多种化合物对体外培养人滋养层细胞和蜕膜细胞 …

观察６种已知抗生育活性化合物和２２种可能有抗生育活性的天然化合物对体外培养人绒滋养层一长晕细胞和蜕膜细胞的损伤作用，以验证抗生育新药筛选模型并筛选新的抗生育化合物。结论体外培养人洋养层细胞和蜕膜细胞可作为抗生育新药筛选模型，化合物ＴＲ４对体外培养人滋养层细胞和蜕膜细胞均有明显损伤作用，值得进一步深入研究。     

早期自然流产患者绒毛组织中核转录因子-kappa B的表达

目的 探讨核转录因子-κB(NF-κB)在绒毛组织中的表达及活化与早期自然流产的关系.方法 采用免疫组化方法检测早期自然流产患者和同期妊娠的健康妇女绒毛组织中NF-κB p65的表达;激光共聚焦显微镜(CLSM)检测NF-κB p65的核区与胞浆区比值(FN/FC)以观察其活化情况.结果 早期自然流产患者绒毛合体滋养层细胞NF-κB表达强度低于正常早期妊娠妇女,其差异具有统计学意义(P<0.001);早期自然流产患者绒毛间质细胞NF-κB表达的FN/FC(0.7602)明显高于正常早期妊娠妇女(0.6977)(t=3.511,P<0.001).结论 NF-κB在早期自然流产患者绒毛组织合体滋养细胞中的低表达以及其在间质细胞中的过度活化可能与早期自然流产的发生有关.     

诊断剂量的超声波辐照后人胚绒毛的亚微结构改变

诊断剂量超声波辐照人6～9周胚胎,24h后取胎盘绒毛组织在透射电镜下观察,发现合体滋养层和细胞滋养层细胞膜、线粒体及粗面内质网有明显亚微结构改变,主要是细胞膜损伤中断;微绒毛膨大变形;粗面內质网扩张;线粒体肿胀,嵴减少并呈小泡状或不规则膨大。     

良性前列腺增生的形态学改变与ARmRNA表达差异

采用直接法原位ＰＣＲ技术对４例ＮＡＰ和１０例ＢＰＨ组织中ＡＲｍＲＮＡ表达作了检测分析，并对其在ＮＡＰ与ＢＰＨ的表达作了定量比较分析。结果表明∶（１）ＮＡＰ及ＢＰＨ标本ＡＲｍＲＮＡ表达均显示阳性。阳性信号主要定位于靠近核膜的胞浆当中，主要分布在前列腺上皮细胞、间质细胞。（２）前列腺上皮组织中ＡＲｍＲＮＡ表达具区域异质性的特点；部分增生前列腺的腺上皮基底层（ＢＣＬ）细胞阳性表达增强，ＮＡＰ组未发现此现象。（３）图像分析表明无论是ＮＡＰ还是ＢＰＨ，ＡＲｍＲＮＡ在腺上皮的阳性表达强度均强于间质。而ＮＡＰ与ＢＰＨ之间阳性表达强度无显著差异。     

