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幽门螺杆菌尿素通道蛋白基因UreI载体的构建、融合表达及纯化 总被引:2,自引:0,他引:2
目的构建幽门螺杆菌(H.pylori,Hp)尿素通道蛋白基因UreI的融合表达载体,并在E.coliBL21中表达,为进一步研究UreI的功能奠定基础。方法利用分子克隆技术以Hp DNA染色体为模板,扩增Hp UreI基因片段,将目的基因UreI与载体pET32a( )分别经kpnⅠ和HindⅢ双酶切,纯化,连接。筛选阳性重组载体,转化大肠杆菌BL21,以IPTG诱导表达pET32a( )/UreI融合蛋白。表达产物经Ni-NTA琼脂糖树脂纯化后,用SDS-PAGE及Western blot分析。结果经酶切、测序分析表明,插入的基因片段为Hp UreI编码基因,由585 bp组成,与GenBank相应菌株HP AM417 609序列完全一致,无碱基突变。经SDS-PAGE分析显示重组质粒pET32a( )/UreI在原核细胞中得到了高效融合表达,其重组融合蛋白分子量为130 ku,经Ni-NTA琼脂糖树脂纯化后,其纯度达95%以上,Western blot分析显示,该重组融合蛋白可被6-His鼠抗单克隆抗体所识别,具有良好的反应原性。结论成功地克隆和构建了原核表达载体pET32a( )/UreI,并在原核细胞中得到了高效融合表达。 相似文献
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正目前美丰拥有国内规模最大、技术最先进的车用尿素溶液生产线,生产的加蓝牌柴油车尾气处理液(AdBlue?,又名车用尿素溶液),采用洁净的原料,生产、销售和物流各环节按照GB 29518-2013和ISO 22241标准严格管控。马年伊始,雾霾再度来袭。据环保部通报,2014年2月20—27日,我国中东部地区大部分省份都出现了灰霾,影响面积约为143万km2,约占国土面积的15%。其中,重度灰霾面积约为81万km2,主要集中在北京、河北、山西、山 相似文献
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博世DeNOx2.2尿素喷射系统主要包括尿素供给单元(尿素泵)、尿素喷射单元(尿素喷嘴)、尿素箱、尿素管路及喷射控制单元(DCU)。博世DeNOx2.2系统没有单独的DCU,DCU的功能集成在发动机ECU。DeNOx 2.2尿素喷射系统原理示意图如图1所示。 相似文献
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已被环保部推迟2年之久的"国Ⅳ排放标准"将在7月1日实行。为匹配国Ⅳ排放标准而加注的车用尿素生产企业如雨后春笋般大量出现。其中,四川美丰年产60万吨级的车用尿素装置已经建成,于4月份投入生产。四川美丰化工股份有限公司是由中国石化集团控股的一家化工类上市公司,公司成立于1975年。1997年在深交所上市,2003年资产重组,中 相似文献