应用新底物ELISA检测尿中EHF相关抗原早期诊断流行性出血热(摘要)

<正> 用ELISA检测流行性出血热(EHF)患者尿中EHF相关抗原是早期诊断EHF的有效方法之一,但由于辣根过氧化物酶(HRP)的常规底物邻苯二胺(OPD)敏感性较差,故检测时需要将患者尿液做15～20倍浓缩,这样既费时费力,又因浓缩时要将患者尿液在常温下做较长时间的处理而损失部分抗原,且往往因     

酶联抗人IgG单克隆抗体与多克隆抗体测定PAIgG法的比较

作者应用辣根过氧化酶—抗人IgG单克隆抗体(HRP—McAb)和辣根过氧化酶—抗人IgG多克隆抗体(HRP—PcAb),在ELISA检测PAIgG影响因素的预试方面以及对一批正常人(N=34)和不同类型的血小板减少症患者(N=65)进行了PAIgG测定的比较,结果表明;HRP—McAb和HRP—PcAb在ELISA检测PAIgG法各预试条件方面多数相近似,二种试剂检测值间呈现较好的相关性(Y=0.689,P<0.0005)故在常规ELISA检测PAIgG法中可用HRP—McAb代替HRP—PcAb,以利实验方法的标准化。     

诊断脑囊虫病快速ELISA试验方法建立与常规ELISA比较

通过提高抗原抗体结合反应的孵育温度(41℃),以缩短孵育时间,建立起检测脑囊虫病血清抗体的快速 ELISA 试验方法。在此温度下,血清抗体的几何平均滴度为812.58,较之在39℃、43℃和45℃条件下明显增高,同时阳性和阴性血清的免疫比值也最高,表明41℃是囊虫抗原抗体结合反应的适合温度。在此温度下,抗原抗体结合反应的速度明显增快,经过15分钟即可达到充分结合。用快速 ELISA与常规 ELISA 两种方法对30份脑囊虫病人血清同步测试结果表明,快速 ELISA 的光吸收值普遍略高于常规 ELISA。这就表明,在脑囊虫病的血清抗体检测中,快速 ELISA 完全可取代常规 ELISA,它有着简便、快速、敏感性高等优点。     

直接ELISA法早期诊断肾综合征出血热

联合应用硫酸鱼精蛋白沉淀和蔗糖垫层超速离心,从感染鼠脑中纯化HFRSV抗原,纯化抗原用HRP标记,成功地建立了采用酶标记HFRSV抗原的IgM抗体捕捉ELISA法,即直接ELISA法,检测HFRS患者血清特异IgM抗体。与已报道的采用酶标记HFRSV IgG的IgM抗体捕捉ELISA法相比。二法敏感度相似,但直接ELISA法可减少一步免疫反应,并能完全避免类风湿因子的干扰。应用直接ELISA法检测临床诊断的HFRS患者血清87份,其中早期患者(1～5病日)血清37份,特异IgM抗体阳性检出率分别为96.5%和91.8%。我们认为酶标记抗原直接ELISA法为HFRS的早期诊断提供了更为特异、简便快速的新方法。     

IAA与HRP联合作用对人胰腺癌BXPC-3的细胞毒效应

目的　研究吲哚乙酸(IAA)与辣根过氧化物酶(HRP)在体外共同作用于人胰腺癌BXPC 3 细胞所产生的细胞毒效应。方法　MTT法测定IAA/HRP对BXPC 3细胞增殖的影响;流式细胞仪分析BXPC 3 细胞周期时相变化;胎盘兰(曲利本兰)排斥试验,研究IAA/HRP对BXPC 3 细胞死亡率的影响;原位细胞凋亡检测试剂盒检测IAA/HRP作用后BXPC 3细胞的凋亡。结果　IAA/HRP体外对BXPC 3 细胞有抑制生长的效应,且这种效应有浓度和时间依赖性;BXPC 3细胞在IAA/HRP作用48 h后细胞周期被阻滞在G1期和G2期;IAA/HRP作用72 h后对照组和药物组的凋亡细胞数存在着显著性差异,且凋亡细胞数有浓度依赖性。结论　IAA/HRP对胰腺癌BXPC 3 细胞有细胞毒作用,可体外抑制细胞的增殖,诱导凋亡。     

乙型肝炎IgA型HBsAg循环免疫复合物的研究(摘要)

<正> 近年来,对IgM、IgG型HBsAg循环免疫复合物的研究文献较多,但尚未见到有关IgA型HBsAg—CIC的报道。本文建立了以羊IgG抗人IgA作为包被抗体,以HRP—抗HBs作为指示抗体检测HBsAg/IgA—CIC的HLISA捕捉法。操作过程为:以羊IgG抗人IgA包被反应板各孔,依次加入1:10稀释的待检血清标本,ERP—EHBs和底物溶液,硫酸阻断后测OD值。以等于或大于阴性对照2.1倍为阳性。经阻断试验、中和试验、替代试验、重复性试验和对不同Ag/Ab比例的人工HBsAg/IgA免疫复合物的检测证明,本法特异     

