快速酶联免疫吸附试验诊断囊虫病的进一步研究——276例血清和脑脊液检测分析

用快速酶联免疫吸附试验检测276例脑囊虫病人血清或脑脊液、阳性率90%。囊液抗原与3例其他寄生虫病(牛带绦虫病、包虫病、肺吸虫病)的血清出现交叉反应,其光吸收值是0.28、0.31和0.33,抗体滴度在1:256以下;而囊虫病人血清光吸收值73.9%分布于0.5～1.5间,抗体滴度1:256～1:8192。囊虫病人脑脊液抗体滴度最高达1:16。12例囊虫病人经吡喹酮治疗后,1～2年內血清抗体转阴者仅1例(1/11),有1例治后4年未转阴。     

诊断脑囊虫病快速ELISA试验方法建立与常规ELISA比较

通过提高抗原抗体结合反应的孵育温度(41℃),以缩短孵育时间,建立起检测脑囊虫病血清抗体的快速 ELISA 试验方法。在此温度下,血清抗体的几何平均滴度为812.58,较之在39℃、43℃和45℃条件下明显增高,同时阳性和阴性血清的免疫比值也最高,表明41℃是囊虫抗原抗体结合反应的适合温度。在此温度下,抗原抗体结合反应的速度明显增快,经过15分钟即可达到充分结合。用快速 ELISA与常规 ELISA 两种方法对30份脑囊虫病人血清同步测试结果表明,快速 ELISA 的光吸收值普遍略高于常规 ELISA。这就表明,在脑囊虫病的血清抗体检测中,快速 ELISA 完全可取代常规 ELISA,它有着简便、快速、敏感性高等优点。     

326例囊虫病诊断分析(摘要)

<正> 我室自1987年至1989年,对326例拟诊为囊虫病的患者进行血清和(或)脑脊液ELISA试验,其结果结合患者的临床表现、脑CT扫描、皮下肌肉结节活检、排节片史等进行分析,表明ELISA试验对诊断囊虫病具有特异性强、敏感性高的优点。癫痫是脑囊虫病患者最常见的症状,接诊的326例患者中,有癫痫症状者167例,其中血清ELISA试验阳性者仅33例,占20%;然而同时血清ELISA试验阳性的78例脑囊虫病人中,有癫痫症状者33例,高达42.3%。脑CT扫描和血清ELISA检查是目前诊断脑囊虫病的有效方法。根据对170例患者的CT扫描和血清     

应用免疫组织化学方法评价组织芯片的可靠性

目的探讨组织芯片技术在免疫组化试验中的可靠性和提高组织芯片可信性的方法。方法选择82例人乳腺癌标本石蜡蜡块,利用传统制片技术和自行研制的专用器具分别制作常规石蜡切片和组织芯片,采用免疫组化技术检测雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的表达。结果采用自行研制的专用器具制备组织芯片,所得样本的可分析率均在92.9%以上,且随着对同一标本取材数量的增加,其可分析标本率也明显上升。采用传统方法检测的82例乳腺癌标本中ER和PR的阳性率分别为61%和58.5%;采用组织芯片技术,一式一份取材,其阳性率分别为51.9%和50.0%,一式两份方式取材,其阳性率分别为53.8%和53.8%,采用一式三份方式取材,其阳性率分别为57.1%和60.7%,且三种不同取材方式的检测结果与传统制片法之间并无统计学差异(P>0.75)。结论在采用统一制备标准并保证组织芯片质量的前提下,挖取直径1.5mm的组织样本制备组织芯片,尽管组织芯片技术与传统方法检测的结果的一致率仍随着对同一标本取材次数的增加而提高,但是三种不同取材方式的检测结果之间并无统计学差异。因此,一式一份取材制备组织芯片完全可替代传统制片技术用于免疫组织化学乃至原位杂交、荧光原位杂交技术的研究,且可保证组织芯片的可信性和高通量特征。     

