诊断脑囊虫病快速ELISA试验方法建立与常规ELISA比较

通过提高抗原抗体结合反应的孵育温度(41℃),以缩短孵育时间,建立起检测脑囊虫病血清抗体的快速 ELISA 试验方法。在此温度下,血清抗体的几何平均滴度为812.58,较之在39℃、43℃和45℃条件下明显增高,同时阳性和阴性血清的免疫比值也最高,表明41℃是囊虫抗原抗体结合反应的适合温度。在此温度下,抗原抗体结合反应的速度明显增快,经过15分钟即可达到充分结合。用快速 ELISA与常规 ELISA 两种方法对30份脑囊虫病人血清同步测试结果表明,快速 ELISA 的光吸收值普遍略高于常规 ELISA。这就表明,在脑囊虫病的血清抗体检测中,快速 ELISA 完全可取代常规 ELISA,它有着简便、快速、敏感性高等优点。     

MacEUSA和IFA对EHF病人血清SIgM的动态检测

用IgM抗体捕获法ELISA(MacELISA)和间接免疫荧光法(IFA)同时检测32例流行性出血热(EHF)病人血清特异性lgM抗体(SIgM)的动态反应。二法检出SIgM的总符合率为99.46%,所测抗体滴度的动态反应曲线基本平行,而MacELISA所测抗体滴度比IFA明显提高。早期EHF病人血清即有较高滴度的SIgM抗体,9病日～10病日达高峰,此后趋于下降。IFA法所测不同病日的SIgM滴度无显著差异(F=1.680,P>0.05),而MacELISA则有显著差异(F′=2.978,P<0.05)。二法所测不同病型EHF的SIgM滴度在病日相同时各型间皆无显著差异(P>0.05)。     

326例囊虫病诊断分析(摘要)

<正> 我室自1987年至1989年,对326例拟诊为囊虫病的患者进行血清和(或)脑脊液ELISA试验,其结果结合患者的临床表现、脑CT扫描、皮下肌肉结节活检、排节片史等进行分析,表明ELISA试验对诊断囊虫病具有特异性强、敏感性高的优点。癫痫是脑囊虫病患者最常见的症状,接诊的326例患者中,有癫痫症状者167例,其中血清ELISA试验阳性者仅33例,占20%;然而同时血清ELISA试验阳性的78例脑囊虫病人中,有癫痫症状者33例,高达42.3%。脑CT扫描和血清ELISA检查是目前诊断脑囊虫病的有效方法。根据对170例患者的CT扫描和血清     

52例脑囊虫病所致癫痫的诊断和治疗

本科１９８２年～１９９２年住院确诊为脑囊虫所致的癫痫５２例，占同期住院的癫痫患者３９５例的１３．１６％（５２／３９５）。作者对其诊断及治疗的资料做了分析，结果在明ＭＲＩ／ＣＴ是诊断脑囊虫病先进可靠的方法。血清及脑脊液快速酶联免疫抗体测定有助于定性诊断，脑脊液的阳性率较血清高。丙硫咪唑、吡喹酮均有较好的疗效，但后者的副作用高于前者（Ｐ＜０．０５），应首造丙硫咪唑。从而看出近１０多年来诊疗技术的飞速进步使脑囊虫病的防治前景大为改观。     

EHF患者特异性IgG动态变化及其与病型的关系

用间接免疫荧光法对32例流行性出血热(EHF)患者病程中血清特异性IgG(SIgG)抗体变化作了动态检测,分析了SIgG的变化与病型的关系。结果表明,SIgG可于第3病日检出,此后其阳性率和滴度随病日的延长而增高,至第11～12病日,阳性率达100%,滴度趋于稳定的高水平。不同病型EHF有不同的SIgG反应,于第7～8病日,不同病型的SIgG滴度出现显著差异(F=4.004,P<0.05)。提示SIgG在EHF的免疫病理损伤中起一定作用。     

IgM抗体捕获ELISA法对流行性出血热患者尿液中特异性IgM抗体的检测

将IgM抗体捕获ELISA法应用于检测流行性出血热病人尿液中的特异性IgM抗体,总阳性率72.62%,7～9病日可达83.87%;第3病日即可出现阳性;并且具有较高的特异性和敏感性。尿中特异性IgM抗体检出的阳性率与病日(G=7.3858,P>0.05)及尿蛋白含量(G=4.4003,P>0.05)间均无明显关系;特异性IgM抗体的滴度与病日有关(F′=26.5331,P<0.01)与尿蛋白含量无明显关系(F=2.2074,P>0.05);不同病日尿液中特异性IgM抗体检出的阳性率与滴度呈正相关(r=0.9973,P<0.01)。     

