潜在型克山病活检心肌线粒体呼吸酶的超微结构定位

本文对云南楚雄潜在型克山病活检心肌线粒体SDH和CCO进行了超微结构定位及活性研究。潜在型克山病心肌线粒体SDH主要表现各种类型的活性改变,有1/3的线粒体嵴膜和内膜酶反应产物趋于阴性;在1/20的完全失去定位的线粒体中,向基质自由弥散的酶产物代偿性增高。心肌线粒体CCO主要表现为各种类型的定位改变,3/5的线粒体不同程度地失去嵴膜定位,约1/5的线粒体酶反应趋于阴性;在1/5的完全失去定位的线粒体中,向基质弥散的酶产物代偿性增高。结果说明,潜在型克山病患者在致病因子作用下,其心肌线粒体SDH活性减低,呼吸链在CCO环节受阻。     

大骨节病软骨细胞线粒体功能及其与患者年龄的相关性

目的评估大骨节病患者软骨细胞的线粒体功能及其与年龄的关系。方法关节软骨细胞体外培养,分光光度法测定呼吸链复合体活性,化学发光法检测细胞内ATP,流式细胞仪检测线粒体膜电位和细胞内活性氧含量,线性回归分析线粒体功能与年龄的相关性。结果大骨节病线粒体呼吸链复合体Ⅱ(P=0.001)、Ⅲ(P=0.005)和Ⅳ(P=0.005)活性降低,柠檬酸合酶活性升高(P=0.04),细胞内ATP含量减少(P=0.001),线粒体膜电位下降(P=0.001),细胞内活性氧含量增加(P<0.001);线粒体功能与年龄在大骨节病和正常对照组均无显著相关性。结论大骨节病软骨细胞存在线粒体功能障碍,线粒体功能与年龄间无显著相关性。     

大鼠心肌线粒体琥珀酸脱氢酶细胞色素氧化酶的超微结构定位(摘要)

<正> 应用DAB法对细胞色素氧化酶(CCO)和应用铁氰化物技术对琥珀酸脱氢酶(SDH)作超微结构定位,已被广泛接受。从理论上讲,SDH是定位于线粒体嵴膜的内侧面,CCO是定位于线粒体嵴膜的外侧面,但是从众多文献看,由于反应产物过溢及移位扩散,实际上均定位于线粒体嵴腔及线粒体外窒。 1.对SDE超微结构技术的改进:(1)对固定剂浓度及固定时间作合理筛选,以最大程度保存SDH的活性;(2)组织在反应基质中孵育后,再用DAB处理以增强反差;(3)对不同时间孵育的组织作动态观察,以选择最佳孵育时间,发现短期孵育后,SDH主要定位于线粒体嵴膜及内膜,当延长孵育时     

黄芪预处理对家兔心肌缺血再灌注后心肌线粒体结构及功能的影响

目的 观察黄芪预处理对兔心肌缺血再灌注时心肌线粒体功能及结构的影响.方法 将家兔32只随机分为假手术组(A组)、心肌缺血再灌注组(B组)、黄芪预处理组(C组)和5-羟葵酸加黄芪预处理组(D组),每组8只动物.观察线粒体Ca2 浓度、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及线粒体超微结构的改变.结果 黄芪预处理组SOD活性明显高于心肌缺血再灌注组(P<0.05),而Ca2 浓度、MDA含量则低于心肌缺血再灌注组(P<0.05,P<0.01).5-羟葵酸加黄芪预处理组与心肌缺血再灌注组各指标比较,差异无统计学意义.黄芪预处理组同心肌缺血再灌注组和5-羟葵酸加黄芪预处理组相比较,线粒体超微结构损伤明显减轻.结论 黄芪可降低线粒体氧自由基水平、减轻线粒体钙超载,从而改善缺血再灌注心肌的线粒体结构及功能,发挥心肌保护作用,且其很可能通过线粒体ATP敏感性钾通道发挥作用.     