酶联免疫吸附试验检测流行性出血热患者IgM抗体报告

本文介绍一种检测EHF特异性IgM抗体的ELISA间接法,在临床诊断应用中分别对耳血及静脉血清进行了平行检查,并与IFAT法进行了比较。结果表明:19例临床诊断为EHF患者耳血中ELISA—IgM阳性率为100％(19/19),IFAT—IgM阳性率为89.47％(17/19),且ELISA耳血IgM抗体滴度>IFAT耳血IgM抗体滴度者为68.47％(13/19)。实验发现,耳血ELISA—IgM抗体滴度明显高于静脉血清ELISA—IgM抗体滴度4倍者占73.68％(14/19)。作者认为,该方法特异性、敏感性较好,操作简便,只需要采用耳血就可以达到早期,快速诊断目的,值得推广使用。     

血清胃泌素释放肽前体和神经元烯醇化酶在小细胞肺癌早期诊断中的价值及其相关性

目的探讨胃泌素释放肽前体(progastrinreleasingpeptide,ProGRP)和神经元烯醇化酶(neuronspecificenolase,NSE)在小细胞肺癌(smallcelllungcancer,SCLC)早期诊断中的作用及两种标志物之间的相关性。方法分别应用双抗体夹心ELISA法和电化学发光免疫法测定了63例SCLC、41例良性肺疾病及40例非小细胞肺癌(nonsmallcelllungcancer,NSCLC)患者血清中ProGRP和NSE的水平。结果单个检测ProGRP、NSE及联合检测ProGRP和NSE(ProGRP+NSE)诊断SCLC的特异性分别为88.89%、80.25%及66.67%,敏感性分别为73.02%、63.49%及84.13%;NSCLC中ProGRP和NSE的敏感性分别为12.5%和22.50%;ProGRP+NSE诊断SCLC的敏感性明显高于NSE(P<0.01),但和ProGRP相比,两者差异无显著性(P>0.05);NSE诊断早期SCLC的敏感性仅36.84%,ProGRP及ProGRP+NSE诊断早期SCLC的敏感性分别为63.16%和73.68%,和晚期SCLC(分别为77.27%及88.64%)相比,均无显著性差异(P>0.05);在SCLC中,ProGRP和NSE的相关性较强(χ2=5.00,P<0.05)。结论NSE对SCLC早期诊断价值有限;ProGRP及ProGRP+NSE可能是肺癌分型及SCLC诊断,尤其是早期诊断的较好指标。     

ABC—ELISA法检测自身免疫性甲状腺病患者TRAb的研究

本文叙述了在自身免疫性甲状腺病TRAb检测中引入一种新方法-ABC-ELISA法的研究过程。并将该法与常规ELISA法的检测灵敏度作了比较,用FRTL-5细胞测定TSAb的方法鉴定了该法的可靠法。未治甲亢用ABC—ELISA法测TRAb的阳性率91%,用常规ELISA法测TRAb阳性率70%,用FRTL-5细胞检测了未治甲亢中26例的TSAb所得结果与ABC法相同。据此,作者认为ABC—ELISA是一种敏感性高、重复性好、简便、适用于临床的方法。     

血清抗Hp-IgG检测及其临床意义

用 ELISA法测定了 1 77例幽门螺杆菌 (Helicobacter pylori,Hp)感染性胃十二指肠疾病和非 Hp感染性疾病患者血清抗 Hp- Ig G。结果 :敏感性和特异性分别为 91 .7%和 89.8% ,与快速尿素酶试验和组织学检查无显著性差异 (P >0 .0 5)。动态监测抗 Hp- Ig G阳性患者“三联治疗”后 3、6和 1 0个月 ,发现 Hp治疗成功率分别为 9.92 %、68.70 %和 92 .36%。提示血清 Hp- Ig G检测敏感性高 ,特异性强 ,简便易行 ,可作为消化不良患者内镜检查前筛选及抗 Hp疗效观察指标。     

用~(32)pHBV DNA探针从慢性携带者尿中检出HBV DNA的初步报告

本实验应用~(32)pHBV DNA 探针,从4例慢性携带着尿经200,000×g12小时超迷离心,浓缩100倍处理,检出1例 HBV DNA 阳性,初步证实了携带者尿中排出 HBV DNA,提示 HBV 有可能经携带者尿液传染,为进一步探讨乙肝的传播途径提供新的实验手段。同时亦证明了超速离心浓缩尿液标本进行 HBV DNA检测是可行的。     

INHIBITION AND RADIATION SENSITIZING EFFECT OF INDOLEACETIC ACID COMBINED WITH HORSERADISH PEROXIDASE ON HELA CELLS

Indoleaceticacid (IAA )isagrowthhormoneforplants.ResearchinrecentyearshasshownthatIAApresentsacytotoxiceffectonhumancancersaf teritisoxidizedbyhorseradishperoxidase (HRP) .Becauseoflowtoxicityandstrongeffectonanaero biccells ,ithasattractedpeople sattentionasapro drugfortargettreatmentofcancers .ItsmechanismmightberelatedwiththefactthatIAAisoxidizedinthecellsofthelivingbodytoproducefreeradi cals.Theanaerobiccellgroupsincancersareoneofthemaincausesforradiationresistance .Therehavebeenfewr…     

