脐血浆内源性类洋地黄物质的部分纯化与鉴定

选用Ｃ１８预处理柱分离脐血浆内源性类洋地黄物质（Ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓｄｉｇｉｔａｌｉｓ－ｌｉｋｅｓｕｂｓｔａｎｃｅ，ＥＤＬＳ），应用高效液相色谱分析法（ＨＰＬＣ）对其进行部分纯化，观察部分纯化的ＥＤＬＳ对红细胞摄取８６Ｒｂ的抑制作用，并比较其与哇巴因在高效液相色谱图上的特点。结果表明：脐血浆第二份ＨＰＬＣ洗脱液（滞留时间４～６ｍｉｎ）对红细胞摄取８６Ｒｂ具有强烈的抑制作用；其抑制率为（８９±３）％，明显高于其它洗脱物份别及孕妇、健康成人对照组血浆第二份洗脱物的抑制率［分别为（７３±５）％和（４３±３）％，Ｐ值均＜０．０１］；部分纯化的ＥＤＬＳ、哇巴因及两者混合物的滞留时间基本一致，提示ＥＤＬＳ与哇巴因的结构相似。     

雀石蕊多糖的研究

雀石蕊经三氯甲烷抽提除去色素，用热水提取，乙醇沉淀，经重结晶微晶纤维素柱层析纯化，得CLS多糖。经SephadexG－150层析为均一性多糖，糖的含量为81．2％。气相色谱检测由鼠李糖（Rha）、阿拉伯糖（Ara）、木糖（Xyl）、甘露糖（Man）、葡萄糖（Glc）和半乳糖（Gal）组成，摩尔比为1∶0．71∶0．45∶4．68∶9．94∶3．64，平均分子量为1．3×106。经高碘酸氧化，Smith降解主要由1→2和1→6甙键连结而成的杂多糖。红外光谱分析具有多糖的特征吸收。     

铁皮石斛早期体细胞胚胎发育及原球茎形态发生研究

铁皮石斛（Dendrobium candidum Wall ex Lindl）是兰科石斛属多年生草本植物,是一种濒危物种,我们以此为材料建立了高效体细胞胚胎（以下简称“体胚”）发生体系,并从含体胚的胚性愈伤组织中分离出一些胚胎发生的特异基因。本项目就是在此基础上,欲建立早期体胚分离纯化技术,     

表皮生长因子受体Ⅲ型变异体（EGFRvⅢ）多克隆抗体的制备及特异性

为了制备针对EGFRvⅢ的特异性多克隆抗体,在实验中利用耦联了血蓝蛋白的EGFRvⅢ特异性的PEP3合成短肽进行动物免疫,制备抗血清;构建了pET30a／E33XI原核表达载体,表达和纯化了融合蛋白His-E33（EGFRvⅢ的部分胞外区）;以此融合蛋白作为抗原制备了抗体纯化柱,通过柱上纯化的方法从抗血清中提取针对EGFRvⅢ的特异性抗体．利用U87、U251、HeLa和HEK-293细胞进行免疫组化实验来检验抗体的特异性．     

两类图的算术标号

对于一个（p，g）图G，如果存在一个v（G）到非负整数集N0的一个映射以称为顶点标号）满足：（1）f（u）≠f（v），其中u≠v，且u，v∈V，（c）；（2）{f（u）＋f（v）｜uv∈E（G））={k，k＋d，…，k＋（g-1）d），称图G为（k，d）-算术图。证明了图Fm．4是（d，2d）-算术图和图Fm．6是（d，3d）-算术图。     

疏水色谱分离人腮腺液蛋白影响因素初探

初步建立了一种分离纯化人腮腺液蛋白的方法。探讨了样品的预处理、不同固定相、流动相以及不同检测波长等因素对正常人腮腺液蛋白疏水色谱分离的影响。结果在４０ｍｉｎ梯度内，以２ｍｏｌ／Ｌ硫酸铵为Ａ流动相，以０．０５ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾为Ｂ流动相（１００％Ａ∶０％５～０％Ａ∶１００％Ｂ），腮腺液蛋白被分离出６个峰。经生化方法证实，用疏水色谱分离人唾液蛋白的方法，分离度好，保持了蛋白样品的生物活性，且样品处理简单，可成为研究人唾液蛋白成分的一种较理想的方法。     