流行性出血热患者血清特异性抗体的动态观察

一、本文检测95例出血热患者487份血清中,出血热IgM及IgG抗体皆为阳性,而非出血热流行地区健康人血清30份及非出血热患者血清30份,皆为阴性。二、出血热患者血清中IgM抗体于病程第1日可检出,3—12日阳性率最高,以后逐渐下降。其滴度2—3病日开始增高,3—6病日达高峰,持续6—12天,第10—14病日逐渐下降。IgG抗体于病程第2日可检出,4—5病日阳性率上升,7—14病日达高峰,其滴度于检出后逐渐增高,5—14病日始达高峰。三、患者病情轻重与血清中抗体水平呈正相关。     

陕西籍鼻咽癌患者血清EB病毒VCA—IgA抗体水平的研究

用免疫酶法检测了陕西籍的鼻咽癌、头颈部其它肿瘤和健康人血清EB病毒VCA—IgA抗体。54例治疗前鼻咽癌其抗体阳性率为75.93%,几何平均滴度为38.00,而50例头颈部其它肿瘤和50例健康人的抗体阳性率低于12.00%,几何平均滴度为2.50～3.25。表明VCA—IgA测定对低发区鼻咽癌的临床诊断具有十分重要的参考价值。鼻咽高分化鳞癌同低分化鳞癌、泡状核细胞癌一样,血清VCA—IgA抗体的阳性率和几何平均滴度显著增高,而鼻咽未分化癌与头颈部其它肿瘤相似,显著低于上述3种病理类型。30岁以下鼻咽癌血清VCA—IgA抗体的阳性率与头颈部其它肿瘤相似,但几何平均滴度显著增高。以上结果表明,VCA—IgA检测对低发区鼻咽未分化癌和30岁以下鼻咽癌的诊断价值不大。     

中和抗体在流行性出血热病程中的动态改变及意义

采用微量细胞病变中和试验对１５例流行性出血热（ＥＨＦ）患者的中和抗体进行了动态检测。第３病日即可检出，５病日内检出率为７８％（７／９），至第１５～１６病日达高峰，中和抗体的滴度变化与ＥＨＦ的病期和病型有明显关系，轻型、中型、重型患者随病程进展而升高，危重型患者发热期滴度最高，死亡前中和抗体滴度明显降低；中和抗体的滴度与尿蛋白的变化呈负相关。动态检测中和抗体的滴度变化可反映患者的转归和预后，若重症患者中和抗体极度降低，则预后不良，这对探索ＥＨＦ的发病机理有重要意义。     

急性散发性戊型肝炎患者血清抗体的动态检测

动态检测了34例1993年6月～1994年5月在我校附属医院住院确诊的急性散发性戊型肝炎患者血清IgM、IgG抗-HEV变化。15例患者IgM和IgG同时阳性。16例平均随访观察303d（6个月～15个月）。结果：IgM、IgG抗-HEV阳性最早出现在黄症后第3天；黄疸后10d阳性率分别达86．7％和100％。两抗体在病初1周时滴度最高，以后缓慢下降，IgM下降较快，病程2月时所检患者均降至不能检出水平；IgG抗体除1例外均在1年左右阴转。ALT在抗体出现后很快下降，6周降至近正常水平。IgM抗-HEV检出率仅44．1％，故不宜仅以此作为急性戊型肝炎诊断标准，应结合IgGJ立体动态变化，综合判断。     

子宫颈癌患者HPV16 E6,E7血清抗体检测

通过基因工程技术制备HPV16 E6,E7抗原,用免疫酶联吸附法检测了44例子宫颈癌病人和20例健康献血员血清HPV16 E6,E7抗体。结果表明,健康人血清HPV16 E6和HPV16 E7抗体阳性者分别占35％(7/20)和20％(4/20)。病人血清中,HPV16 E6抗体阳性率68.18％(30/44),但其反应滴度均值与健康人无显著差异。HPV16 E7抗体阳性率为58.18％(25/44),其阳性率及反应滴度均明显高于健康人。这提示,HPV16 E6抗体可能并非HPV16的型特异性抗体,而HPV16 E7抗体则有可能成为子宫颈癌发生的预报信号。     

恢复期血清治疗早期重症流行性出血热

<正> 在对出血热尚无特效疗法的情况下,为了降低重症患者的死亡率,我们从1981年开始采用恢复期血清治疗早期重症出血热患者。共治疗8例,全部为22～50岁的男性患者,均于发病1-5日内住院。5例测出血热免疫荧光抗体均为阳性,滴度为1:320—1280(由西安医科大学病毒室岐天茂老师等协     

