抗哇巴因多克隆抗体F(ab)2 片段的研制及鉴定

目的用胃蛋白酶酶解抗哇巴因多克隆抗体,制备出片段,为改型抗体的研究提 供依据。方法免疫家兔制备出抗哇巴因多克隆抗体,并用胃蛋白酶分别在不同的酶解条件下消化抗体,继之用高效液相排阻色谱法(HPSEC)对其进行分析、纯化,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测、鉴定其活性。结果用胃蛋白酶2mg／100mg抗哇巴因多克隆抗体,消化18h,反应体系的pH3.0时,可获得片段。结论用胃蛋白酶酶解抗哇巴因多克隆抗体是研制出有活性的片段的有效方法。     

抗哇巴因鸡蛋黄抗体IgY的制备

目的制备出高特异性的抗哇巴因多克隆抗体,为进一步提高内源性哇巴因的检测的敏感性和特异性提供实验基础。方法采用不同剂量哇巴因-牛血清白蛋白耦联物(0.5 mg/kg;1.0 mg/kg)免疫母鸡,收集鸡蛋;采用聚乙二醇法分离、纯化鸡蛋黄中抗哇巴因抗体;用酶联免疫吸附法检测IgY(yolk immunoglobulin)的抗体效价。SDS-PAGE电泳分析IgY纯度。结果免疫后1周,鸡蛋黄中可检测出IgY;免疫后6周,鸡蛋黄中IgY的效价迅速升高,最高效价达到1∶10 240,持续至少4周。结果还显示,大剂量免疫母鸡获得高效价抗体持续时间较长。结论采用大剂量哇巴因-牛血清白蛋白耦联物免疫母鸡,可以获得较高效价的抗哇巴因IgY。该方法简单,高效价抗体持续时间长,是制备抗体较为有效的方法。     

嗜铬细胞瘤组织中内源性哇巴因表达的意义

目的　探讨内源性哇巴因 (EO)在肾上腺嗜铬细胞瘤组织中表达的意义。方法　采用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白 过氧化酶连接法 (SP法 )检测EO在嗜铬细胞瘤组织中的表达。结果　血压与EO在嗜铬细胞瘤组织中的表达呈现相关关系。伴有血压升高的嗜铬细胞瘤患者 ,其瘤组织中EO呈弥漫性强阳性表达 ;而EO在不伴有血压升高的嗜铬细胞瘤患者则呈现阴性表达。结论　EO与嗜铬细胞瘤所致的高血压关系密切 ,为其进一步研究提供了有价值的形态学依据。     

独立B型LNG船液舱晃荡强度分析方法

为了保证液舱舱容大且无装载限制的新型独立B型LNG船在晃荡载荷下的强度满足使用要求,提出液舱结构晃荡强度直接分析方法.采用规范公式确定液舱晃荡载荷,根据该方法对液舱模型进行粗网格分析,进行典型区域横摇工况下超出应力许用值的精细网格分析.结果表明,该方法可以对独立液舱晃荡强度进行有效评估,其中的精细网格计算结果可真实反映高应力梯度区域的应力情况.分析结果可为液舱晃荡强度评估、液舱结构优化以及同类LNG船的设计开发提供参考.     

抗哇巴因多克隆抗体F(ab)2 片段的研制及鉴定

目的　用胃蛋白酶酶解抗哇巴因多克隆抗体 ,制备出F(ab) 2 片段 ,为改型抗体的研究提供依据。方法　免疫家兔制备出抗哇巴因多克隆抗体 ,并用胃蛋白酶分别在不同的酶解条件下消化抗体 ,继之用高效液相排阻色谱法 (HPSEC)对其进行分析、纯化 ,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测、鉴定其活性。结果　用胃蛋白酶 2mg/1 0 0mg抗哇巴因多克隆抗体 ,消化 1 8h ,反应体系的 pH3 0时 ,可获得F(ab) 2 片段。结论　用胃蛋白酶酶解抗哇巴因多克隆抗体是研制出有活性的F(ab) 2 片段的有效方法     

哇巴因结合肽拮抗哇巴因抑制钠泵作用的研究

目的　获得特异性的哇巴因结合肽 (OCP) ,拮抗或阻断哇巴因 (EO)对Na+ 、K+ ATP酶的抑制作用 ,为高血压的治疗提供理论和实验依据。方法　采用生物淘洗的方法 ,筛选噬菌体展示 12肽库。随机挑选所筛出的结合肽 ,经扩增、DNA提取及测序 ,获得其基因序列 ,然后推导出其氨基酸序列。选择序列一致率最高的肽序列 ,进行肽合成。采用红细胞86Rb摄取率实验测定OCP拮抗EO对Na+ 、K+ ATP酶的抑制作用。结果　Leu Leu Ala Asp Thr Thr His His Arg Pro Trp Thr为筛选肽序列一致率最高的肽序列。红细胞86Rb摄取实验结果表明 ,OCP可以阻断EO对红细胞膜钠泵的抑制作用 ,可以使红细胞摄86Rb率从 6 0 %升高到 80 %左右 ,呈现一定的剂量依赖关系。结论　本实验结果不仅获得了特异性OCP ,而且为高血压的治疗以及与EO相关疾病的诊断、治疗提供了一条新的途径。     

EXPRESSION OF ENDOGENOUS OUABAIN IN MULTIPLE ADRENAL TUMORS

Ａｄｒｅｎａｌｓ ,ｗｈｉｃｈｃａｎｋｅｅｐｔｈｅｂａｌａｎｃｅｏｆｉｎｎｅｒｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ,ａｒｅｉｍｐｏｒｔａｎｔｅｎｄｏｃｒｉｎｅｓ ,ａｎｄｌｏｔｓｏｆｄｉｓｅａｓｅｓａｒｅｒｅｌａｔｅｄｔｏｔｈｅｉｒｆｕｎｃｔｉｏｎ .ＴｈｅｐｒｅｓｅｎｃｅｏｆａｎｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓＮａ ,Ｋ - ｐｕｍｐｉｎｈｉｂｉｔｏｒｉｎｍａｍ ｍａｌｓ ,ｗｈｉｃｈｃａｎａｆｆｅｃｔｒｅｎａｌＮａ ｅｘｃｒｅｔｉｏｎ ,ｖａｓｃｕｌａｒｃｏｎｔｒａｃｔｉｌｉｔｙ ,ａｎｄｎｅｒｖｏｕｓｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ ,ｈａｓｂ…