有限维结合代数上表示的可约性

给出有限维结合代数上表示可约性的两个判别法。它们是，（Ｉ）若φ是有限维结合代数Ａ上的表示，其表示矩阵为αφ，且存在非零元α∈Ｚ（Ａ），使得Ｔ（α）≠０，而ｄｅｔＴ（α）≠０，则φ是可约的；（Ⅱ）若φ是有限维结合代数Ａ上的正则表示，其反表示矩阵为Ｓ（α），则φ是既约的充要条件为：Ａ↓α∈Ａ，α≠０，有ｄｅｔＳ（α）≠０。     

Guillain-Barre综合征早期电生理变化及分型再认识

分析了31例Guillain－Barre综合征（GBS）的电生理改变。有14例于病后3周行肌电图检查。早期运动神经传导速度（MCV）异常率为71．01％，主要表现为末端潜伏时（ML）延长，占61．22％，其次为MCV轻度减慢，而感觉神经传导速度（SCV）及肌电图（EMG）对早期GBS的诊断价值有限．但EMG鼻常出现越早，则预后越差。31例电生理特点分型：髓鞘型GBS27例（87．09％），轴索型GBS2例（6．4％），另有2例（6．4％）髓鞘及轴索损害均较重，预后差，故认为可能是两者同时损害的混合型。     

Guillain-Barre综合征早期电生理变化及分型再认识

分析了31例Guillain－Barre综合征（GBS）的电生理改变。有14例于病后3周行肌电图检查。早期运动神经传导速度（MCV）异常率为71．01％，主要表现为末端潜伏时（ML）延长，占61．22％，其次为MCV轻度减慢，而感觉神经传导速度（SCV）及肌电图（EMG）对早期GBS的诊断价值有限．但EMG鼻常出现越早，则预后越差。31例电生理特点分型：髓鞘型GBS27例（87．09％），轴索型GBS2例（6．4％），另有2例（6．4％）髓鞘及轴索损害均较重，预后差，故认为可能是两者同时损害的混合型。     

具有给定直径的正则图的最小阶数

设ｄ和Ｋ为任意给定的自然数，（Ｋ≥２），Ｐｋ（ｄ）表示直径为ｄ的Ｋ度正则图的最小阶数，本文给出了Ｐｄ（ｄ）的表达式。     

人超氧化物歧化酶的研制

从新鲜人红细胞中提取的超氧化物歧化酶(SOD)是用DEAE-纤维素和Sephadex G_(75)两次柱层析纯化,同时用测定抑制率来监测SOD的活性峰。纯化后的SOD紫外吸收光谱的最大吸收峰在270～275 nm范围内,聚丙稀酰胺凝胶圆盘电泳得到3个蛋白带,与NBT还原反应得到的活性带位置一致,分子量分别为41 687、31 623、15 136。生物活性为3300 umits/mg蛋白,每克分子SOD含Cu、Zn均为2克分子。     

子宫内膜癌及癌前病变碱性磷酸酶的超微结构定位观察

本文用组织化学方法观察了10例子宫内膜组织中碱性磷酸酶(简称AKP)的超微结构定位。结果:正常子宫内膜及腺瘤型增生病例中AKP定位于细胞膜上。子宫内膜癌中,AKP的超微结构定位无明显变化。分化型内膜癌中AKP主要位于靠近腺样结构腔面的癌细胞顶端膜及微绒毛上。未分化癌中,AKP均匀分布于癌细胞周缘膜上。     

法国梧桐花粉的部分纯化及其主要变应原免疫活性分析

目的　对法国梧桐花粉变应原进行部分纯化并对其主要变应原免疫活性进行分析。方法　采用凝胶层析法分离纯化法国梧桐花粉变应原 ,经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测收集到的主要峰段的蛋白质分子质量 ,并对 7例法国梧桐花粉过敏支气管哮喘患者血清进行免疫印迹分析。结果　法国梧桐花粉变应原粗制液经SephadexG 10 0层析柱洗脱得两个洗脱峰 ,第一峰及第二峰升段富含蛋白 ;收集各段进行SDS PAGE电泳 ,第一峰升段、峰段、降段电泳图相似 ,主要含分子质量为 2 2～ 71ku之蛋白质 ,第二峰升段以分子质量为 14～ 16ku之蛋白质为主。电泳结果清晰显示 6条蛋白区带 ,分子质量分别为 71、5 0、35、39、2 2、16ku。免疫印迹分析可见 4条sIgG反应带 ,分子质量为 5 0、39、2 2、16ku。结论　法国梧桐花粉变应原含 6种主要蛋白成分 ,第一峰蛋白质含量高 ,为主要致敏组分 ;第二峰蛋白质含量少 ,为次要致敏组分。     

