应用McAb与PcAb致敏血球检测HBsAg

<正> 自1983年国内就开始应用血清抗—HBsAg 单克隆体检测HBsAg,但多采用放射免疫试验(RIA)与酶联免疫吸附试验(ELISA)等,应用McAb 反向被动血凝试验(简称McAb RPHA)的报道尚少,我们采用McAb RPHA,并与常规的多克隆抗体反向被动血凝试验(简称PcAb RPHA)同时对384例病毒性乙型肝炎患者血清进行了对比,所用的抗—HBs/α和抗—HBsd 两种McAb 的致敏血球与PcAb 致敏血球     

应用酶标F(ab′)2结合物消除EHF-IgM-ELISA检测中类风湿因子的干扰(摘要)

<正> 采用免疫荧光和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测特异性IgM早期诊断流行性出血热(EHF),其缺点是易受类风湿因子(RF)干扰而出现假阳性。有人试图以热凝聚IgG及乳胶结合IgG吸附血清中的RF或用抗人IgM(μ—链)作为固相包被抗体消除其影响,但效果均不理想。本文采用Duermeyer等所建立的酶标F(ab′)_2结合物ELISA检测EHF-IgM抗体技术具有两大优点:(1)通过固相抗人IgM将IgM从待检血清中分离出来;(2)使用抗EHFV—IgG—F(ab(?))_2结合物以消除RF的干扰。本文用酶标F(ab(?))_2 IgM—ELISA及传统IgM—ELISA法平行检测15例RF阳性血清(无EHF—IgM)结果证实上述论点。作者将一     

一种高敏感度的辣根过氧化物酶新底物用于ELISA检测乙型肝炎表面抗原

本文介绍3.3'、5.5'—四甲基联苯胺(TMB)作为辣根过氧化物酶(HRP)的底物应用于ELISA检测乙型肝炎表面抗原(HB_sAg)。TMB敏感性高、反应产色鲜明、本底反应低、终止后稳定,用于检测HB_sAg的ELISA系统,使敏感性比目前最常用的底物邻苯二胺(OPD)提高了8～16倍。TMB是一个比较理想的HRP底物,用于检测HB_sAg的ELISA系统可以提高阳性检出率,有一定的实用价位。     

乙型肝炎IgA型HBsAg循环免疫复合物的研究(摘要)

<正> 近年来,对IgM、IgG型HBsAg循环免疫复合物的研究文献较多,但尚未见到有关IgA型HBsAg—CIC的报道。本文建立了以羊IgG抗人IgA作为包被抗体,以HRP—抗HBs作为指示抗体检测HBsAg/IgA—CIC的HLISA捕捉法。操作过程为:以羊IgG抗人IgA包被反应板各孔,依次加入1:10稀释的待检血清标本,ERP—EHBs和底物溶液,硫酸阻断后测OD值。以等于或大于阴性对照2.1倍为阳性。经阻断试验、中和试验、替代试验、重复性试验和对不同Ag/Ab比例的人工HBsAg/IgA免疫复合物的检测证明,本法特异     

丙型肝炎病原学检测的临床应用效果评价

目的　了解我国丙型肝炎病毒感染的病原学诊断现状 ,探讨合理有效的临床应用模式。方法　用酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测抗HCV抗体 ,用荧光定量反转录聚合酶链式反应 (FQRT PCR)技术定量检测HCV RNA ,用速率法检测ALT水平。结果　 188份抗HCV IgG阳性标本中 10 3份HCV RNA阳性 (大于 10 3 拷贝·mL-1) ,阳性率 5 4 .7% ;10 7份HCV RNA阳性标本中 ,有 4份抗HCV IgG阴性 (3.7% ) ,二者一致率 6 9.8% ,不一致率 30 .2 % ;HCV RNA载量与ALT水平无明显相关性。结论　用ELISA检测抗HCV IgG筛查丙肝病人会有 3.7%的病毒血症者漏检 ,且有 4 5 .2 %的假阳性 (无传染性 ) ;用抗HCV IgG阳性加ALT升高作为诊断丙型肝炎现症患者价值有待探讨 ;抗HCV IgG的出现与否与HCV RNA载量无关。     

应用新底物ELISA检测尿中EHF相关抗原早期诊断流行性出血热(摘要)

<正> 用ELISA检测流行性出血热(EHF)患者尿中EHF相关抗原是早期诊断EHF的有效方法之一,但由于辣根过氧化物酶(HRP)的常规底物邻苯二胺(OPD)敏感性较差,故检测时需要将患者尿液做15～20倍浓缩,这样既费时费力,又因浓缩时要将患者尿液在常温下做较长时间的处理而损失部分抗原,且往往因     