离体毛囊切片两种制作方法的比较及凋亡检测

目的对人头皮游离毛囊(HF)切片制作及凋亡检测方法进行比较。方法分别将石蜡切片法和冰冻切片法应用于游离毛囊;利用原位缺口末端标记法(TUNEL)进行荧光染色与3,3′-二氨基联苯胺(DAB)染色,检测未经培养的游离毛囊及培养5 d的游离毛囊的不同部位凋亡细胞情况。结果在对游离毛囊形态检测中,各组毛囊在外根鞘(ORS),毛球(HB)下部,真皮鞘(DS)及毛乳头(DP)中的凋亡细胞数并无显著性差异(P>0.05)。结论冰冻切片法应用于游离毛囊简单有效,TUNEL原位荧光结合DAB染色适合于检测毛囊细胞凋亡情况。     

乙型肝炎病毒(HBV)感染者粪便中HBsAg检出情况及其传染性研究

对25名HBV新感染者和11名无症状携带者粪便中HBV感染性指标进行了观察,在所研究的36人中,72.2%可检出HBsAg,如按检测份数计算, 阳性率为35.2%(57/162)。在HBsAg阳性粪便中24.7%(23/93)可以检出HBeAg.并有2份标本HBV—DNA阳性。由于应用了超速离心技术和单克隆抗-HB_s,电镜下多数标本可见抗原颗粒呈大片聚集,其大小、形态与HBsAg阳性血清中所见无异。     

直接ELISA法早期诊断肾综合征出血热

联合应用硫酸鱼精蛋白沉淀和蔗糖垫层超速离心,从感染鼠脑中纯化HFRSV抗原,纯化抗原用HRP标记,成功地建立了采用酶标记HFRSV抗原的IgM抗体捕捉ELISA法,即直接ELISA法,检测HFRS患者血清特异IgM抗体。与已报道的采用酶标记HFRSV IgG的IgM抗体捕捉ELISA法相比。二法敏感度相似,但直接ELISA法可减少一步免疫反应,并能完全避免类风湿因子的干扰。应用直接ELISA法检测临床诊断的HFRS患者血清87份,其中早期患者(1～5病日)血清37份,特异IgM抗体阳性检出率分别为96.5%和91.8%。我们认为酶标记抗原直接ELISA法为HFRS的早期诊断提供了更为特异、简便快速的新方法。     

滴金法检测幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A抗体试剂盒的研制及应用

目的　建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌 (Hp)细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体的胶体金免疫渗滤法 (DIGFA)。方法　采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒 ,标记葡萄球菌A蛋白 (SPA) ,将重组的CagA抗原固定于硝酸纤维素膜上 ,制成免疫渗滤试剂盒。血清中抗CagA抗体与试剂盒上金标记物及硝酸纤维素膜上的固相抗原结合后 ,形成肉眼可见的红色斑点。结果　用DIGFA与酶联免疫吸附试验 (ELISA)试剂盒对比检测了 32 6份血清标本中抗CagA抗体 ,本方法的特异性为 95 .8% ,敏感性为 97.3% ,两种方法符合率为 96 .6 %。结论　DIGFA检测血清中的抗CagA抗体特异性强、灵敏度高、简便快速 ,无需特殊仪器设备 ,有广泛应用价值     

低硒、氧化应激及CVB感染在克山病发病机制中的作用

目的　研究低硒、氧化应激和柯萨奇B组病毒 (CoxsackievirusB ,CVB)感染在克山病发病中的作用。方法　检测了陕西省黄陵县 30例潜在型、慢型克山病患者血清CVB IgM抗体、硒水平、总抗氧化能力以及脂质过氧化物 (LipidPeroxide,LPO)。健康对照选自黄陵县克山病病区和非病区西安市。结果　①克山病患者组CVB IgM阳性率显著高于病区和非病区健康组 ,分别为 43.3%vs 1 5 %和 43.3%vs 1 0 % ,P <0 .0 1 ;②克山病患者和病区健康居民血清硒水平和总抗氧化能力显著低于非病区西安人群 (P <0 .0 5 ) ,但克山病患者血清LPO水平显著高于两健康组 (P <0 .0 5 ) ;③克山病患者CVB IgM( + )者血清Se水平、总抗氧化能力显著低于CVB IgM( - )患者和病区健康组CVB IgM ( + )和CVB IgM ( - )者 (P <0 .0 5 ) ;克山病患者CVB IgM( + )血清LPO水平显著高于其他各组 (P <0 .0 5 )。结论　低硒、氧化应激与柯萨奇病毒感染可能与克山病的发生及发展有一定关系     