协同因子β_2-GPI的分离、纯化和鉴定

目的　进一步研究β2 糖蛋白Ⅰ (β2 GPI)、心磷脂 (CL)和抗心磷脂抗体 (aCL)三者之间的关系 ,以及 β2 GPI在aCL致血栓形成中所起的作用 ,从人血清中提纯 β2 GPI。方法　采用高氯酸沉淀血清中的杂蛋白 ,过DEAE纤维素层析柱和DEAESephadexA 5 0层析柱。 结果　经SDS PAGE测定纯化样品的分子量为 5 0KD ;经皮免疫小鼠后 ,小鼠血清中可检测到高滴度的aCL。结论　上述组合方法方便可行 ,为β2 GPI的进一步研究奠定了良好的基础。     

国产吡喹酮对家犬体内斯氏狸殖吸虫作用的组织化学与细胞化学观察

本文报告吡喹酮对家犬感染的斯氏狸殖吸虫作用的组织化学与细胞化学观察结果。用药后24小时,虫体肌组织和实质组织内的糖原显著减少,肌肉RNA肠支内AKP也减少,卵黄腺内RNA、AKP均明显减少,而体壁内碱性蛋白质,卵黄腺内的酸性粘多糖和碱性蛋白质,表皮和肠支内ACP活动则明显增强。细胞化学观察证明用药后虫体表皮内的AKP消失。最后讨论了上述组织化学与细胞化学改变对吡喹酮杀虫作用的意义。     

饲料加硼对摄入过量氟的实验大鼠骨损伤的预防作用

目的探讨饲料加硼对过量氟摄入的大鼠骨损伤的预防作用。方法24只4-5周龄Sprague-Dawley(SD)大鼠分为:对照组(喂饲基础饲料,饮蒸馏水)、过量氟组[喂饲基础饲料,饮含100mg/LF-(氟化钠221mg/L的蒸馏水)]、硼预防组(喂饲加硼饲料,饮含100mg/LF-的蒸馏水)。实验3月后测量大鼠血清氟、硼含量及血清碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)活性、骨氟和骨总RNA含量、胫骨纵径横径和干重及骨密度(bone mineral density,BMD),并检测大鼠股骨生物力学特性。结果和对照组比较,过量氟组大鼠血清氟、骨氟含量和血清AKP活性显著增高;骨总RNA含量、全身骨骼平均BMD和胫骨BMD降低;胫骨纵径、横径和干重减小;股骨最大负荷减低,最大形变增加。相比过量氟组,硼预防组大鼠血清氟和骨氟含量及AKP活性明显下降;骨总RNA含量、全身骨骼平均BMD、腰椎和胫骨BMD显著增高;胫骨纵径、横径和干重,股骨最大负荷明显增加。3组大鼠血清硼含量无显著性差异。结论大鼠摄入过量氟可出现明显的骨损伤,饲料加硼对此有一定的预防作用。     

经熟地鳖甲煎剂含药血清培养的肾系膜细胞对成骨细胞增殖和分化的影响

目的研究经熟地鳖甲煎剂含药血清培养的肾小球系膜细胞培养上清液对成骨细胞的影响。方法采用细胞培养的方法,将成骨细胞分为正常血清组、系膜上清组、含药系膜上清组,分别在培养24、48、72、120h后应用MTT法检测各组成骨细胞的增殖情况;在72h后应用ELISA法检测上清液碱性磷酸酶(AKP)和骨桥蛋白(OPN)浓度。结果系膜上清组和含药系膜上清组的成骨细胞增殖显著高于正常血清组(P<0.05),而含药系膜上清组又高于系膜上清组(P<0.05)。系膜上清组和含药系膜上清组的AKP浓度显著高于正常血清组(P<0.05),含药系膜上清组又显著高于系膜上清组(P<0.05)。含药系膜上清组的OPN浓度要显著高于正常血清组(P<0.05)。结论肾系膜细胞可促进成骨细胞的增殖及功能,而熟地鳖甲煎剂能促进这一作用。本研究为中医"肾主骨"理论体系提供了新的实验方法及科学依据。     