IAA与HRP联合作用对人胰腺癌BXPC-3的细胞毒效应

目的　研究吲哚乙酸(IAA)与辣根过氧化物酶(HRP)在体外共同作用于人胰腺癌BXPC 3 细胞所产生的细胞毒效应。方法　MTT法测定IAA/HRP对BXPC 3细胞增殖的影响;流式细胞仪分析BXPC 3 细胞周期时相变化;胎盘兰(曲利本兰)排斥试验,研究IAA/HRP对BXPC 3 细胞死亡率的影响;原位细胞凋亡检测试剂盒检测IAA/HRP作用后BXPC 3细胞的凋亡。结果　IAA/HRP体外对BXPC 3 细胞有抑制生长的效应,且这种效应有浓度和时间依赖性;BXPC 3细胞在IAA/HRP作用48 h后细胞周期被阻滞在G1期和G2期;IAA/HRP作用72 h后对照组和药物组的凋亡细胞数存在着显著性差异,且凋亡细胞数有浓度依赖性。结论　IAA/HRP对胰腺癌BXPC 3 细胞有细胞毒作用,可体外抑制细胞的增殖,诱导凋亡。     

ABC检测HBSAg和EHFV抗原的方法建立和应用

<正> ABC法是将生物素—抗生物素系统与免疫酶系统结合而建立的一种新的免疫学技术。我们采用生物素酰-N-羟基丁二酰亚胺分别对抗HBs、羊抗免IgG和HRP进行标     

分泌抗HSV—2型特异McAb的B_5杂交瘤细胞株的建立和初步应用

本文应用小鼠骨髓瘤细胞SP2/0—Ag14与用HSV—2 SaV株病毒免疫的BALB/C小鼠脾细胞融合,建立了一株分泌特异性抗HSV—2病毒的单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株。冻存20个月后复苏传代,仍能稳定分泌McAb。经ELISA间接法检测,该细胞培养上清滴度为1∶120,制备腹水的滴度为10~(-7),定名为B_5细胞株。B_5细胞的染色体数目为92～101,B_5McAb经鉴定属于IgG_1亚类,与HSV—2有高效价的结合反应,而与HSV-1、CMV、EHFV、Ad_3、RSV_(1387)等病毒不发生反应。应用微量细胞培养中和试验.鸡胚绒毛尿囊膜中和试验和家兔皮内感染HSV—2病毒保护试验证明,B_5McAb在试管内或机体内(兔)都能中和HSV—2病毒。B_5McAb与临床分离的19株HSV-2病毒中的14株起反应,鉴定符合率为73.6%、与5株HSV—1病毒株都不起反应。     

直接ELISA法早期诊断肾综合征出血热

联合应用硫酸鱼精蛋白沉淀和蔗糖垫层超速离心,从感染鼠脑中纯化HFRSV抗原,纯化抗原用HRP标记,成功地建立了采用酶标记HFRSV抗原的IgM抗体捕捉ELISA法,即直接ELISA法,检测HFRS患者血清特异IgM抗体。与已报道的采用酶标记HFRSV IgG的IgM抗体捕捉ELISA法相比。二法敏感度相似,但直接ELISA法可减少一步免疫反应,并能完全避免类风湿因子的干扰。应用直接ELISA法检测临床诊断的HFRS患者血清87份,其中早期患者(1～5病日)血清37份,特异IgM抗体阳性检出率分别为96.5%和91.8%。我们认为酶标记抗原直接ELISA法为HFRS的早期诊断提供了更为特异、简便快速的新方法。     

家兔内关穴区感觉及运动神经元节段性分布 (辣根过氧化物酶(HRP)法研究)

用辣根过氧化物酶(HRP)法研究了8例家兔内关穴区感觉及运功神经的来源。发现在注射侧的C_5—T_1脊神经节和C_7—T_1脊髓内有标记细胞,且标记细胞以C_8和T_1为最集中。在脊髓内,标记细胞位于前角外侧区或前角与侧角交界区(Ⅷ和Ⅸ层);在脊神经节内,标记细胞主要位于周缘区(占47.27%)。另外,还讨论了穴位相对特异性与穴区感觉及运动神经元的分布节段及其分布节段集中性的关系。     

