肾综合征出血热患者血小板的超微结构与功能的关系

目的　探讨肾综合征出血热 (HFRS)患者早期循环中血小板超微结构与功能变化的关系。方法　动态检测 5 0例HFRS患者的血小板计数 (BPC ,直接试管法 )、血小板黏附率 (PAdT ,玻珠柱法 )、血小板聚集率 (PAgT ,比浊法 ) ,并运用透射电镜技术对 8例早期患者循环中血小板的超微结构进行观察。结果　HFRS患者早期即有大量血小板变性、空泡化、膜裂解、颗粒物质减少 ,在异常的血小板内可见到特征性的汉坦病毒颗粒 ;此外 ,HFRS病程各期血小板的数量和功能均有规律性的改变 ;自发热期 ,HFRS患者BPC、PAdT、PAgT逐渐降低 ,至低血压休克、少尿期 ,以上改变达顶峰 ,从多尿期开始逐渐恢复 ,至恢复期接近正常。对不同病型的患者 ,以上各指标有显著差异 (P <0 .0 1)。结论　HFRS早期病毒侵入与血小板超微结构、功能改变有其相关性。     

流式细胞仪测定血小板胞浆游离钙浓度

目的建立流式细胞仪测定血小板胞浆游离钙离子浓度[Ca2+]i的方法。方法用Fluo 3-AM作为钙指示剂,在有或无细胞外钙[Ca2+]o存在的条件下,测定静息和凝血酶激活状态下人血小板胞浆游离钙离子浓度[Ca2+]i的变化。结果Fluo 3-AM标记的血小板的平均荧光强度明显增加。凝血酶使负载Fluo 3-AM标记的血小板胞浆[Ca2+]i明显增加,且显示剂量依赖和对[Ca2+]o的依赖。结论凝血酶引起血小板胞浆[Ca2+]i增加的来源主要是[Ca2+]o,可能也有部分是内钙释放的参与。     

H_2O_2诱导SD大鼠视网膜细胞凋亡过程中细胞内钙离子浓度的变化

目的观察H2O2诱导原代培养SD大鼠视网膜细胞凋亡过程中细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)的变化及其来源。方法取1~3d内新生SD大鼠视网膜进行原代细胞培养,以100μmol/L H2O2作用0、2、4、8、12、24h,采用MTT法进行细胞活力检测,应用Hoechst 33342染色法进行细胞凋亡检测,以Fluo-3AM为细胞内Ca2+探针并利用荧光激活细胞分类技术(FACS)进行[Ca2+]i检测,确定H2O2诱导细胞损伤及凋亡过程中[Ca2+]i的变化;应用细胞外Ca2+螯合剂EGTA初步检测H2O2诱导的[Ca2+]i变化是否源于细胞外Ca2+内流。结果 100μmol/L H2O2可诱导原代培养的SD大鼠视网膜细胞发生凋亡,且凋亡数目呈时间依赖性递增;100μmol/L H2O2作用2~24h均可显著降低细胞活力,而[Ca2+]i的升高出现在H2O2作用2h且维持至12h,然后逐渐下降,至24h恢复至正常水平;0.5~5mmol/L EGTA可显著削弱由100μmol/L H2O2作用2h导致的[Ca2+]i增加。结论在H2O2诱导原代培养的SD大鼠视网膜细胞发生凋亡过程中,[Ca2+]i的升高发生在凋亡的早期阶段,而非细胞凋亡全过程中;H2O2的损伤作用所导致的[Ca2+]i升高部分来源于细胞外Ca2+的内流。     

血清nCa2+含量在肾综合征出血热中的动态变化

目的 研究血清离子钙(nCa２＋)在肾综合征出血热(HFRS)中的变化规律及在发病中的作用。方法 用离子选择电极法检测了46例HFRS患者不同病期血清nCa２＋含量,并将nCa２＋与血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)做相关分析。结果 HFRS患者在低血压休克期和多尿期时血清nCa2＋含量降低(P＜0..05),以少尿期最为显著(P＜0..01)。而且随病情加重,结果依次降低,危重型患者整个多尿期也明显降低。血清nCa２＋含量与BUN、Cr呈负相关(P＜0.01)。结论 血清nCa２＋参与发病过程,与病情轻重和肾功状态密切相关。     