先天性巨结肠与RET基因c135位点单核苷酸多态性相关性分析

目的确定国人陕西地区正常汉族人群中是否存在RET基因c135位点单核苷酸多态性及基因频率,研究先天性巨结肠患儿该位点基因型与表型的相关性,探讨其病因。方法整体抽样随机选取40例陕西西安地区健康汉族献血者血样进行DNA抽提。对16例病理诊断证实为先天性巨结肠患儿狭窄段肠组织标本进行DNA提取(均为陕西地区患儿,汉族,散发性)。PCR扩增RET基因外显子2(含c135片段),长度300 bp,产物纯化后直接测序,并用相关软件及统计学分析。结果陕西地区正常汉族人群存在RET基因c135位点单核苷酸多态性A/G,A、G基因频率分别为0.475、0.525,各等位基因频率接近,G等位基因频率稍占优势。病例组16例A、G基因频率分别为0.844,0.156。病例组基因型以突变型AA(13/16)为主。对照组与病例组存在明显差异(P<0.001)。A等位基因与疾病关联强度OR=5.97,OR95%CI(2.24,15.92),OR值在0.05水平上有显著性。结论国人陕西地区汉族人群RET位点存在单核苷酸多态性A/G,c135G>A。先天性巨结肠表型与该位点A基因型明显相关。RET基因c135位点单核苷酸多态性纯合突变型AA在先天性巨结肠患儿中过高表达。     

镓盐和雌二醇对维甲酸致骨质疏松大鼠骨代谢的影响

目的　对比研究镓盐及雌二醇对维甲酸致大鼠骨质疏松模型骨代谢的影响。方法　 3月龄SD雌性大鼠 45只 ,随机分为两组 :正常组 ( 1 3只 ) ,骨质疏松组 ( 32只 ) ,骨质疏松组按 85mg/(kg·d)维甲酸灌胃 1 5d。然后进入治疗阶段 ,实验分为四组 :正常组 ( 8只 ) ,骨质疏松组 ( 9只 ) ,正常喂养 ;氯化镓治疗组 ( 1 0只 ) ,2 5mg/(kg·d)氯化镓灌胃 ;雌激素治疗组( 8只 ) ,雌激素 0 .2 μg/kg ,3次 /周 ,腹腔注射 ,治疗两个月。 结果　模型期骨质疏松组血清AKP和TRAP活性显著增高 ,骨质疏松组平均骨小梁宽度变窄 (P <0 .0 0 1 ) ,平均骨小梁间距变大(P <0 .0 0 1 ) ,平均骨皮质厚度变薄 (P <0 .0 0 1 ) ,骨小梁百分比降低 (P <0 .0 0 1 ) ,镓盐及雌激素治疗后 ,可使显著增高的AKP和TRAP活性降低到接近正常组水平 ,平均骨皮质厚度增加 ,骨小梁百分比增大。结论　雌激素抑制骨吸收 ,促进骨形成 ,维持骨转换平衡。提示镓盐通过抑制破骨细胞的破骨能力 ,降低了骨转换率 ,抑制骨溶解 ,增加了骨量及骨的硬度。     

γ-射线诱导HL-60细胞凋亡的观察

目的 观察γ-射线诱导HL-60细胞凋亡的时间和剂量效应,以探求辐射诱发肿瘤细胞凋亡分子机制。方法 分别以2.5、5、7.5、10、15Gy γ射线照射HL60细胞,于照后继续培养3、6、9、12、24、27、30h,分别收获细胞。电泳检测DNA梯状带;流式细胞术(FCM)细胞凋亡定量并观察细胞周期变化;Hoechst 33258-PI复染荧光显微镜计数凋亡细胞及已死亡细胞百分率。结果 HL-60细胞受照后死亡方式主要是凋亡,其首先阻滞在G２／M期并由此走向凋亡;DNA梯状带及FCM检测结果发现,细胞凋亡具有时间和剂量依赖性;Hoechst 33258PI染色法检测结果与FCM检测的凋亡细胞随剂量的加大及时间的推移而增多的结果并不呈平行关系。结论 γ-射线诱导HL-60细胞凋亡时间和剂量效应关系的确立为进一步探讨该凋亡途径分子机制奠定了基础。