白藜芦醇对大鼠重症急性胰腺炎胰腺组织COX-2和iNOS表达的影响

目的 探讨白藜芦醇(resveratrol, RES)改善重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP)大鼠胰腺微循环的作用机制.方法 SD大鼠随机分为3组:假手术(sham operation, SO)组、重症急性胰腺炎(SAP)模型组、白藜芦醇治疗(RES)组.以40g/L牛黄胆酸钠0.1mL/100g胆胰管逆行注射建立SAP模型.RES组术后立即经阴茎背静脉注射RES(20mg/kg).分别于术后3、6、12h取材,进行胰腺组织学评分;检测胰腺组织环氧化酶2(cyclcoxygenase-2, COX-2)、诱生型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)的表达和一氧化氮(nitrogen monoxide, NO)含量.结果 RES组胰腺损伤较SAP组明显减轻(P＜0.05).SAP组COX-2、iNOS的表达和NO含量在各时间点均显著高于假手术组(P＜0.05);RES组COX-2的表达在6、12h较SAP组明显下降,iNOS和NO在各时间点均较SAP组明显下降,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 白藜芦醇可能通过下调COX-2和iNOS的表达改善胰腺微循环.     

白藜芦醇在大鼠重症急性胰腺炎中的钙离子调节作用

细胞内钙超载在急性胰腺炎中发挥关键性作用,而白藜芦醇可以减轻胰腺炎的严重程度。有关白藜芦醇治疗胰腺炎的机制尚未明确。本研究旨在阐明细胞内钙离子调节失衡和白藜芦醇对大鼠急性胰腺炎的治疗效应间的关系。将雄性SD大鼠随机分成3组：假手术组（OS）、重症急性胰腺炎组（SAP）和白藜芦醇治疗组（RES）。通过胰胆管逆行注射牛磺胆酸钠建立重症急性胰腺炎模型,而白藜芦醇通过静脉给药。     

白藜芦醇对重症急性胰腺炎大鼠肝脏的保护作用

目的 探讨白藜芦醇对实验性重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP)大鼠肝功能的保护作用.方法 96只成年雄性SD大鼠随机分为假手术(sham operation, SO)组、重症急性胰腺炎(SAP)组、地塞米松(dexamethasone, DEX)治疗组和白藜芦醇(resveratrol, RES)治疗组.各组大鼠均于制模后3、6、12h采集标本.生化方法进行肝功能测定;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)测定血清TNF-α和IL-6含量;透射电镜观察胰腺和肝脏超微结构的变化;RT-PCR检测凋亡调控基因Bax、Bcl-2和caspase-3 mRNA表达;Western Blot检测凋亡调控基因Bax、Bcl-2、caspase-3和线粒体内细胞色素C蛋白的表达.结果 SAP组各时间点血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase, AST)和总胆红素(total bilirubin, TBIL)水平均明显高于SO组(P＜0.05),RES组和DEX组肝功损害较SAP组明显降低(P＜0.05).RES组和DEX组TNF-α、IL-6含量均明显低于SAP组(P＜0.05).SAP组出现明显细胞肿胀、毛细血管淤血、血栓形成、线粒体肿胀和细胞凋亡等超微结构的变化,RES组和DEX组上述改变明显减轻.RES组Bax、caspase-3 mRNA表达显著低于SAP组(P＜0.05),Bcl-2 mRNA表达明显高于SAP组.Western blot 检测结果与RT-PCR结果一致.RES组各项指标与DEX组差异不显著(P＞0.05).结论 白藜芦醇可以降低SAP大鼠肝细胞凋亡的发生,从而起到减轻SAP介导的肝脏功能损伤的作用.     

