灿烂甲酚蓝荧光猝灭法测定痕量亚硝酸根

基于磷酸介质中,灿烂甲酚蓝与痕量亚硝酸根发生重氮化反应,其荧光强度降低,建立了荧光光度法测定痕量亚硝酸根的新方法,用正交法确定最佳测定条件.该法测定亚硝酸根的线性范围为0.04～0.4 μg/mL,检测限为1.13×10-9 g/mL.方法操作简单,灵敏度高.用于测定样品中的亚硝酸根,结果良好.     

钼(V)-硫氰酸盐-灿烂甲酚蓝-聚乙烯醇体系共振瑞利散射法测定痕量钼

研究了在聚乙烯醇(PVA-124)存在条件下钼(V)与硫氰酸根和灿烂甲酚蓝(Brilliant Cresyl Blue,BCB)染料形成离子缔合配合物的共振瑞利散射(RRS)光谱.考察了它们的光谱特性,影响因素和适宜的反应条件,确定了共振瑞利散射强度与钼(V)浓度之间的关系.在酸性条件和PVA-124存在下,钼(V)的配阴离子[Mo(SCN)5]2-与BCB形成离子缔合物[BCB]2[Mo(SCN)5],其RRS显著增强.基于RRS的增强,建立了一种测定钢铁中痕量钼(V)的新方法.Mo5 的浓度在0～1.2 μg/25 mL范围内与分析信号具有良好的线性关系(r=0.994),检出限为1.7 μg/L.方法应用于钢铁中痕量钼的测定获得满意的结果.     

高纯氢氧化铝中痕量铁的测定

在石英烧杯中,加硫酸和酒石酸分解高纯氢氧化铝,用三氯甲烷萃取铁(Ⅱ)-邻二氮菲——高氯酸根离子缔合三元络合物,有机相光度法测定样品中痕量铁,方法简便、快速、准确。     

汞抗性花卉的筛选与牵牛对汞胁迫的响应

采用水培实验法从24种花卉中筛选汞超富集植物,通过对24种花卉发芽率、根长、根干重的计算与测量,比较实验结果发现:与其它23种花卉比较,牵牛( Pharbitis nil)种子对汞具有较强的耐性.采用盆栽实验法进行了汞污染条件对牵牛生长的影响与积累特性研究,结果表明:牵牛植株根、茎和叶对Hg2+的累积量最高分别可达114.2、64.09和52.62 mg/kg;当Hg2+浓度低于50 mg/kg时,转运系数(TF)和富集系数(BF)均大于1,最高分别可达1.13和1.47.鉴于牵牛对重金属汞具有较强的耐受和富集能力,兼顾能够美化环境等诸多优势,可以作为城市土壤汞污染的植物修复资源,适于大面积推广应用.     

HPLC-MS法测定人血浆中羧甲司坦浓度

目的 建立一种灵敏、高效、快速的高效液相色谱-质谱分析方法,测定人血浆中羧甲司坦的血药浓度.方法 100mL/L高氯酸沉淀血浆蛋白,上清液反相高效液相色谱分离,电喷雾离子阱质谱法检测血浆样品中的羧甲司坦,多级反应模式选择离子法定量.结果 方法检测限为0.01μg/mL,线性范围为0.2～200.0μg/mL,回收率为89.2%～105.6%.结论 该方法精密、灵敏、准确,可用于生物样品中羧甲司坦的测定.     

测定奥美拉唑的流动注射化学发光新方法

目的 建立测定奥美拉唑的流动注射化学发光新方法.方法 当将奥美拉唑注入到高锰酸钾与鲁米诺反应的合并流中时,可检测到强的化学发光信号,结合流动注射技术对实验条件进行优化.结果在优化的实验条件下,即混合管长度:150cm,反应介质的碱度:0.15mol/L NaOH,鲁米诺的浓度:7.0×10-5mol/L,高锰酸钾的浓度:2.0×10-5mol/L以及试剂流速:2.8mL/min,奥美拉唑浓度在2.0×10-8～1.0×10-5g/mL范围内与相对化学发光强度具有线性关系;对浓度为1.0×10-7g/mL和1.0×10-6g/mL奥美拉唑溶液进行11次平行测定的相对标准偏差分别为1.0%和2.6%;该方法的检出限为3×10-9g/mL.结论该方法简单、快速、灵敏,适用于药物制剂中奥美拉唑的含量测定.     