顶盖前区前核痛觉调制作用的形态学探讨──HRP束路追踪和免疫细胞化学研究

应用ＨＲＰ束路追踪和免疫细胞化学技术研究了顶盖前区前核（ＡＰｔＮ）和中脑深部网状核（ＤｐＭｅ）之间的纤维联系以及ＡＰｔＮ内几种神经活性物质的分布。将ＨＲＰ注入ＤｐＭｅ后，发现在ＡＰｔＮ内有ＨＲＰ标记的神经元胞体和纤维终末，表明ＡＰｔＶ和ＤｐＭｅ之间存在着双向纤维联系。ＡＰｔＮ内的ＨＲＰ标记细胞呈背、腹两群的极性分布模式。背侧群标记细胞偏向ＡＰｔＮ吻段分布，其中有相当一部分ＨＲＰ标记细胞也是谷氨酸（Ｇｌｕ）阳性细胞，提示ＡＰｔＮ内的这群细胞向ＤｐＭｅ的投射纤维终末以释放Ｇｌｕ为主。ＡＰｔＮ内的ＨＲＰ标记纤维主要位于ＡＰｔＮ尾段的背外侧和腹侧，提示由ＤｐＭｅ到ＡＰｔＮ的传入纤维可能通过ＡＰｔＮ的背外侧和腹侧两条通路进入ＡＰｔＮ。免疫细胞化学染色显示，ＡＰｔＮ含有Ｇｌｕ、亮－脑啡肽（Ｌ－ＥＮＫ）、Ｐ物质（ＳＰ）、酪氨酸羟化酶（ＴＨ）和５－羟色胺（５－ＨＴ）免疫反应阳性胞体和／或纤维，但没有发现加压素（ＶＰ）和β－内啡肽（β－ＥＮＤ）阳性反应结构。上述阳性反应物质在ＡＰｔＮ内各有自己的分布模式，但并不以哪种活性物质为主，提示ＡＰｔＮ功能的多样性和复杂性。     

胆囊粘膜上皮细胞变化及胆汁中糖蛋白在胆石形成中的作用

对１３例正常人、２８例胆囊结石患者的胆囊粘膜上皮细胞的组织学变化进行对照观察，同时测定胆汁中氨基己糖含量的变化。结果发现：病理性胆囊粘膜上皮细胞呈明显增生性改变，胞质内ＰＡＳ、ＡＢ染色增强，上皮间有大量杯状细胞；胆汁中氨基己糖含量为正常人的２．６倍。提示胆囊粘膜上皮细胞的变化可导致胆汁中糖蛋白含量增高，二者在胆石形成过程中具有重要作用。     

胎盘组织中Human Annexin V的表达及与HBV感染的关系

目的观察Human AnnexinV(HAV)在胎盘组织中的表达,并探讨其在乙型肝炎病毒(HBV)感染胎盘中的可能作用。方法用免疫荧光染色法检测早孕绒毛,中孕和足月胎盘绒毛中HAV的表达;用免疫荧光双重染色法观察HBV感染的胎盘组织HBsAg和HAV的分布及相互关系。结果①所有的标本绒毛滋养层细胞、绒毛间质细胞、毛细血管内皮细胞都有HAV的存在。②HBV感染的胎盘绒毛中只要是HBsAg阳性的部位同时一定有HAV的表达,阳性信号存在于滋养层细胞、绒毛间质细胞、绒毛毛细血管内皮细胞中。结论HAV可能作为HBsAg的特异性受体介导了HBV与胎盘组织各层细胞的粘附、内化等过程并最终导致了HBV对胎盘的感染。     

体外培养胃癌细胞的Ⅳ型胶原酶,ras—P21及CEA表达研究

应用免疫细胞化学方法，研究人胃癌培养细胞中Ⅳ型胶原酶，ｒａｓ－Ｐ２１及ＣＥＡ分布民表达。结果显示：被测胃癌细胞中Ⅳ型胶原酶，ｒａｓ－Ｐ２１，ＣＥＡ均呈阳性，表明培养的胃癌细胞具有合成和异常表达Ⅳ型胶原酶、ｒａｓ－Ｐ２１和ＣＥＡ的作用，结合文献讨论了Ⅳ型胶原酶，ｒａｓ－Ｐ２１，ＣＥＡ与胃癌细胞浸润转移之间的相互关系。     