血清nCa2+含量在肾综合征出血热中的动态变化

目的研究血清离子钙在肾综合征出血热(HFRS)中的变化规律及在发病中的作用。方法用离子选择电极法检测了46例HFRS患者不同病期血清含量，并将与血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)做相关分析。结果HFRS患者在低血压休克期和多尿期时血清含量降低(P＜0．05)，以少尿期最为显著(P＜0．01)。而且随病情加重，结果依次降低，危重型患者整个多尿期也明显降低。血清含量与BUN、Cr呈负相关(P＜0．01)。结论血清参与发病过程，与病情轻重和肾功状态密切相关。     

内皮素-1对体外培养的牛眼小梁细胞内钙离子浓度的影响

目的了解内皮素-1(ET-1)对小梁细胞收缩状态调节的作用方式,以求探索新的有效而不良反应小的抗青光眼药物。方法通过组织块培养的方法获得三代牛眼小梁细胞,Fulo-3/AM负载后于激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)下动态扫描不同浓度ET-1作用后胞内荧光强度变化,得出[Ca2+]i值。结果10-9、10-8、10-7mol/L ET-1可使小梁细胞[Ca2+]i呈剂量依赖性升高,其中10-8mol/L的ET-1可使小梁细胞[Ca2+]i由327.5±24.57升高至373.60±40.18(n=8,P<0.01)。结论一定浓度的ET-1可通过收缩小梁网而致眼内压升高;其受体阻滞剂或转换酶抑制剂可能为原发性开角型青光眼的治疗开辟新途径。     

肾综合征出血热患者血清汉滩病毒核蛋白和糖蛋白G_2抗体检测及其临床意义

用汉瘫病毒单克隆抗体L133、L13F3、LV48A和LV28B为包被抗体，以其酶标物为指示抗体，建立了分别检测汉滩病毒核蛋白抗体（NPAb）和包膜糖蛋白G2抗体（G2Ab）的抗体阻断酶联免疫吸附试验，用该法对65例肾综合征出血热（HFRS）患者的291份血清标本进行了检测．NPAb的阳性率在2～3病日和8～9病日分别为90％和100％。NPAb的滴度在HFRS的发热期升高，低血压和少尿期达高峰。提示NPAb可能是与HFRS的免疫病理损伤有关的重要成份，而且检测NPAb可能有助于HFRS的早期诊断。G2Ab的阳性率和滴度在前三期，即发热、低血压和少原期均…     

流行性出血热肾素—血管紧张素——醛固酮系统的临床研究

我们在1981年初步观察流行性出血热(EHF)各期血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)水平的基础上,于1984年又对肾素—血管紧张素—醛固酮系统(RAAS)各组成分—血管紧张素Ⅰ(ATⅠ)、ATⅡ、醛固酮(ALD)的血浆含量进行了系统观察。54例患者ATⅡ从发热期开始升高,低血压及少尿期达高峰,多尿期后逐渐下降;ATⅠ各期均减低,低血压及少尿期最明显;ALD在低血压及少尿期与ATⅡ相应地增高。以上改变与病情轻重及尿素氮相平行。实验结果进一步证实RAAS与EHF休克及急性肾功能衰竭的发病有重要联系,故早期稳定体液平衡并拮抗RAAS激活及其影响。是EHF治疗的重要关键。     

肾综合征出血热患者血浆心房利钠因子含量的变化及其意义

本文应用特异性的心房利钠因子(ANF)抗体,测定了20例健康人和51例肾综合征出血热(HFRS)患者血浆ANF含量。结果表明,健康人血浆ANF含量与HFRS患者有显著性差异HFRS组中,除恢复期外,各期ANF均升高,其中以少尿期最突出;ANF的血浆浓度与病情轻重有一定关系,提示血浆ANF含量的变化与肾功能损害程度有很大关系。     