镓(Ⅲ)三元荧光熄灭体系的研究

提出了在磷酸盐缓冲溶液中,镓(III)-4,5-二溴苯基荧光酮(DBPF)-溴化十六烷基三甲胺(CTMAB)的荧光熄灭体系,建立了微量镓的荧光分析法.实验考察了酸度、试剂用量、表面活性剂、温度和共存离子等因素对体系荧光熄灭度的影响,并测定了配合物的组成镓(III)∶4,5-二溴苯基荧光酮为1∶2.当镓浓度在0～1.72×10-6mol/L内时,体系荧光强度与镓量呈线性关系,提出了提高方法选择性的途径,测定了粘土矿中镓的含量.     

HPLC-MS/MS法测定兔血浆中黄芪甲苷的含量

目的 建立兔含药血浆中黄芪甲苷含量快速测定的新方法.方法 固相萃取法富集血浆中的黄芪甲苷;Agilent SB-C18反相色谱进行分离;采用离子阱质谱多级反应模式,以m/z 807.5→627.1为选择离子对,内标法测定含量.结果 血浆中黄芪甲苷的检测限为0.1ng/mL,线性范围为0.5～50.0μg/mL,平均方法回收率在96.3%～104.7%范围内.结论 该方法具有灵敏度高、稳定性好和快速的特点,符合生物样品的分析要求,有望用于黄芪甲苷的药代动力学研究.     

KMnO4-钙指示剂-罗丹明B化学发光法测定对乙酰氨基酚的含量

目的建立快速、准确测定对乙酰氨基酚的流动注射化学发光新方法。方法酸性条件下,KMnO_4可氧化钙指示剂产生化学发光,罗丹明B对此发光有较强的增敏,对乙酰氨基酚的存在抑制体系发光,基于此结合流动注射技术建立了一种新的测定对乙酰氨基酚含量的化学发光法。结果在优化的实验条件下,在5.0×10-7-1.0×10-5g/mL范围内,对乙酰氨基酚的质量浓度与化学发光信号的降低值有较好的线性关系,检出限(S/N=3)为7.0×10-8g/mL,对1.0×10-6g/mL对乙酰氨基酚进行11次平行测定,其相对标准偏差为2.2%。结论本方法简便、快速、准确,用于片剂中对乙酰氨基酚含量的测定,得到较满意的结果。     

Tenax TA固体吸附/热脱附-气相色谱联用测定环境空气中的苯系物

建立了一种采用Tenax TA固体吸附/热脱附与气相色谱仪联用测定环境空气中苯系物的方法;该方法校准曲线线性良好,采样体积为1 L时,各组分检出限为2.7×10~(-4)～4.7×10~(-4)mg/m~3;该方法灵敏度高,精确可靠,操作便捷,适用于环境空气中苯系物的测定。     

口服苦参碱的药代动力学研究

利用苦参碱分子中叔胺能强烈淬灭MAA荧光试剂的荧光强度，对免血中微量和痕量苦参碱的监测，使用实用药代动力学计算公式，求出系列药动学参数，效果良好。     

HPLC-ELSD法测定桔梗中3种桔梗皂苷的含量

目的 建立测定桔梗药材中桔梗皂苷D、D3、E含量的方法.方法 采用高效液相色谱-蒸发光激光闪射检测器(HPLC-ELSD)法,Hypersil C18柱(5 μm,4.6 mm×150 mm),以乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL/min,ELSD漂移管温度113℃,载气(N2)流速3.0 L/min.结果 桔梗皂苷D、D3、E的线性范围分别为13.78～275.6μg/mL(r=0.999 5)、8.40～168.0μg/mL(r=0.999 7)、12.02～240.4μg/mL(r=0.999 6),平均回收率(n=5)为98.3%、99.4%和101.3%.结论 本法操作简便,结果准确可靠,可用于桔梗皂苷D、D3、E含量的测定.     