β肾上腺素能受体阻断剂诱导胰腺癌细胞株PC-2凋亡的实验研究

目的 观察β肾上腺素能受体阻断剂是否通过诱导胰腺癌细胞凋亡而产生抑制效应.方法 利用特异性β1肾上腺素能受体阻断剂美托洛尔、广谱β肾上腺素能受体阻断剂普萘洛尔、特异性β2肾上腺素能受体阻断剂丁氧胺干预诱导人胰腺癌PC-2细胞.RT-PCR和Western blot检测PC-2细胞β受体的表达.用Hoechst 33342荧光染色,TUNEL染色和Annexin V-FITC/PI流式细胞仪观察和分析PC-2细胞凋亡情况,用Western blot检测Caspase-3,Caspase-9和Caspase-8的表达.结果 PC-2细胞表达β1和β2肾上腺素受体,尤以β2受体的表达占优势.Hoechst 33342荧光染色、TUNEL染色和流式细胞仪分析表明三种受体阻断剂均诱导了PC-2细胞的凋亡,TUNEL染色法结果显示丁氧胺诱导的细胞凋亡率[(15.4±1.99)%]强于普萘洛尔[(11.25±1.95)%],而普萘洛尔诱导的细胞凋亡率优于美托洛尔[(7.62±1.46)%].流式检测结果显示丁氧胺诱导的细胞凋亡率[(16.2±1.58)%]优于普萘洛尔[(14.7±1.96)%],而普萘洛尔诱导的细胞凋亡率高于美托洛尔[(6.29±1.77)%].Western blot分析显示三种受体阻断剂诱导了Caspase-3和Caspase-9活性片段的表达,而Caspase-8未受影响.结论 β肾上腺素能受体阻断剂可诱导胰腺癌细胞凋亡,主要是通过阻断β2受体发挥内源性凋亡效应.     

银屑病表皮中增殖细胞抗原与转化生长因子－α的表达水平

应用免疫组化技术检测４８例寻常性银屑病表皮角朊细胞中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）、转化生长因子（ＴＧＦ－α）的表达水平，结果发现二者在银屑病皮损处角朊细胞中的表达水平（阳性细胞数目和着色）都有不同程度升高。经统计学处理与正常对照组相比，ＰＣＮＡ无显著性差异，但因在免疫染色中ＰＣＮＡ有１／３的假阴性，故尚不能轻易否定ＰＣＮＡ在银屑病发生发展中的作用；ＴＧＦ－α确有显著性差异，并发现角朊细胞中ＴＧＦ－α的表达丰度与该处病变的严重程度呈正相关。     

小鼠免疫细胞流式染色过程中细胞丢失量的影响因素

目的观察和探讨小鼠免疫细胞多色流式染色过程中细胞丢失的影响因素。方法取C57BL/6J鼠制备脾细胞悬液,分别用不同种类、不同成分和不同pH值缓冲液洗涤和重悬细胞2次,并计数活细胞数量,观察对染色过程中的细胞丢失量有明显影响的因素。结果在小鼠免疫细胞的流式染色标记过程中,缓冲液种类对细胞丢失量有显著影响,含有钾离子的PBS缓冲液洗涤后会造成明显的细胞丢失;离心机转速过高或过低均会导致显著的细胞丢失;而缓冲液pH值的微量偏移和是否加入FBS/BSA对细胞的丢失影响不明显。结论小鼠免疫细胞的流式染色过程中使用含有钾离子的PBS缓冲液会造成明显的细胞丢失,应推荐使用不含钾离子的PBS缓冲液,同时保持离心转速适中。     

叶酸对白血病细胞周期分布的影响

目的：研究叶酸（ＦＡ）影响白血病细胞增殖和细胞周期分布，以探讨ＦＡ抑制白血病细胞增殖的机理。方法：体外培养白血病细胞株ＨＬ－６０、Ｋ５６２。利用台盼蓝拒染法进行细胞计数，流式细胞术检测细胞周期分布。结果 １０ｎｍｏｌ／Ｌ和３００ｎｍｏｌ／Ｌ的ＦＡ对ＨＬ－６０细胞无显著性抑制。而１００ｎｍｏｌ／Ｌ ＦＡ对ＨＬ－６０细胞作用４８ｈ后出现显著性抑制作用。不同的是，１０ｎｍｏｌ／Ｌ和１００ｎｍｏｌ／Ｌ Ｆ     