白藜芦醇对重症急性胰腺炎大鼠脑损伤的保护作用

目的 探讨白藜芦醇对实验性重症急性胰腺炎(SAP) 大鼠脑损伤的的保护作用.方法 96只成年雄性SD大鼠随机分为假手术(SO)组;重症急性胰腺炎(SAP)组;地塞米松(DEX)治疗组和白藜芦醇(RES)治疗组.各组大鼠均于制模后3、6、12h采集标本.酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清髓鞘碱性蛋白(MBP)、细胞间紧密连接蛋白(Zo-1)、TNF-α和IL-6含量;透射电镜观察胰腺和脑组织超微结构的变化.结果 SAP组各时间点MBP和Zo-1水平均明显高于SO组(P<0.05),RES组和DEX组MBP和Zo-1水平较SAP组明显降低(P<0.05).RES组和DEX组TNF-α、IL-6含量均明显低于SAP组(P<0.05).SAP组出现明显神经元细胞肿胀、毛细血管淤血、血栓形成、线粒体肿胀和细胞凋亡等超微结构的变化,RES组和DEX组上述改变明显减轻.RES组各项指标与DEX组差异不显著(P>0.05).结论 Zo-1的降解参与了大鼠SAP脑损伤的病理过程;MBP可以作为SAP脑损伤程度的判断指标;白藜芦醇可以降低SAP大鼠脑血管上皮损伤程度,从而起到减轻SAP脑损伤的作用.     

白藜芦醇治疗重症急性胰腺炎的实验研究

目的　探讨白藜芦醇对大鼠重症急性胰腺炎炎症介质的作用。方法　应用逆行胰胆管穿刺注射牛黄胆酸钠制备重症急性胰腺炎大鼠模型。90 只大鼠随机分为假手术组、重症急性胰腺炎模型组(SAP)、白藜芦醇治疗组I(RES1,5mg/kg)、白藜芦醇治疗组II(RES2,10mg/kg)、白藜芦醇治疗组III(RES3,20mg/kg)等5 组,每组18 只。术后3、6、12h各剖杀6只,观察重症急性胰腺炎大鼠模型腹水的性质、量,测定血清肿瘤坏死因子、白细胞介素6 的水平,观察治疗组和模型组生存率的变化。结果　白藜芦醇治疗组与重症急性胰腺炎模型组相比,血清中肿瘤坏死因子、白细胞介素6的水平明显下降,死亡率降低,腹水量减少(P<0.05)。结论　白藜芦醇降低重症急性胰腺炎大鼠死亡率,减少腹水量可能与抑制血清肿瘤坏死因子及白细胞介素6的水平有关。     

白藜芦醇对大鼠重症急性胰腺炎肠黏膜细胞凋亡的影响

目的探讨白藜芦醇对试验性大鼠重症急性胰腺炎肠黏膜细胞凋亡及凋亡调控基因Bax蛋白表达的影响。方法54只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham operation group,SO)、模型组(severe acute pancreatitis,SAP)、治疗组(resveratrol-treated group,RES)。假手术组于开腹翻动十二指肠后关腹,模型组以40 g/L牛磺胆酸钠1 mL/kg胰胆管逆行注射制造重症急性胰腺炎模型。治疗组制模后立即于阴茎背静脉注射等剂量白藜芦醇(5 mg/mL1、0 mg/kg)。于3、61、2 h 3个时间点各剖杀6只大鼠。TUNEL法检测肠黏膜上皮细胞凋亡,免疫组化法检测小肠组织中Bax蛋白的表达。结果治疗组3、6、12 h肠黏膜细胞凋亡指数明显低于模型组(P<0.01)。治疗组各时间点Bax蛋白表达阳性率显著低于模型组(P<0.01)。结论白藜芦醇可通过抑制肠黏膜上皮细胞的凋亡,维持肠黏膜屏障的完整性,从而防止了急性重症胰腺炎细菌和毒素的移居。     