恒磁场对人脐动脉血管平滑肌细胞胞浆游离钙离子浓度的影响

目的 研究恒磁场对培养的人脐动脉血管平滑肌细胞(VSMC)胞浆内游离钙离子浓度([Ca2 ]i)的影响,探讨恒磁场抑制VSMC增殖的作用机制.方法 离体培养人脐动脉VSMC,不同强度的恒磁场垂直作用于VSMC,应用激光共聚焦显微镜观察恒磁场对VSMC胞浆[Ca2 ]i的影响.结果 5 mT的恒磁场作用于VSMC后10-50 min[Ca2 ]i较对照组明显下降,20 min下降最明显;其平滑肌细胞的Ca2 荧光强度明显弱于对照组,至60 min接近对照组.结论 恒磁场对VSMC胞浆[Ca2 ]i有明显降低作用,可能是抑制VSMC细胞增殖的机制.为经皮冠状动脉成型术(PTCA)术后再狭窄的治疗提供了新的理论基础.     

肾综合征出血热患者白细胞介素-6的动态变化及意义

用双抗体夹心ELISA法检测36例肾综合征出血热102份系列血清中IL－6含量，发现患者血清IL－6含量在6病日前及发热低血压期均高于正常；6病日达高峰，7病日开始下降；发热期明显升高，少尿期达峰值；IL－6含量在轻、中、重及危重型患者之间有明显差异；IL－6与尿蛋白在含量间明显正相关。提示IL－6含量变化与病程进展一致，是引起肾病综合征出血热病理损伤的重要因素之一；且与病情轻重密切相关，可一定程度判定患者预后和转归，反映肾损伤程度。     

CLINICAL SIGNIFICANCE OF DETECTING SERUM ANTIBODIES TO NUCLEOPROTEIN AND GLYCOPROTEIN G_2 OF HANTAAN VIRUS IN PATIENTS WITH HEMORRHAGIC FEVER WITH RENAL SYNDROME

Hantaanvirus,theetiologicagentofhemorrhagicfeverwithrenalsyndrome(HFRS),canleadtoaseveretypeofHFRSandbelongstothegenusHantavirusofthefamilyBunyaviridae.ThegenomeofHantannvirusconsistsofthreesegmentsL,MandSrespectivelyencodingpolymerase,membraneglycoproteinG,andG,andnucleoproteinofthevirus.Inthepresentpaper,serumantibodiestonecleoprotein(NPAb)andglycoproteinG,(G,Ab)ofHantaanvirusinpatientswithHFRSweredynamicallydeterminedusingantibodyblockingenzymelinkedimmunosorbentassays(B--ELISA…     

DETERMINATION OF URINE TUMOR NECROSIS FACTOR, IL-6, IL-8 AND SERUM IL-6 IN PATIENTS WITH HEMORRHAGIC FEVERS WITH RENAL SYNDROME

Objective To explore the roles of cytokines in the pathogenesis of hemorrhagic fever with renal syndrome（HFRS）. Methods Double-antibody sandwich ELISA was used to determine serum interleukin （IL）-6, urine tumor necrosis factor （TNF）, IL-6 and IL-8 levels in 56 patients with HFRS. Results Serum IL-6, urine TNF, IL-6 and IL-8 concentrations in HFRS patients were significantly higher than those in control group, respectively （P〈0. 001）. The concentrations increased at fever stage, then continued to increase during hypotension stage and peaked at oliguria stage. The concentrations of serum IL-6, urine TNF, IL-6 and IL-8 increased in accord with the severity of the disease and differed greatly among different types of the disease. Serum IL-6 had remarkable relationships with serum specific antibodies. It was positively related to serum β2 -microglobulin （β2 -MG）, blood ureanitrogen （BUN） and creatinine （Cr）. Significant positive relationships were also found both between urine IL-6 and TNF, and between IL-6 and IL-8 （r=0.5768, P〈0.05; r=0. 3760, P〈0.01）. Conclusion TNF, IL-6 and IL-8 activated during the course of the disease. IL-6 is associated with the immunopathological lesions caused by the hyperfunction of humoral immune response. IL-6, IL-8 and TNF are involved in the renal immune impairment. Determining them might, in certain extent, be used in predicting the prognosis and outcome of patients with HFRS.     

