动子的活性,由此证明 BmDHR 能上调其信号通路中下游基因 Bmtre 的表达.