白藜芦醇对大鼠重症急性胰腺炎肠道屏障的保护作用

目的 探讨白藜芦醇(resveratrol, RES)对实验性大鼠重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP)肠道损伤的保护作用.方法 72只SD大鼠随机分为3组:假手术(sham operation, SO)组、SAP模型组、RES治疗组和SAP组经胰胆管逆行注射40g/L牛磺胆酸钠1mL/kg制备模型,RES组于制模后5min将10g/LRES溶液(20mg/kg)通过阴茎背静脉给药,术后分别在3、6、12h取材.免疫组化SAB法观察回肠固有层及其血管ICAM-1和VCAM-1的表达,放射免疫方法检测血清中TNF-α的含量,同时观察肠道组织SOD和MDA的含量.结果 ICAM-1和VCAM-1在SO组呈弱表达,而在SAP组中高表达,RES组表达明显减弱(P＜0.05).SAP组回肠组织的MDA水平升高明显(P＜0.05);血清中TNF-α水平显著升高(P＜0.05);SOD活性明显降低(P＜0.05);RES能明显抑制肠组织中MDA和血清中TNF-α水平而增强SOD活性(P＜0.05).结论 RES在SAP的发生中具有抗氧化作用,能抑制TNF-α的产生,抑制ICAM-1和VCAM-1的表达,从而发挥肠黏膜屏障的保护作用.     

白藜芦醇对早期重症急性胰腺炎大鼠多器官组织氧自由基的影响

目的观察白藜芦醇对早期重症急性胰腺炎(SAP)大鼠器官组织SOD、MDA的影响,进一步研究白藜芦醇的作用机制。方法将54只大鼠随机分为三组(假手术组、急性胰腺炎组、白藜芦醇治疗组各18只)。应用逆行胰胆管穿刺注射牛黄胆酸钠制备SAP大鼠模型,白藜芦醇溶液通过阴茎背静脉注射,术后4 h剖杀,观察腹水量及胰、肝、肺、肾和肠壁组织的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和组织学变化及白藜芦醇对其影响。结果模型组的胰、肺、肝、肾、小肠组织SOD活性降低、而MDA水平增加;白藜芦醇可明显升高胰、肺、肝、肠、肾组织的SOD活性,降低各组织的MDA水平,同时白藜芦醇可减轻大鼠各器官组织病理损害,以胰腺组织为主。结论氧自由基参与了SAP的病理生理过程。白藜芦醇可提高SAP大鼠多器官组织SOD活性、降低MDA水平而减轻组织脂质过氧化和组织器官功能损害。     

慈菇消脂丸对大鼠非酒精性脂肪性肝炎的防治作用

目的 观察中药慈菇消脂丸对大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的防治作用.方法 建立非酒精性脂肪性肝炎大鼠模型,随机分为正常组、模型组、慈菇消脂丸高剂量组、慈菇消脂丸低剂量组、东宝肝泰阳性药物对照组,观察肝组织病理形态学的变化,检测肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)的含量.免疫组化技术检测环氧合酶-2(COX-2)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在肝脏的表达.结果 模型组大鼠肝组织出现脂肪变性及不同程度的炎性细胞浸润,镜下可见肝细胞内大量脂滴.与正常组相比较,模型组大鼠肝组织内SOD活性显著降低,MDA、NO含量显著提高,COX-2、iNOS蛋白表达显著提高,差异具有统计学意义;与模型组相比较,中药治疗组大鼠肝组织内SOD活性显著提高,MDA、 NO含量显著降低,COX-2、 iNOS蛋白表达显著降低,差异具有统计学意义;中药慈菇消脂丸高剂量组作用亦较阳性药物对照组显著.结论 慈菇消脂丸对大鼠非酒精性脂肪性肝炎具有明显的防治作用,其作用机制与改善肝组织脂肪变性程度、抑制脂质过氧化、抗炎有关.     