流动注射-化学发光法测定啤酒中痕量铬的研究

利用流动注射-化学发光法测定啤酒中痕量铬，采用正交设计试验找出了最佳测定条件。结果表明本法具有操作简便、测量快速、灵敏度高、稳定性好等优点，并已被成功地用于啤酒中痕量铬的测定。方法的线性范围为1×10-6～1×10-9kg／L，检出限为8.2×10-12kg／L，回收率为96．3％，与标准方法相比，测定结果无显著性差异（P＞0·05）。     

氩激光激发光源眶上荧光素钠试验诊断颈内动脉闭塞性疾病

<正> 应用氩离子激光器激发荧光光源进行眶上荧光素钠试验测定眶上荧光循环时间以诊断颈内动脉闭塞性疾病,研究发现假阳性和假阴性结果较少,是一种较为实用的诊断力法。眶上荧光素钠试验由英国Luncl于1975年首次提出。宋仕杰等对其作了改进,将原来的激发光源汞     

非小细胞肺癌患者呼出气冷凝液ET-1测定的意义

目的测定非小细胞肺癌(NSCLC)患者呼出气冷凝液(EBC)中内皮素-1(ET-1)并研究其临床意义。方法按既定标准收集41例NSCLC病例(NSCLC组)及45例正常对照(正常对照组)的EBC并同时抽血分离血清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定其ET-1含量。结果 NSCLC组EBC和血清的ET-1[(10.35±0.23)pg/mL、(79.62±0.25)pg/mL]显著高于正常对照组[(8.30±0.16)pg/mL、(68.21±0.35)pg/mL],差异有统计学意义(P<0.05);NSCLC腺癌组EBC的ET-1为(11.05±0.31)pg/mL,鳞癌组为(9.61±0.25)pg/mL。随TNM分期,NSCLC组Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期EBC的ET-1分别为(8.61±0.18)、(9.98±0.21)、(11.53±0.36)pg/mL,Ⅱ期与Ⅳ期有统计学差异(P<0.05)。检测EBC中ET-1作为NSCLC诊断方法的敏感性和特异性为95.12%和53.33%。结论测定EBC中ET-1有助于NSCLC的诊断和评估预后。     

HPLC-荧光法测定土大黄苷平衡溶解度和油水分配系数

目的建立测定土大黄苷平衡溶解度和油水分配系数的高效液相色谱(HPLC)-荧光法。方法采用SHIMPACK VP-ODS色谱柱;以甲醇-水(40∶60)为流动相,流速为0.8mL/min;进样量为10μL;激发波长为320nm,发射波长为410nm,测定土大黄苷在37℃水和不同pH值介质中的平衡溶解度以及在正辛醇-水、正辛醇-缓冲溶液体系中的油水分配系数。结果在37℃条件下,土大黄苷在水中的平衡溶解度为109.54mg/L;在pH为8.0时溶解度最大,为126.12mg/L;土大黄苷在正辛醇-水中的油水分配系数logP值为0.53;在pH为6.0的缓冲溶液中油水分配系数最大,logP为0.76。结论本研究建立了HPLC-荧光检测法,成功应用于测定土大黄苷平衡溶解度和油水分配系数,为土大黄苷剂型的开发及药代动力学研究提供了理论依据。     

通用腺伴随病毒载体的构建及表达报告基因GFP的实验研究

目的构建基因治疗通用型腺伴随病毒(AAV)载体并检测其转染外源基因作用。方法使用限制性内切酶切除pSSV9int质粒中的AAV病毒Rep和Cap基因元件后,插入了重组腺病毒专用穿梭质粒-pACCMVpLpA的含有CMV启动子、多克隆位点(MCS)和多聚腺苷酸信号(PolyA)的表达盒,构建了重组AAV通用载体质粒pSSHG-CMV。在该质粒MCS插入绿色荧光蛋白(GFP)基因后,使用pSSHG-CMV-GFP、GFP140和pAAV/Ad三种质粒共转染293包装细胞,制备GFP重组AAV。应用斑点杂交实验检测重组病毒滴度,并将该病毒感染新生大鼠NIH3T3细胞,荧光显微镜观察GFP表达。结果重组AAV的滴度在浓缩前可达2×1011cfu/mL,浓缩后可达2×1013cfu/mL,表明成功地构建了重组AAV载体。插入外源基因GFP后,在包装病毒和辅助质粒的联合作用下,能产生具有感染性的重组AAV。感染了重组GFP-AAV的大鼠NIH3T3细胞表达了明显的GFP荧光。结论构建的重组AAV通用载体pSSHG-CMV可转染外源基因,这为进一步的基因治疗奠定了基础。     