潜在型克山病患者柯萨奇B组病毒抗体和红细胞免疫功能的检测

探讨潜在型克山病患者柯萨奇 B组病毒 ( Coxsackie virus B,CVB)感染情况和红细胞免疫功能变化。方法　采用间接酶联免疫吸附法 ( ELISA)对陕西省黄陵县克山病病区潜在型克山病患者 CVB1～ 6Ig M,CVB1～ 6Ig G以及红细胞免疫功能进行检测。结果　 1潜在型克山病组血清 CVB1～ 6Ig M抗体阳性率明显高于非病区健康对照组 ,但明显低于病毒性心肌炎组。2潜在型克山病组血清 CVB1～ 6Ig G抗体阳性率明显高于非病区健康对照组 ,但与病毒性心肌炎组无明显差异。 3潜在型克山病组红细胞 C3 b R花环率明显低于非病区健康对照组 ,血清红细胞免疫粘附抑制率则明显升高 ,而血清红细胞免疫粘附促进率两组之间无明显差异。结论　潜在型克山病患者有 CVB感染存在及红细胞免疫功能低下     

肝炎患者TTV的检测及意义

目的　了解肝炎患者输血传播病毒 (TTV)感染情况 ,探讨其可能的致病作用。方法　采用套式PCR方法检测 2 5例肝炎患者TTVDNA ,对其中 3例进行测序分析。结果　 2 5例各型肝炎中 ,1 2例TTVDNA阳性 ,而 1 8例非甲～庚型肝炎中 8例阳性 ,血清ALT水平均有不同程度升高 ,序列分析与日本株有很高同源性。结论　证实西安地区也存在TTV感染 ,TT病毒可能有一定肝损伤作用 ,TT病毒还可与HBV、HCV重叠感染 ,但似不加重病情。     

THE DETECTION OF HPV16E6，E7 GENES IN TISSUES AND THEIR ANTIBODIES IN THE SERA OF PATIENTS WITH CERVICAL CARCINOMA

ＴＨＥＤＥＴＥＣＴＩＯＮＯＦＨＰＶ１６Ｅ６，Ｅ７ＧＥＮＥＳＩＮＴＩＳＳＵＥＳ　ＡＮＤＴＨＥＩＲ　ＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳＩＮＴＨＥＳＥＲＡＯＦＰＡＴＩＥＮＴＳＷＩＴＨ　ＣＥＲＶＩＣＡＬＣＡＲＣＩＮＯＭＡＬｉｕＴｉａｎｊｕ；ＬｉｕＨｕａ；，ＳｕｎＹｉ；，Ｓ...     

肺结核患者红细胞免疫状态的研究

采用酵母菌花环法检测了44例肺结核患者红细胞C_3b受体活性及免疫复合物粘附量,并对其中15例进行了C_3b受体对血清免疫粘附抑制因子及促进因子反应的观察。结果表明,肺结核患者C_3b受体花环率及免疫复合物花环率均明显高于正常对照组(P0.05);与正常对照组相比,肺结核患者C_3b受体对正常人血清中的免疫粘附抑制因子的反应性无明显改变(P>0.05),而对免疫粘附促进因子反应性增强(P<0.01)。     