抗HER-2嵌合抗体chA21对卵巢癌细胞MMP-2和TIMP-2表达的影响

目的观察抗HER-2嵌合抗体chA21对卵巢癌细胞MMP-2和TIMP-2表达的影响。方珐采用免疫细胞化学法检测不同质量浓度chA21（6mg／L和12mg／L组）作用36h后，培养的高表达HER-2人卵巢癌细胞株SKOV3中MMP-2和TIMP-2表达的变化；建立SKOV3裸小鼠移植瘤模型，制作组织芯片，观察chA21（30mg／kg）对肿瘤组织MMP-2和TIMP-2表达的作用。站杲细胞实验显示，随着chA21浓度的升高，MMP-2明显降低（P〈0．01，r=-0．945），而TIMP-2显著升高（P〈0．01，r=0．926），MMP-2／TIMP-2比值也明显降低（P〈O．01，r=-0．945），且均呈浓度依赖性改变；裸鼠荷瘤实验结果显示，chA21能明显下调MMP-2的表达（P〈0．01），上调TIMP-2的表达（P〈0．01），并使MMP-2／TIMP-2明显降低（P〈O．01）。结论chA21能调节高表达HER-2人卵巢癌细胞SKOV3的MMP-2和TIMP-2表达水平。     

地塞米松对重症急性胰腺炎胰腺细胞凋亡的影响

目的　探讨地塞米松对大鼠重症急性胰腺炎胰腺细胞凋亡及凋亡调控基因bax蛋白表达的影响。方法　 3 2只SD大鼠以 40g·L-1牛磺胆酸钠诱导建立急性胰腺炎模型 ,随机分为治疗组和非治疗组各 16只 ,对照组 6只。各组术后 6h、12h分别行TUNEL法染色检测胰腺细胞凋亡 ,免疫组化SP法检测胰腺组织中bax蛋白的表达。结果　治疗组大鼠 12h生存率明显高于非治疗组。HE染色显示治疗组胰腺组织炎症较非治疗组明显减轻。TUNEL染色显示治疗组 6h、12h胰腺细胞凋亡指数明显高于非治疗组 (P <0 .0 1)。免疫组化显示bax基因蛋白表达治疗组 6h、12h表达阳性率显著高于非治疗组 (P <0 .0 1) ,正常胰腺组织未见bax基因蛋白表达。结论　地塞米松治疗急性胰腺炎的机制可能与通过诱导胰腺细胞凋亡有关。     

非洛地平对ox-LDL损伤的人脐静脉内皮细胞一氧化氮合酶mRNA及一氧化氮表达的影响

目的 探讨非洛地平对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA及一氧化氮(NO)表达的影响.方法 将原代细胞分为空白对照组、ox-LDL(6、12.5、25mg/L)损伤组、非洛地平(0.1、1.0、10μmol/L)+ox-LDL(25mg/L)干预组,采用实时荧光定量PCR技术检测eNOS、iNOS的mRNA水平,硝酸还原酶法测定培养上清中NO的浓度.结果 ox-LDL损伤内皮细胞后,eNOS、iNOS mRNA及NO较空白对照组升高;非洛地平下调ox-LDL损伤的内皮细胞iNOS的表达,增加其NO的生成.结论 非洛地平可抑制低浓度ox-LDL诱导的iNOS mRNA表达,增加NO的生成,发挥其保护内皮细胞的功能.     

柴芍承气汤对重症急性胰腺炎大鼠肠道肌间神经丛NOS神经元的影响

目的 探讨肠神经系统在大鼠重症急性胰腺炎肠动力紊乱时的变化以及柴芍承气汤对大鼠肠道肌间神经丛内一氧化氮合成酶(nNOS)神经元表达的影响.方法 将30只SD大鼠随机分为3组:假手术组、模型组、柴芍承气汤组(CSCQD组);模型组和CSCQD组经胰胆管逆行注射质量浓度为50g/L的牛磺胆酸钠建立大鼠SAP模型后,分别给予生理盐水和CSCQD药液.测定大鼠的胃肠传递时间,HE染色光镜下观察胰腺的病理变化,用双重免疫荧光染色法观察回肠及结肠肌间神经丛NOS神经元的变化.结果 与模型组相比,CSCQD组传递指数(TI)明显升高(P<0.05),胰腺组织病理损害明显减轻(P<0.05),NOS神经元占总神经元的百分比明显降低(P<0.05).结论 CSCQD通过逆转肠神经系统NOS神经元的可塑性变化,改善SAP大鼠的肠动力,同时减轻了胰腺的病理损伤.     