转录调节因子E26转录因子-1蛋白在胎膜早破中的表达和意义

目的 探讨E26转录因子-1(E26 transformation specific-1, Ets-1)蛋白在胎膜早破中的表达和意义.方法 采用免疫组织化学S-P法在蛋白水平检测75例胎膜早破者(病例组)及70例无其他产科并发症及内外科合并症的足月择期剖宫产者(对照组)胎膜中Ets-1蛋白的表达.结果 ①Ets-1蛋白在胎膜滋养层细胞核及胞浆中均有表达,以胞核表达为主;②Ets-1蛋白在胎膜早破组滋养层中高表达,与对照组比较,有显著性差异(P<0.05);③Ets-1蛋白在未足月胎膜早破组滋养层中高表达,但与足月胎膜早破组比较,无显著性差异(P>0.05).结论 转录调节因子Ets-1在人类胎膜上有表达,且在胎膜早破中高表达,表明Ets-1蛋白可能使胎膜细胞外基质重塑从而引发胎膜早破.本研究可作为预测胎膜早破发生的依据.     

CD95L和TGF-β在与胰岛细胞共同培养的Sertoli细胞上表达

目的　观察生物半透膜 (BSM)包裹胰岛样细胞团 (ICCs)与富含Sertoli细胞的睾丸样细胞团 (SC)体外培养时 ,Sertoli细胞是否同时表达CD95L和TGF β基因及体外抗免疫排斥作用的效果。方法　BSM包裹猪ICCs和SC ,与人淋巴细胞进行培养。免疫组化染色观察CD95L、TGF β的表达。通过测定胰岛素浓度和刺激释放实验 ,AO PI荧光双染色和TUNEL染色 ,观察培养细胞的结构功能状况。结果　ICCs和SC共同培养时 ,许多Sertoli细胞表达CD95L和TGF β蛋白。与淋巴细胞培养后 ,胰岛素分泌良好 ,刺激释放实验比值 >2 0 ,AO PI荧光染色超过 95 %的细胞存活 ,TUNEL染色未发现凋亡细胞。结论　Sertoli细胞与胰岛细胞共同培养时可出现CD95L和TGF β同时表达的微环境     

瑞芬太尼预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的探讨瑞芬太尼预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中细胞凋亡的影响。方法 SD大鼠20只,体重280～320 g,随机分为2组。瑞芬太尼预处理(R)组(n=10)经股静脉注入瑞芬太尼,速度为0.6μg/(kg.min),每次输注5 min,连续3次,中间间隔5 min;盐水对照(C)组(n=10)经股静脉注入生理盐水,每次输注5 min,连续3次,中间间隔5 min;30 min后对所有动物的右侧颈内动脉用尼龙线线栓法致大脑中动脉阻闭120 min,然后拔出尼龙线恢复再灌注。再灌注2 h后处死动物,取大脑组织标本,原位细胞凋亡法测定细胞凋亡的情况,HE染色观察形态学变化。结果光镜观察发现R组细胞肿胀坏死明显减轻,凋亡细胞及坏死细胞较C组明显减少。再灌2 h后R组凋亡细胞阳性率、TUNEL阳性率较C组减少(P<0.05)。结论瑞芬太尼能减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤,抑制神经细胞凋亡坏死,具有脑保护作用。     

BALF中SOD和溶菌酶检测对肺癌的诊断意义

对７４例肺癌和７６例良性肺病患者进行了血清及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和溶菌酶（ＬＺＭ）的测定，结果表明：①肺癌患者血清及ＢＡＬＦ中ＳＯＤ水平明显降低，以癌患侧ＢＡＬＦ中ＳＯＤ降低最明显，阳性率为７１．８％。腺癌较鳞癌及小细胞癌低，周围性肺癌较中央型低，Ⅲ、Ⅳ期较Ⅰ、Ⅱ期低。②肺癌患者血清及ＢＡＬＦ中ＬＺＭ水平降低，阳性率为４６．３％和５９．７％。小细胞癌降低最明显，晚期肺癌较早期更低。③ＳＯＤ和ＬＺＭ联合检测诊断肺癌的价值明显优于单项指标检测，其敏感性、特异性分别高达８７．８％和８９．５％。提示：通过血清及ＢＡＬＦ中ＳＯＤ和ＬＺＭ联合检测对肺癌早期诊断、病理分型及预后判断有一定意义。     