大骨节病病因研究——病区天堂村饮水中有机物的测定(Ⅰ)

本研究应用XAD树脂富集,色谱/质谱联机分离鉴定的方法。对大骨节病病区(麟游县天堂村)三种饮水与对照(西安医科大学校园)深井水作了痕量有机化合物的测定分析。从天堂河水、深机井水、窑水与对照水样中分别检出了40种、31种、19种和10种有机化合物,且对每种检出物的结构式、分子量和峰面积均作了分析测定。其中芳核化合物分别为25种、19种、8种和4种。病区三种水样中均检出了烯类、烯酮类、酮类和萘类、苯并噻唑等稠环芳烃化合物;仅在河水和深井水样中检出了茚类化合物;在对照水样中未发现上述有机物。此结果未见文献报导。上述诸有机化合物可能是值得重视的可疑病因因素,但其真正的病因流行病学意义尚需进一步研究探讨。     

伏安法测定PM2.5中的硝酸根离子

利用多孔铜修饰电极检测PM 2.5中硝酸根离子的含量.探讨了硝酸根离子在多孔铜修饰电极上的电化学性质.研究了硝酸根离子的响应电流与浓度的关系.结果表明:硝酸根离子还原峰电流与其浓度在6.67×10-6 ～2.00×10-4 mol/L范围内呈良好的线性关系,相关系数r=0.998,方法检出限为2.00×10-6 mol/L.将该方法用于PM2.5中硝酸根离子含量的检测,测定结果与用分光光度法测定相近,说明该电化学测定方法可以用于PM2.5中硝酸根离子含量的检测结果是可靠的,具有一定的实用价值.     

CTLA4.FasL免疫抑制效应及对肝前体细胞增殖分化潜能的影响

目的探讨融合蛋白CTLA4.FasL对肝前体细胞(LEPCs)增殖分化潜能的影响及抑制异种排斥反应的效应。方法克隆CTLA4.FasL基因,构建携带CTLA4.FasL基因与红色荧光蛋白(mCherry)双顺反子结构的重组慢病毒载体Lv-CTLA4.FasL-IRES-mCherry。优化慢病毒感染LEPCs的条件,建立高表达CTLA4.FasL的LEPCs,荧光显微镜观察mCherry的表达,Western blot检测CTLA4.FasL的表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定细胞培养上清中CTLA4.FasL的浓度,水溶性四氮唑(WST-1)法检测细胞的增殖活性,Real time PCR(RT-PCR)检测干细胞相关基因CK19和c-Kit mRNA的表达,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)掺入法测定CTLA4.FasL-LEPCs在异种混合淋巴细胞培养体系中对大鼠淋巴细胞增殖的抑制作用。结果构建重组慢病毒载体Lv-CTLA4.FasL-IRES-mCherry,病毒滴度为2×108 TU/mL。在感染复数(multiplicity of infection,MOI)为10,聚凝胺质量浓度是5μg/mL时,感染效率约90%。Western blot证实了CTLA4.FasL的表达,在细胞培养上清中其质量浓度约为(0.72±0.10)μg/mL。CTLA4.FasL-LEPCs细胞增殖活性未受到影响,CK19和c-Kit基因mRNA表达水平无变化。CTLA4.FasL-LEPCs细胞可显著抑制大鼠淋巴细胞的增殖(P<0.05)。结论构建成功的重组慢病毒载体Lv-CTLA4.FasL-IRES-mCherry可介导CTLA4.FasL基因在LEPCs中高效表达;CTLA4.FasL可有效地抑制异种排斥反应,同时不损害LEPCs增殖活性和分化潜能。