白藜芦醇对急性胰腺炎治疗作用的研究现状与展望

关于急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)发病机制的研究,一直是国内外学者探讨的热点.对于AP发病的机制,目前主要有胰酶自身消化学说、微循环障碍学说、炎症因子与细胞介质学说、细胞内钙超载学说、肠道细菌易位与"二次打击"学说、氧化应激与NO作用学说等.白藜芦醇因具有抗炎、抗氧化、抑制血小板凝集、改善微循环等药理作用而受到临床工作者的广泛关注,是一种具有良好应用前景的天然药物.近年来,本课题就白藜芦醇对重症急性胰腺炎的治疗作用进行了大量深入的研究并做了系统的文献分析,认为白藜芦醇可以从多个环节发挥作用,从而起到缓解AP造成的胰腺损害及由此引发的多器官功能损伤.     

较高剂量的缬沙坦与贝那普利对IgA肾病的疗效对比

目的观察较大剂量的缬沙坦与贝那普利对IgA肾病的疗效和安全性。方法61例患者随机分为三组：缬沙坦组（对照1组）（n=20），服用缬沙坦160mg／d，贝那普利组（对照2组）（n=20）服用盐酸贝那普利20mg／d。联合组（治疗组）（n=21）服用缬沙坦160mg／d联合盐酸贝那普利20mg／d，疗程6个月，观察24h尿蛋白定量、血清肌肝、血压及血钾等变化及不良反应情况。结果6个月时三组24h尿蛋白定量均有明显下降，尤以治疗组明显，与其他两组比较差异显著（P〈0．05），总有效率分别为治疗组85．7％，对照1组45．0％，对照2组40．0％，均以治疗组最显著；与其他两组比较差异显著（P〈0．01），而对照1组与对照2组比较无明显差异（P〉0．05）。三组均能有效降低血压且副作用较轻，三组之间比较无显著性差异（P〉0．05）。结论较大剂量血管紧张素受体拮抗剂联合较大剂量转换酶抑制剂治疗IgA肾病安全有效，其疗效优于单用盐酸贝那普利或单用缬沙坦。     

腹腔巨噬细胞在大鼠重症急性胰腺炎发病机制中的作用

目的探讨腹腔巨噬细胞(PMA)在大鼠重症急性胰腺炎(SAP)进展中的作用。方法SD大鼠随机分为假手术组、SAP组。通过逆行胰管注射40 g/L牛黄胆酸钠(0.1 mL/100 g)建立大鼠SAP模型。分别于术后3、6、12 h剖杀大鼠。分离PMA并培养24 h。RT-PCR法检测PMA中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA和白介素-1β(IL-1β)mRNA的表达;酶联免疫吸附法检测细胞培养液及血清中TNF-α和IL-1β的水平。取胰腺组织行HE染色及病理学评分。结果SAP组PMA中TNF-αmRNA和IL-1βmRNA的表达、细胞培养液及血清中TNF-α和IL-1β水平均高于假手术组(P<0.01)。病理学评分证实SAP组胰腺组织损伤程度随时间延长而迅速加重(P<0.01)。结论PMA可以通过分泌大量的TNF-α和IL-1β等细胞因子影响SAP的严重程度。     

趋化因子受体CX3CR1在大鼠重症急性胰腺炎中的表达和意义

目的探讨趋化因子受体CX3CR1在重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠模型中的表达,判断其能否作为SAP发生的预测指标。方法 40只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(sham operation,SO)(n=20)和SAP模型组(n=20),分别于制模后6、12、24、48h处死大鼠,应用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测SAP大鼠血清中CX3CR1的变化,同时应用免疫组织化学法检测SAP大鼠胰腺、肺脏及肾脏组织中CX3CR1蛋白的表达。结果大鼠SAP制模成功后,血清中CX3CR1的表达逐渐升高,24h达最高(542.4pg/mL),明显高于SO组(P<0.05)。大鼠SAP组的胰腺、肺脏和肾脏组织中均有CX3CR1的表达,且明显高于SO组,其中胰腺和肺脏组织中CX3CR1表达在制模24h达高峰,肾脏组织中CX3CR1表达在制模48h达高峰。结论趋化因子受体CX3CR1可能为预测SAP严重程度的有效指标之一,值得进一步深入研究。     