INHIBITION AND RADIATION SENSITIZING EFFECT OF INDOLEACETIC ACID COMBINED WITH HORSERADISH PEROXIDASE ON HELA CELLS

Indoleaceticacid (IAA )isagrowthhormoneforplants.ResearchinrecentyearshasshownthatIAApresentsacytotoxiceffectonhumancancersaf teritisoxidizedbyhorseradishperoxidase (HRP) .Becauseoflowtoxicityandstrongeffectonanaero biccells ,ithasattractedpeople sattentionasapro drugfortargettreatmentofcancers .ItsmechanismmightberelatedwiththefactthatIAAisoxidizedinthecellsofthelivingbodytoproducefreeradi cals.Theanaerobiccellgroupsincancersareoneofthemaincausesforradiationresistance .Therehavebeenfewr…     

两种酶结合物对棘球蚴三种抗原特异性及敏感性的检测比较

对９４例包虫病患者、４４例非包虫病患者及５０例健康人血清,用羊源林球蚴囊液、原头蚴及生发层抗原,分别进行了酶联金葡菌Ａ蛋白点免疫及酶标记单抗人ＩｇＧ点免疫试验,其结果显示：前者对三种抗原的敏感性分别为９４．７％、９５．７％和９６．８％;后者分别为９２．６％、９３．６％和９３．６％。前者的特异性分别为８１．９％、９２．６％和９２．６％;后者分别为８７．２％、９１．５％和９１．５％。酶联金葡菌Ａ蛋白点免疫除了林球蚴囊液抗原的特异性低于酶标羊抗人ＩｇＧ点免疫外,原头蚴抗原、生发展抗原的特异性和三种抗原的敏感性均比后者高。     

用RT—PCR扩增人谷胱甘肽过氧化物酶的cDNA

本文应用反转录-聚合酶链反应成功的扩增了人谷胱甘肽过氧化物酶的互补脱氧核糖核酸(cDNA)。该法首先从人肝癌细胞中提取信使核糖核酸,在反转录酶的作用下生成cDNA,以此CDNA作为PCR的模板,利用人工合成的两个特异引物,进行35次循环的扩增。电泳结果表明,扩增片段的大小约为600 bp,与文献结果一致,为该酶基因的表达及生产奠定了基础。     

免疫酶染IgM检测法早期诊断流行性出血热的研究

本实验重点以免疫酶染检测了37例临床确诊EHF患者双份血清中的IgM抗体并与IFA—IgG抗体法进行了对比,所查37例EHF患者中2例早晚期血清免疫酶染IgM及FA—IgG抗体均为阳性,其余35例早期血清IgM抗体阳性检出率明显高于IFA—IgG法;晚期血清二种方法阳性检出率及阳性检出符合率为100%。阻断试验及2—ME耐性试验显示免疫酶染法检出的抗体系特异性IgM;该抗体可在发病第二日出现,整个病程均能检出。实验结果表明,免疫酶染IgM抗体技术敏感性高,特异性强,仅需要光学显微镜,观察清晰,便于基层人员使用。     

桥本氏甲状腺炎的过氧化物酶免疫组织化学研究

用免疫组化方法观察30例桥本氏甲状腺炎过氧化物酶的分布及改变。甲状腺过氧化物酶(TPO)在桥本氏甲状腺炎的阳性率及相对含量都明显低于甲亢及正常对照组。TPO阳性见于散在的小滤泡及小细胞团。桥本氏甲状腺炎TPO明显减少和碘有机化障碍有关,TPO减少的主要原因是滤泡细胞受损。     

RELATIONSHIP BETWEEN CYTOMEGALOVIRUS INFECTION AND THE PRODUCTION OF AN TICARDIOLIPIN ANTIBODY IN RENAL TRANSPLANT RECIPIENTS

Ｔｈｅｉｎｆｅｃｔｉｏｎｏｆｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ(ＣＭＶ )ｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｍｏｓｔｓｅｒｉｏｕｓｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓａｆｔｅｒｒｅｎａｌｔｒａｎｓ ｐｌａｎｔａｔｉｏｎ[1] .ＭｏｓｔｂｅｌｉｅｖｅｔｈａｔＣＭＶｉｎｆｅｃｔｉｏｎｎｏｔｏｎｌｙｃａｎｉｎｄｕｃｅａｃｕｔｅｒｅｊｅｃｔｒｅａｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅｔｒａｎｓｐｌａｎｔ ,ｂｕｔａｌｓｏｐｌａｙｓａｒｏｌｅｉｎｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｒｅｌａｔｅｄａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ[2 ] .Ａｓａｒｅｓｕｌｔ ,ｉｔａｆｆｅｃ…     

高效液相色谱法测定胆汁中结合胆汁酸

报道反相高效液相色谱法测定人胆汁中结合胆汁酸,样品处理手续简便,因为色谱系统使用了保护柱。回收率范围是87.01%～110.75%,检出限为0.09～0.21μg,用本方法分析胆石症患者及对照组胆汁结合胆汁酸。