用流式细胞测定仪测定AITD患者TRAb

以人工重组ＴＳＨ受体表达的中国仓鼠卵细胞（ＣＨＯ－ＴＳＨＲ）为靶细胞,用流式细胞（ＦＡＣＳ）测定技术,对４５例自身免疫性甲状腺病（ＡＩＴＤ）患者血清中ＳＨ受体抗体（ＴＲＡｂ）进行测定。结果显示：３６例ＧＤ患者阳性细胞结合的百分数为１．９％～７７．４％。阳性率为９１．６６％。其均值２６．１３９％与正常人均值６．１６３％相比有显著性差异（Ｐ＝０．０００１）。９例桥本（ＨＴ）甲减患者５例阳性,阳性率为５５．５６％。证实以ＣＨＯ－ＴＳＨＲ细胞为靶细胞用ＦＡＣＳ进行ＴＲＡｂ汕测定不失为一种敏感简便的新方法。     

食管鳞状细胞癌中的A、B血型抗原

用我们改良的特异性红细胞粘连试验对50例食管鳞癌的A、B血型抗原进行了研究。由于已往该试验都是在不染色切片上观察,有时难予辨认癌细胞或细胞巢,故我们在抗原反应之前将切片作美兰染色。观察后以5%福尔马林和5%戊二醛的PBS固定切片,然后行H E染色,这样切片可长期保存。50例食管鳞癌标本中之正常上皮均为血型抗原阳性,然47例之癌组织却呈不同程度的血型抗原丢失,完全丢失者28例,部分丢失者19例。将癌组织中血型抗原丢失情况与癌组织的分化程度、浸润性、局部转移、淋巴细胞浸润及纤维性间质增生进行比较,发现血型抗原丢失的程度与癌的分化高低呈负相关关系,而与癌的浸润性、局部转移、淋巴细胞浸润及间质增生无明显关系。我们认为癌组织血型抗原丢失可能是随着细胞癌变而来的去分化现象,癌细胞可能丧失了合成这种抗原的能力。     

RIBA在慢性丙型病毒性肝炎中的应用价值

采用含ＨＣＶ三种抗原（Ｃ_（２２），Ｃ_（３３），Ｃ_（１００））的重组免疫印迹试验（ＲＩＢＡ）检测了７１例抗－ＨＣＶ阳性（ＲＩＡ－２法）的慢性非甲非乙型肝炎患者血清并与ＨＣＶＲＮＡ结果进行了比较。ＲＩＢＡ阳性５６例，可疑８例，对应ＨＣＶＲＮＡ检出率分别为９４．６４％（５３／５６）和３７．５％（３／８），ＲＩＢＡ阴性的７例均未检出ＨＣＶ　ＲＮＡ。ＨＣＶＲＮＡ阳性病例中ＲＩＢＡ多为阳性，可疑仅占５．３６％（３／５６），无１例阴性。可见，ＲＩＢＡ阳性即表示ＨＣＶ感染且存在病毒血症，ＲＩＢＡ可作为第二代ＲＩＡ或ＥＬＩＳＡ查抗－ＨＣＶ的确证实验。     

DETECTION OF HPVB19 IN SERA OF KASHIN-BECK DISEASE PATIENTS

ＴｈｅＰａｒｖｏｖｉｒｉｄａｅａｒｅａｆａｍｉｌｙｏｆｓｍａｌｌＤＮＡｖｉｒｕｓｅｓｗｉｔｈｓｉｎｇｌｅ ｓｔｒａｎｄｅｄ ,ｌｉｎｅａｒｇｅｎｏｍｅｓａｐｐｒｏｘｉ ｍａｔｅｌｙ 5 0 0 0ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ(ｎｔ)ｉｎｌｅｎｇｔｈ .Ｔｈｅｙｉｎｆｅｃｔａｖａｒｉｅｔｙｏｆｈｏｓｔｓ ,ｉｎｃｌｕｄｉｎｇｉｎｖｅｒｔｅｂｒａｔｅｓ ,ｂｉｒｄｓａｎｄｍａｍｍａｌｓ ,ｂｕｔｏｎｌｙｐａｒｖｏｖｉｒｕｓＢ19ｉｓｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｔｏｈｕ ｍａｎｂｅｉｎｇ .Ｔｈｅａｇｅｎｔｗａｓｆｉｒｓｔｒｅｃｏｇｎｉｚｅ…