T-2毒素对软骨细胞合成一氧化氮的影响

目的探讨T-2毒素对软骨细胞合成一氧化氮(NO)的影响。方法胎儿软骨细胞体外培养,用MTT法检测软骨细胞存活率;用Griess重氮化法测定软骨细胞培养上清液中NO含量;用Western blot检测软骨细胞一氧化氮合酶(iNOS)的表达。结果T-2毒素在质量浓度在1-2 000μg/L的范围内,软骨细胞存活率对其呈较典型的浓度依赖关系和时间依赖关系,而且随着作用时间的延长,浓度依赖关系更为明显;T-2毒素刺激软骨细胞分泌NO和表达iNOS蛋白。结论T-2毒素引起的软骨细胞损伤和生长抑制与T-2毒素刺激软骨细胞表达iNOS蛋白和分泌NO增多有关。     

PPARγ2基因Pro12A1a多态性与2型糖尿病一级亲属的相关性

目的探讨PPARγ2基因Pro12A1a多态性与2型糖尿病（T2DM）一级亲属的相关性。方法将研究对象按WHO的诊断与分型标准分为：①T2DM组，79人，为T2DM患者且其家族中有血缘关系的T2DM患者≥2人；②正常糖耐量一级亲属（NFDR）组，84人，为T2DM的一级亲属中糖耐量正常者；③无家族史的正常糖耐量（NC）组，104人，为与T2DM无血缘关系，且经口服糖耐量试验排除T2DM和糖耐量异常者。每组按体重指数（BMI）再分为2个小组，即BMI≥25kg／m^2小组和BMI〈25kg／m^2小组。应用聚合酶链反应限制性内切酶片段长度多态性（PCR—RFLP）方法检测PPARγ2基因Pro12A1a多态性，比较各组基因型频率及等位基因频率。结果T2DM组、NFDR组、NC组基因型频率、等位基因频率之间无显著性差异（P〉0．05）。T2DM组、NFDR组中BMI≥25kg／m^2小组和BMI〈25kg／m^2小组基因型频率、等位基因频率之间亦无显著性差异（P〉0．05）；NC组中BMI≥25kg／m^2小组和BMI〈25kg／m^2小组基因型频率无显著性差异（P〉0．05），而等位基因频率有显著性差异（P〈0．05）。结论PPARγ2基因Pro12A1a多态性与T2DM一级亲属无明显关联而与汉族无T2DM家族史的正常人群肥胖有关。     

呼气末CO_2和吸气峰压监测在双腔支气管插管定位中的应用

目的监测呼气末CO2（PETCO2）和吸气峰压（Ppeak）来判断双腔支气管导管（DLT）的位置。方法选取ASAⅠ-Ⅱ级、择期开胸需插DLT的手术患者76例,分别用听诊法、监测PETCO2、Ppeak及纤维支气管镜（FOB）判断DLT的位置。焙杲平卧位听诊肺隔离满意后,PETCO2监测30．3％肺隔离不全,FOB复查42．1％位置不当。侧卧位后听诊发现13例DLT位置发生变化,调整导管位置后PETCO2监测15例（19．7％）肺隔离不全,FOB复查移位24例（31．6％）。双肺通气（TLV）时听诊法与FOB复查后PETCO2值比较变化不明显（P〉0．05）,单肺通气（OLV）时FOB复查后明显降低（P〈0．05）。OLV时Ppeak均较TLV时明显增高（P〈0．05）,FOB复查后Ppeak均较听诊法显著降低（P〈0．05）。结论PETCO2、Ppeak监测的临床到位率较听诊法高,且可及时发现DLT位置的变化。