自身免疫性甲状腺疾病患者血清钠/碘转运体抗体的研究

目的　检测自身免疫性甲状腺疾病患者血清钠 /碘转运体 (sodiumiodidesymporter,NIS)抗体 (NIS Ab) ,探讨其在自身免疫性甲状腺疾病发病机制中的作用及在疾病诊断中的应用价值。方法　选择门诊初发的自身免疫性甲状腺疾病患者 5 4例 ,分为格雷夫斯甲亢 (GD) 2 9例 ,男 8例 ,女 2 1例 ,年龄 13～ 6 4岁 ,平均 ( 38.5± 5 .3)岁和桥本甲减 (HT) 2 5例 ,男 3例 ,女2 2例 ,年龄 10～ 5 8岁 ,平均 ( 34.5± 6 .7)岁两组。选择本院健康体检者 2 6例为正常对照组 (NC)。空腹常规静脉血 ,分离血清后 ,取 1mL于 - 2 0℃冻存待测NIS Ab ,剩余血清同时检测甲状腺激素谱和促甲状腺激素受体抗体 (TRAb)。NIS抗体检测利用选择合成的NIS相关短肽 ,采用间接酶联免疫吸附法 (ELISA)。甲状腺激素谱检测及TRAb采用放免法测定。结果　GD组患者血清中NIS抗体含量明显高于正常对照组和HT组 ;HT组与正常对照组比较血清NIS抗体含量无显著性差异。NIS抗体在GD和HT患者中的阳性率分别为 32 %和 2 0 % ,NIS水平与促甲状腺激素受体抗体 (TRAb)无统计学相关关系。结论　GD患者体内的NIS Ab滴度明显高于HT和正常健康者 ,即GD体内针对NIS产生的NIS抗体量较高 ,其相结合的较多 ,从而抑制NIS的活性 ,因此甲状腺细胞基底膜上的NIS活性降低     

石蜡切片间接荧光抗体试验诊断囊虫病

本文应用猪囊虫石蜡切片抗原及冰冻切片抗原,对确诊的囊虫病患者血清作间接荧光抗体试验(IFA),用石蜡切片检测92份血清,阳性率90%;用冰冻切片检测51份血清,阳性率94%,二者无显著差异,表明石蜡切片具有与冰冻切片相同的敏感性,且有制作方便,不需低温设备等优点。两种切片均与包虫病、肝吸虫病患者血清有交叉反应。同时检测30份健康人血清,全部为阴性。     

肾综合征出血热患者血清汉滩病毒核蛋白和糖蛋白G_2抗体检测及其临床意义

用汉瘫病毒单克隆抗体L133、L13F3、LV48A和LV28B为包被抗体，以其酶标物为指示抗体，建立了分别检测汉滩病毒核蛋白抗体（NPAb）和包膜糖蛋白G2抗体（G2Ab）的抗体阻断酶联免疫吸附试验，用该法对65例肾综合征出血热（HFRS）患者的291份血清标本进行了检测．NPAb的阳性率在2～3病日和8～9病日分别为90％和100％。NPAb的滴度在HFRS的发热期升高，低血压和少尿期达高峰。提示NPAb可能是与HFRS的免疫病理损伤有关的重要成份，而且检测NPAb可能有助于HFRS的早期诊断。G2Ab的阳性率和滴度在前三期，即发热、低血压和少原期均…     

融合基因Aβ-HBcAg的原核表达及表达蛋白的免疫反应性和免疫原性分析

目的　研究 β 淀粉样肽 (β amyloidpeptide,Aβ)与乙型肝炎核心抗原 (HBcAg)融合基因Aβ HBcAg的原核表达 ,检测融合蛋白的免疫反应性及免疫原性。方法　将重组质粒pBV2 2 0 /Aβ HBcAg转化大肠杆菌DH5α,温控表达 ,超声破碎细菌 ,通过SDS PAGE、考马斯亮蓝染色和ELISA等方法 ,观察Aβ HBcAg的表达及融合蛋白的免疫反应性 ;用融合蛋白免疫Balb/c小鼠 ,ELISA法检测血清中的抗 Aβ抗体和抗 HBc抗体滴度。结果　融合蛋白以包涵体的形式存在于沉淀中 ,表达量为菌体沉淀的 5 % ,融合蛋白既有Aβ的免疫反应性 ,又有HBcAg的免疫反应性。Balb/c小鼠经过 3次免疫后 ,血清中的抗体滴度很低 ,继续强化免疫 2次后 ,血清中抗 Aβ抗体滴度、抗 HBc抗体滴度分别上升为 1∶80 0和1∶32 0 0。结论　融合基因Aβ HBcAg可在大肠杆菌DH5α中表达 ,表达蛋白有一定的免疫反应性和免疫原性 ,但表达量较低 ,免疫反应性和免疫原性较弱。提示融合基因Aβ HBcAg的表达量和融合蛋白免疫原性的提高尚需进一步研究。     