硒对克山病病区粮喂养大鼠心肌线粒体细胞色素氧化酶影响的电镜观察

本实验对病区粮及病区粮加硒喂养大鼠心肌细胞色素氧化酶(CCO),进行超微结构观察,发现病区粮加硒组大鼠心肌线粒体CCO 活性较病区粮组明显升高,并均定位于线粒体嵴膜和内膜,而病区粮组除一例大鼠心肌线粒体CCO 表现明显定位异常外,其余均未发现明显定位改变。     

葛根素对过氧化氢诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用

目的探讨葛根素对过氧化氢诱导人血管内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用及其机制。方法培养HUVECs并分组:正常组(不加任何干预因素);过氧化氢组(在细胞培养体系中加入终浓度为0.5mmol/L过氧化氢);葛根素25mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L组(先分别加入相应质量浓度葛根素干预30min后,再加入过氧化氢)。各组培养24h后,通过MTT法检测细胞增殖能力;检测纤溶酶原激活物(t-PA)及纤溶酶原激活剂抑制物(PAI)活性观察HUVECs功能;取培养上清液测定超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)的含量;采用Annexin V/PI染色后,应用流式细胞仪检测HUVECs凋亡率,并检测caspase-3表达水平与线粒体膜电位变化。结果与正常组比较,过氧化氢可明显降低HUVECs增殖活性(P<0.01),t-PA活性下降及PAI活性增加;而预防应用不同浓度葛根素能够不同程度对抗其作用,且最佳保护浓度是100mg/L。与过氧化氢组比较,葛根素能够显著降低HUVECs的MDA水平、细胞凋亡率、caspase-3阳性率及线粒体损伤率,能够显著提高HUVECs的SOD水平(P<0.05)。结论葛根素对氧化应激诱导HUVECs损伤具有一定的保护作用,其机制可能与其抗氧化、维持线粒体膜电位、减低caspase-3表达而抑制细胞凋亡有关。     

风湿性心脏病心肌细胞线粒体膜磷脂损伤与换瓣术后低心排血量的关系

目的　探讨风湿性心脏病心肌细胞线粒体膜磷脂损伤与换瓣术后低心排血量的关系。方法　将 2 0例风湿性二尖瓣替换患者按术后有无严重低心排血量分为正常心排血量组 (n =1 4)和低心排血量组 (n =6) ,另 8例健康意外脑死亡者心肌为正常对照组。应用电镜细胞化学法测定术前右房心肌细胞线粒体膜磷脂超微结构定位改变 ,同时测定术中再灌注 3～ 5min时全心肌氧摄取率 ,并定量分析上述指标变化与术后低心排血量的关系。结果　风湿性心脏病心肌细胞线粒体膜磷脂结构定位呈现不同程度的脱失改变。其中低心排血量组与正常心排血量组比较 ,心肌细胞线粒体膜磷脂结构小部分脱失 (7 5%± 2 6%vs 4 9%± 1 6% )和大部分脱失(4 5%± 2 0 %vs 2 6%± 1 7% )比率均明显增高 ,且再灌注 3～ 5min时全心肌氧摄取率 [(2 .30± 0 50 )Vol%vs(3.42± 0 .60 )Vol% ]明显降低 (P均 <0 0 5)。结论　风湿性心脏病心肌细胞线粒体膜磷脂结构定位脱失程度与换瓣术后低心排血量的发生密切相关 ,可能是参与术后低心排血量形成、发展的细胞基础之一。     

缺血后处理对大鼠肠缺血-再灌注损伤肠黏膜细胞线粒体的影响

目的探讨缺血后处理对大鼠肠缺血-再灌注损伤肠黏膜细胞线粒体的影响。方法SD大鼠32只随机分为4组(n=8):假手术(S)组、缺血-再灌注(I/R)组、缺血预处理(IPC)组、缺血后处理(I-post)组。应用透射电子显微镜、四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、激光共聚焦扫描显微镜分别观测各组大鼠肠黏膜细胞线粒体的形态结构、呼吸功能以及线粒体跨膜电位的变化。结果与I/R组相比,I-post组和IPC组大鼠肠黏膜细胞线粒体形态结构改变明显减轻,线粒体呼吸功能和线粒体跨膜电位明显升高(P<0.05);I-post组与IPC组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论缺血后处理抗大鼠肠缺血-再灌注损伤的作用机制可能与改善肠黏膜细胞线粒体的形态结构和呼吸功能及提高线粒体跨膜电位有关。     