STUDIES ON DYNAMIC CHANGES AND COMPARISONS OF SERUM SPECIFIC IGM AND IGG ANTIBODIES IN PATIENTS WITH HEMORRHAGIC FEVER WITH R

ＬｉｕＺｈｅｎｇｗｅｎ（刘正稳）；ＺｈａｎｇＣｈｅｎｇｗｅｎ（张成文）；ＬｉｕＱｉｎｇｚｈｅｎ（刘清珍）；ＨａｎＳｕｘｉａ（韩苏夏）；ＷｕＳｕｇｅ（吴素歌）ＳＴＵＤＩＥＳＯＮＤＹＮＡＭＩＣＣＨＡＮＧＥＳＡＮＤＣＯＭＰＡＲＩＳＯＮＳＯＦＳＥＲＵＭＳＰＥ...     

直接ELISA法早期诊断肾综合征出血热

联合应用硫酸鱼精蛋白沉淀和蔗糖垫层超速离心,从感染鼠脑中纯化HFRSV抗原,纯化抗原用HRP标记,成功地建立了采用酶标记HFRSV抗原的IgM抗体捕捉ELISA法,即直接ELISA法,检测HFRS患者血清特异IgM抗体。与已报道的采用酶标记HFRSV IgG的IgM抗体捕捉ELISA法相比。二法敏感度相似,但直接ELISA法可减少一步免疫反应,并能完全避免类风湿因子的干扰。应用直接ELISA法检测临床诊断的HFRS患者血清87份,其中早期患者(1～5病日)血清37份,特异IgM抗体阳性检出率分别为96.5%和91.8%。我们认为酶标记抗原直接ELISA法为HFRS的早期诊断提供了更为特异、简便快速的新方法。     

血液净化对肾综合征出血热炎症介质的清除作用

目的　通过观察连续性肾替代治疗 (CRRT)对肾病综合征出血热 (HFRS)患者肿瘤坏死因子α(TNF α)、白介素 6(IL 6 )及内皮素 1(ET 1)的清除作用 ,探讨炎症介质在HFRS中的作用。方法　将诊断为HFRS的中型及以上类型患者 4 0例随机分为两组 :CVVH组 2 0例行CVVH ,HD组 2 0例行HD。用ELISA法检测TNF α和IL 6浓度 ,放射免疫法测定ET 1浓度。结果　①CVVH组及HD组少尿天数 (3.0± 2 .1,6 .0± 3.4 )、并发症发生率 (2 5 % ,4 0 % )及病死率 (15 % ,2 5 % )差异均有显著性 (P <0 .0 1)。②两组治疗前后血肌酐和尿素氮下降有显著性差异 (P <0 .0 1)。③CVVH组治疗后血中TNF α、IL 6和ET 1均较治疗前明显降低 ,差异均有显著性意义 (P均 <0 .0 1) ;HD组治疗前后血中TNF α、IL 6和ET 1无显著性差异 (P >0 .0 5 )。④CVVH组滤出液中可持续检测到IL 6及ET 1,未检测到TNF α。透出液中未检测到上述炎症介质。结论　连续性血液净化治疗可清除炎症介质 ,改善HFRS的病理生理过程 ,改善肾功能和预后 ,减少并发症 ,降低病死率 ,是治疗HFRS的最佳方法     

甲状腺癌患者血清中SIL-2R测定的临床意义

测定 59例甲状腺良、恶性疾病患者血清中可溶性白介素 受体 (SIL- 2 R)。结果显示 :甲状腺癌患者血清中 SIL- 2 R明显高于良性疾病组及对照组 (P <0 .0 1 )。良性腺瘤及结节性甲状腺肿与对照组间无明显差异 (P >0 .0 5)。甲状腺癌术后 5～ 1 0 d血清中 SIL- 2 R较术前增高 ,可能与术前血清中 SIL- 2 R高水平及手术干扰机体免疫有关。术后约 2 0 d基本降至正常。甲状腺癌血清中 SIL- 2 R升高与甲状腺癌的病理类型无明显关系。提示检测血清中 SIL- 2 R对判别甲状腺疾病良、恶性 ,估计疗效及预后有一定临床意义