酶联免疫吸附试验检测流行性出血热患者IgM抗体报告

本文介绍一种检测EHF特异性IgM抗体的ELISA间接法,在临床诊断应用中分别对耳血及静脉血清进行了平行检查,并与IFAT法进行了比较。结果表明:19例临床诊断为EHF患者耳血中ELISA—IgM阳性率为100％(19/19),IFAT—IgM阳性率为89.47％(17/19),且ELISA耳血IgM抗体滴度>IFAT耳血IgM抗体滴度者为68.47％(13/19)。实验发现,耳血ELISA—IgM抗体滴度明显高于静脉血清ELISA—IgM抗体滴度4倍者占73.68％(14/19)。作者认为,该方法特异性、敏感性较好,操作简便,只需要采用耳血就可以达到早期,快速诊断目的,值得推广使用。     

G250抗原肽与HBcAg融合基因原核表达载体的构建及表达蛋白的免疫分析

目的构建肾癌G250抗原肽与HBcAg重组基因的原核表达质粒pET28a(+)/C-G250肽-C,并通过大肠杆菌进行原核表达并纯化,分析表达融合蛋白的免疫原性及抗原性。方法 PCR扩增编码G250抗原中249～268氨基酸的基因片段,将G250肽插入去除主要免疫优势区的重组质粒pGEMEX/HBcAg中,获得重组质粒pGEMEX/C-G250肽-C,为更换酶切位点,以pGEMEX/C-G250肽-C为模板,PCR扩增C-G250肽-C基因片段,最终将目的基因亚克隆入原核表达质粒pET28a(+)中,IPTG诱导融合蛋白表达,利用Ni 2+-NTA亲和层析法纯化重组融合蛋白,SDSPAGE鉴定融合蛋白的表达,纯化后融合蛋白经腹腔注射免疫BALB/c小鼠,间接ELISA法检测小鼠血清中抗体的滴度。结果酶切及基因测序鉴定证实融合基因正确重组于表达质粒pET28a(+)中,原核表达并纯化后,该分离纯化融合蛋白纯度达95%以上,其相对分子质量约为22.35。BALB/c小鼠经4次免疫后,所有小鼠血清中均可检测到抗体,免疫第6周其血清中抗体滴度可达到1∶5.12×105,抗G250肽抗体滴度达到1∶6.4×104,抗HBcAg抗体滴度不超过1∶4×103。结论成功构建肾癌G250抗原肽与HBcAg重组基因原核表达质粒pET28a(+)/C-G250肽-C,在大肠杆菌中可高效表达,纯化后融合蛋白具有较强的免疫原性,能诱导小鼠产生高滴度和高特异性的抗体。     

促肝细胞生长素对慢性肝炎、慢性重症肝炎患者血清IL-6和IL-8的影响

目的　研究观察慢性肝炎、慢性重症肝炎患者血清IL 6和IL 8水平在促肝细胞生长素(pHGF)治疗前后的变化。方法　采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测 64例慢性肝炎和慢性重症肝炎患者 pHGF治疗前及治疗后 4周、8周血清IL 6和IL 8水平。结果　慢性肝炎及慢性重症肝炎患者血清IL 6、IL 8水平较正常对照组明显升高 (P <0 .0 5～ 0 .0 0 1 ) ,且慢性重症肝炎 >慢性肝炎 (中度 ) >慢性肝炎 (轻度 )。pHGF治疗组的慢性肝炎和慢性重症肝炎患者在治疗 8周后 ,其血清IL 6和IL 8水平明显下降 (P <0 .0 5) ,ALT与IL 6呈明显正相关 ;pHGF疗程结束后半年 ,其HBeAg、HBV DNA转阴率为 43.3%、46.9% ,转阴组IL 6、IL 8水平接近正常 ,而阳性组则明显高于转阴组 (P <0 .0 5)。结论　提示慢性肝炎和慢性重症肝炎患者血清IL 6和IL 8水平与慢性肝病肝脏损伤程度密切相关 ,是判定患者预后和疗效的重要指标。     

甲亢~(131)Ⅰ治疗前后血清TGA、TMA与甲减关系的探讨

本文分析了甲亢~（131）Ⅰ治疗前后血清TGA、TMA测定结果与甲减发生的关系。77例前后对照资料表明:在治疗前抗体阳性组和阴性组中甲减发生率分别为12.5％及14.2％,甲减组与非甲减组抗体阳性率分别为70.0％及73.1％,均无显著性差异;~（131）Ⅰ治疗后抗体阳性组和阴性组中甲减发生率分别为6.7％及17.0％,甲减组与非甲减组抗体阳性率分别为20.0％及41.8％,显然抗体阳性对于甲减的发生无影响;同时发现~（131）Ⅰ治疗后46.4％的患者TGA、TMA转阴,而疗前为阴性者疗后无1例出现阳性。427例疗后患者抗体测定结果也与甲亢疗效无关。据此,我们认为甲亢患者TGA、TMA阳性不能作为禁忌~(131)Ⅰ治疗的指征。