斑蝥素中毒大鼠酶化学研究(Ⅱ)——NADHD及CCO的细胞化学观察

本实验是在观察了斑蝥素中毒大鼠心、胃、小肠的NADHD及CCO组织化学改变的基础上,进一步观察了心肌线粒体内NADHD和CCO细胞化学变化。结果表明,与对照组相比,斑蝥素染毒后1h NADHD和CCO的活性均开始下降,以后随中毒时间延长而加重,至24 h,线粒体已无可分辨的嵴,成为一片均质状,酶定位改变。说明斑蝥素可破坏线粒体的结构,并影响定位于其上的NADHD及CCO的活性。     

磷酸肌酸预处理对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的探讨磷酸肌酸(PCr)预处理对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法诱导糖尿病大鼠模型,2周后随机分为3组:假手术组(D1),缺血再灌注组(D2),缺血再灌注+PCr给药组(D3);观察缺血区心肌线粒体超微结构,计算凋亡指数(AI),测定心肌匀浆中磷酸腺苷和PCr的含量,并计算能荷值(EC)。结果与D2组相比,D3组线粒体肿胀变性的损伤较轻,AI降低,ATP、PCr含量和EC均升高(P<0.05)。结论 PCr通过维护心肌线粒体结构和功能的完整性,提高心肌组织内能量物质的含量,减少心肌细胞的凋亡,从而对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤起到保护作用。     

斑蝥素中毒大鼠酶化学研究(Ⅰ)——NADHD及CCO的组织化学观察

本实验对急性斑蝥素染毒大鼠的心、胃及小肠进行了还原型尼克酰胺腺嘌吟二核苷酸脱氢酶(NADHD)和细胞色素氧化酶(CCO)组织化学的实验观察。结果表明,染毒大鼠这三种组织的NADHD和CCO与对照组相比,酶反应颗粒均减少,着色变淡,分布稀疏。提示斑蝥素可使其活性受到不同程度的抑制。     

硒对心肌线粒体机能影响的研究 (Ⅰ)硒对大白鼠心肌线粒体氧化磷酸化的影响

本文用克山病病区粮和病区加硒粮分别饲喂大白鼠15～16周,以状态3呼吸速率、状态4呼吸速率、呼吸控制率和p/o比值等指标,对比观察硒对心肌线粒体氧化磷酸化的影响。发现硒可防止由病区粮引起的心肌线粒体氧化磷酸化的损害、ADP对细胞呼吸控制功能的紊乱以及线粒体结构完整性的损害。还证明了病区粮不引起线粒体氧化和磷酸化偶联过程的异常。并从能量代谢角度探讨了克山病的可能发病机理。     

SUPEROXIDE DISMUTASE ACTIVITY AND MEMBRANE LIPIDSCOMPOSITION OF ERYTHROCYTES IN PATIENTS WITH DILATEDCARDIOMYOPATHY

Dilatedcardiomyopathyisakindofunknowncausesheartmuscledisease.Inrecentyears,theroleoflipid-peroxidationcausedbyoxygenfreeradicalsinjuryinthepathogenesisofmyocardialinjuryanddilatedcardiomyopathyhasbeenpaidmuchattention.Ithasbeendemonstratedthattheselenium(Se)content,glutathioneperoxidase(GSH-Px)activitiesdecreasedandtheserumcon-tentofmalondiadehyde(MDA)increasedsignifi-cant1yinthepatientswithdilatedcardiomyopathy.Itcanbesupposedthattheabilityofanti-peroxida-tionhaddecreasedinthosepatients"…     