CD_3AK细胞对白血病细胞的体外杀伤作用

ＣＤ３单克隆抗体（ＣＤ３ＭｃＡｂ）对Ｔ细胞具有强烈的丝裂原作用。本文显示将ＣＤ３ＭｃＡｂ联合ＩＬ－２激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ）对人急性白血病新鲜细胞和Ｋ５６２细胞均有明显杀伤作用。正常人ＣＤ３ＡＫ细胞对各型急性白血病杀伤活性无差别;正常人与白血病缓解期的ＣＤ３ＡＫ细胞杀伤力类同,且自体与异体亦无区别;但是,复发期ＣＤ３ＡＫ细胞杀瘤作用明显减弱。     

大鼠来源脂肪干细胞的分离培养及其分化能力的检测

目的分离、培养及鉴定SD大鼠来源脂肪干细胞,为后续实验选取合适的种子细胞奠定基础。方法切取SD大鼠腹股沟处皮下脂肪,利用酶原消化合并差速贴壁的方法获得细胞,在倒置相差显微镜下观察细胞形态和增殖特征,测定其生长曲线,进行冻存复苏实验。第3代细胞在成骨诱导液作用下向成骨方向分化,进行Ⅰ型胶原染色、碱性磷酸酶染色、茜素红染色;使用成脂诱导液诱导其向成脂方向分化,进行油红O染色。结果从大鼠脂肪组织获得的细胞,呈成纤维细胞样生长;经成骨诱导液培养后,表现出成骨细胞特性,Ⅰ型胶原染色、碱性磷酸酶染色、茜素红染色均呈阳性;经成脂诱导液培养后,表现出脂肪细胞特性,油红O染色后,胞浆内可见脂肪滴。脂肪干细胞在液氮中冻存2个月复苏后,其生长增殖活性和多向分化能力没有明显降低。结论成功分离和培养大鼠脂肪干细胞,获得的细胞增殖旺盛,具有多向分化潜能,为后期运用组织工程技术修复组织损伤,提供了坚实的基础。     

钙粘连分子与肿瘤

钙粘连分子与肿瘤陈静宏，陈高平（西安病理解剖学教研室西安７１００６１）对细胞粘连分子（ｃｅｌｌａｄｈｅｒｉｎｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，ＣＡＭ）的认识是近几年肿瘤研究中重要进展之一。细胞粘连分子是细胞表面的跨膜糖蛋白分子，包括整合蛋白（ｉｎｔｅｇｒｉｎｓ），...     

涎腺粘液表皮样癌中角蛋白、波形蛋白和S-100蛋白的定位研究

用免疫组化法对37例涎腺粘液表皮样癌中角蛋白、波形蛋白和S-100蛋白定位进行观察,发现表皮样细胞和中间细胞呈角蛋白、波形蛋白和S-100蛋白阳性,粘液细胞呈角蛋白和S-100蛋白阳性。肿瘤团块中有些散在梭形、星形或不规则形细胞呈S—100蛋白强阳性;囊腔和腺管腔面细胞基部也有梭形、扁平或不规则形细胞呈S-100蛋白强阳性及波形蛋白和角蛋白阳性。在肿瘤细胞索外周还发现些梭形或扁平细胞是S-100蛋白、波形蛋白和角蛋白阳性。提示,涎腺粘液表皮样癌为上皮源性肿瘤,实质内存在肌上皮细胞,肌上皮细胞与中间细胞似有直接关联。