小儿乙型肝炎相关性肾炎24例报告

乙型肝炎相关性肾炎,有逐年增多的趋势.本文收集1979～1984年的乙型肝炎肾炎24例,其临床表现及主要实验室资料,均支持诊断。乙型肝炎常表现为肝外损害,有时成为首发病征或综合征:如肾小球肾炎、心肌炎、关节炎、胃肠炎或血清病等。乙型肝炎肾炎也是免疫复合物性肾炎之一,其病因与慢活肝有关,与患儿的免疫功能障碍亦有关。常采用综合治疗,保护肝脏;免疫兴奋治疗,如输血或血浆,胸腺素或左旋咪唑等,均可获得较好的效果。     

流行性出血热患者尿中病毒抗原的观察

本文报道了采用ELISA双夹心法、ELISA阻断试验、沉淀试验、SPA协同凝集试验、补体结合试验检测流行出血热(EHF)患者尿中流行性出血热病毒(EHFV)抗原;并用免疫电镜观察了尿中流行性出血热病毒形态;用尿中流行性出血热病毒抗原免疫家兔观察了其免疫源性。实验表明:①用ELISA双夹心法检测EHF患者尿抗原,早期检出率高、重复性好、特异性强,较上述其它检测尿抗原的方法好。②上述多种方法均证明EHF患者尿中确有EHFV抗原排出。③该EHFV抗原还具有一定的免疫源性。提示:ELISA双夹心法适用于EHF临床诊断及流行病学调查。     

间接法和捕捉法检测特异性IgM的敏感性与特异性的比较

目的比较捕捉法和间接法检测IgM时的特异性和敏感度差异,并探讨其产生差异的原因。方法分别用间接ELISA法和捕捉ELISA法检测活动性乙型肝炎和肾综合征出血热(HFRS)患者标本的IgM水平,并比较两者之间检出率、检测阈值、特异性的差异。结果检测稀释在PBS中的鼠抗IgM特异性抗体,两种方法的特异性和敏感度类似;检测活动性乙型肝炎和HFRS患者标本,间接法检测IgM的敏感度明显低于捕捉法;检测经二巯基乙醇处理后乙肝组和HFRS组标本,两种检测均为阴性,表明两种方法都具有针对IgM抗体的型特异性;交叉实验结果证明两种检测IgM的试剂均具有针对抗原的特异性。结论急性感染疾病的早期诊断、病毒的潜伏期感染和慢性感染的再次激活应使用捕捉法检测IgM,间接法检测IgM用于急性感染性疾病的诊断有待进一步探讨。     

HBeAg特异免疫复合物检测及临床意义

采用单克隆抗－ＨＢｅ固相ＥＬＩＳＡ法检测１１８例ＨＢＶ感染者血清中ＨＢｅＡｇ特异免疫复合物（ＨＢｅＡｇ／ＩＣ），结果表明∶ＨＢｅＡｇ／ＩＣ与ＨＢＶ复制相关，可作为ＨＢＶ复制的一种血清学标志，ＨＢｅＡｇ阴性、ＨＢＶＤＮＡ阳性者中，６２．２％患者ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性，提示ＨＢｅＡｇ／ＩＣ的形成致使夹心法不能检出ＨＢｅＡｇ，这类患者仍可以是ＨＢＶ野毒株感染，并非均为ＨＢｅＡｇ缺陷变异株感染；ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性血清ＡＬＴ异常率明显高于ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阴性血清（Ｐ＜０．０１），提示ＨＢｅＡｇ／ＩＣ存在与肝损伤有关。     

家兔生殖腺及三阴交穴区的传入神经的节段性分布——HRP法及荧光双标法研究

本实验用HRP、EB、TY三种不同浓度水溶液, 注入成年家兔生殖腺浆膜下和三阴交穴区。HRP、EB、TY借内脏与躯体传入神经的摄取和逆行传送;用~3H—亮氨酸注入成年猫胸腰段脊神经节,借顺行传送来验证。用上述三种方法追踪在脊神经节中显示了生殖腺与三阴交穴区传入神经起源的胞体及节段性分布,观察到二者在脊神经节的重合区。结果表明:1.睾丸的传入神经的标记细胞多分布于脊神经节T_(11)～L_4。2.卵巢的传入神经的标记细胞多分布于T_(10)—L_4。3.三阴交穴区的传入神经的标记细胞多分布于L_4～S_3。4.生殖腺与三阴交穴区的传入神经标记细胞在脊神经节的重合区为T_7～L_7。另外,对HRP法、荧光双标记法、ARG法的应用,一些内脏器官与体表穴区的传入神经的节段性及其重合区进行了讨论。