含硒停搏液对大鼠心肌缺血／再灌注损伤的保护作用

采用Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ灌注模型，对心肌缺血／再灌注损伤中氧自由基清除酶系统超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＰｘ）和乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、磷酸肌酸激酶（ＣＫ）、丙二醛（ＭＤＡ）、超微结构的变化及硒的抗氧化效应进行了观察。随缺血时间的延长，ＬＤＨ、ＣＫ活性及ＭＤＡ的含量增加，而ＳＯＤ、ＧＰＸ的活性降低，此时超微结构损伤严重。预先给Ｓｔ·Ｔｈｏｍａ’ｓ停搏液中加入亚硒醚钠再进行缺血／再灌注，冠脉流出液中的ＬＤＨ、ＣＫ活性降低，心肌ＭＤＡ含量减少；而心肌ＳＯＤ、ＧＰＸ的活性明显高于单纯缺血／再灌注时，超微结构损伤亦较轻。因此，说明了含硒Ｓｔ·Ｔｈｏｍａ’ｓ停搏液对大鼠心肌缺血／再灌注的损伤具有保护作用。     

EFFECTS OF CHRONIC STRESS ON THE ACTIVITIES OF SOD, GSH-Px AND MDA LEVEL IN FEMALE RATS‘ BRAIN

“ＣｉｔｙＳｔｒｅｓｓＳｙｎｄｒｏｍｅ” ,ｓｕｃｈａｓａｎｘｉｅｔｙ ,ｍｅｍｏｒｙｒｅｃｅｓｓｉｏｎａｎｄｎｅｕｒａｓｔｈｅｎｉａ ,ｉｓｂｅｃｏｍｉｎｇａ ｇｌｏｂａｌｐｈｅｎｏｍｅｎｏｎ .Ｏ’Ｂｒｉｅｎｒｅｐｏｒｔｅｄｔｈａｔ ｐｒｏｌｏｎｇｅｄｓｔｒｅｓｓｍｉｇｈｔｃａｕｓｅ ｐｅｒｍａｎｅｎｔｂｒａｉｎｄａｍａｇｅ[1] .Ｑｕｅｒｖａｉｎ’ｓｒｅｓｅａｒｃｈｅｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｃｈｒｏｎｉｃｓｔｒｅｓｓｃｏｕｌｄｉｍｐｒｏｖｅｍｅｍｏｒｙｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｍｅｄｉａｔｅｄｂｙｈｉｐｐ…     

克山病病区低硒儿童血小板GSH_(px)和SOD活性以及cAMP含量

本文对比测定了克山病病区与非病区儿童血小板GSH_(px)、SOD活性和cAMP水平,以及全血、红细胞、血浆和头发硒含量。结果表明,病区儿童血和发硒均明显低于非病区;血小板GSH_(px)活性比非病区儿童显著低下,但血小板SOD活性和cAMP水平无显著差异。提示病区低硒儿童血小板GSH_(px)活性的降低可能导致血小板功能和代谢的改变。     

黄芪预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的 探讨黄芪对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用及其机制.方法 采用结扎左冠状动脉的方法制备心肌缺血再灌注损伤动物模型.SD大鼠30只随机分为3组:对照组、缺血再灌注组(I/R)和黄芪预处理组(H+I/R).光镜和透射电镜下观察心肌病理变化,检测血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,以及心肌组织Na~+K~+-ATP酶(Na~+K~+-ATPase)、Ca~(2+)-ATP酶(Ca~(2+)-ATPase)活性.结果 ①黄芪预处理组光镜和透射电镜下心肌细胞变性坏死程度及心肌细胞超微结构形态改变较缺血再灌注组显著减轻;②黄芪预处理组大鼠血清中CK、LDH活性和MDA含量显著降低(P<0.05),SOD、Na+ K+-ATPase、Ca~(2+)-ATPase活性显著提高(P<0.05).结论 黄芪对大鼠冠状动脉结扎后再灌注心肌损伤具有明显的保护作用,其机制可能与改善心肌缺血再灌注冠状微循环与抗氧自由基生成、减轻钙超载等多种机制有关.     

卵巢早衰患者外周血T细胞亚群及SOD活性观察

作者观察了12例卵巢早衰(POF)病人外周血中T细胞亚群的变化,同时对10例患者进行了红细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性测定。发现患者T_3、T_4、及T_4/T_8比值均低于对照组,同时SOD活性降低。提示:POF患者T细胞增殖及分化功能受抑制,免疫调节紊乱,抗氧化能力低下。因此,测定T细胞亚群及SOD活性对POF的病因探讨及诊断、治疗有一定价值。