融合基因Aβ-HBcAg的原核表达及表达蛋白的免疫反应性和免疫原性分析

目的　研究 β 淀粉样肽 (β amyloidpeptide,Aβ)与乙型肝炎核心抗原 (HBcAg)融合基因Aβ HBcAg的原核表达 ,检测融合蛋白的免疫反应性及免疫原性。方法　将重组质粒pBV2 2 0 /Aβ HBcAg转化大肠杆菌DH5α,温控表达 ,超声破碎细菌 ,通过SDS PAGE、考马斯亮蓝染色和ELISA等方法 ,观察Aβ HBcAg的表达及融合蛋白的免疫反应性 ;用融合蛋白免疫Balb/c小鼠 ,ELISA法检测血清中的抗 Aβ抗体和抗 HBc抗体滴度。结果　融合蛋白以包涵体的形式存在于沉淀中 ,表达量为菌体沉淀的 5 % ,融合蛋白既有Aβ的免疫反应性 ,又有HBcAg的免疫反应性。Balb/c小鼠经过 3次免疫后 ,血清中的抗体滴度很低 ,继续强化免疫 2次后 ,血清中抗 Aβ抗体滴度、抗 HBc抗体滴度分别上升为 1∶80 0和1∶32 0 0。结论　融合基因Aβ HBcAg可在大肠杆菌DH5α中表达 ,表达蛋白有一定的免疫反应性和免疫原性 ,但表达量较低 ,免疫反应性和免疫原性较弱。提示融合基因Aβ HBcAg的表达量和融合蛋白免疫原性的提高尚需进一步研究。     

RP-HPLC法测定人血浆中水飞蓟宾的浓度

建立了 RP- HPLC法测定水飞蓟宾在人血浆中浓度的方法。用乙腈沉淀血浆蛋白 ,离心后 ,取上清液 10 μl进样分析。色谱条件 :C18柱 (10 μm) 2 2 0 mm× 4 .6 mm;流动相为 :V(甲醇 )∶ V(水 )∶ V(0 .5mol· L-1磷酸二氢钾 ) =10∶ 10∶ 1(用 0 .2 mol· L-1磷酸调 p H=4 .0 ) ;流速为 1.0 ml· min-1;检测波长为 2 90 nm。结果水飞蓟宾 A、B平均回收率分别为 98.96 %、97.93% ;日内 RSD分别为3.0 8%、2 .15% ;日间 RSD分别为 4 .4 8%、2 .6 4 %。     

β-淀粉样肽与乙型肝炎核心抗原融合基因Aβ-HBcAg表达载体的构建

目的　构建 β 淀粉样肽 ( β amyloidpeptide ,Aβ)与乙肝核心抗原 (HBcAg)融合基因Aβ HBcAg的原核表达载体 pBV2 2 0 /Aβ HBcAg ,为阿尔茨海默病基因工程疫苗的研究和制备奠定基础。 方法　采用非对称互补引物 /模板法 ,制备两端含有酶切位点的Aβ1- 42肽的cDNA ,将其连接到删除了Pre C区的HBcAg亚型ayw基因的N端组成融合基因Aβ HBcAg ,再将该融合基因亚克隆于载体 pBV2 2 0 ,构建为原核表达载体pBV2 2 0 /Aβ HBcAg。 结果　经DNA测序 ,限制性内切酶酶切等方法证实已成功地将Aβ1- 42cDNA重组到HBVcore的N端 ,并将融合基因亚克隆于 pBV2 2 0内。 结论　成功构建了原核表达载体 pBV2 2 0 /Aβ HBcAg。     

长白山区几种野生浆果营养成分及延缓衰老作用

目的　研究越桔、山葡萄、软枣猕猴桃等长白山区主要野生浆果的营养成分及延缓衰老作用。方法　测定野果中维生素B1、B2 、C、烟酸、β 胡萝卜素及钙、铁、锌等矿物质含量。老年Wistar大鼠分别按 3g·kg-1、6g·kg-1以野果汁灌胃 30d,测定红细胞及肝脏SOD、全血GSH Px活性、血清MDA与脑、心组织中脂褐质含量。结果　野果中维生素B1、B2 、C、β 胡萝卜素及钙、铁、锌等含量显著高于常用栽培果品 ,老年大鼠按 6g·kg-1野果汁灌胃 30d后 ,红细胞及肝脏SOD、全血GSH Px活性显著增高 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,血清MDA及脑、心组织中脂褐质含量则显著降低 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论　 3种野果中富含维生素和矿物质 ,其果汁能显著提高老年大鼠体内抗氧化酶类活性 ,降低脂质过氧化作用 ,延缓衰老进程     

2型糖尿病患者胰岛素分泌功能分析

目的　探讨 2型糖尿病患者胰岛素分泌功能及临床意义。方法　测定糖耐量减低组(IGT组 )与胰岛素分泌不足组 (A组 ) ,胰岛素抵抗组 (B组 )的血糖、胰岛素、C肽在OGTT中的变化和胰岛B细胞初期分泌功能指数。结果　IGT组与A组、B组在OGTT中各时相血糖有明显差异 (P <0 0 1 ) ,A组 >B组 >IGT组。A组各时相胰岛素水平较IGT组显著降低 (P <0 0 5 ) ,B组则较IGT组显著升高 (P <0 0 1 ) ,A、B两组餐后胰岛素峰值后移在 1 2 0min左右。胰岛B细胞初期分泌功能指数IGT组 >B组 >A组 (P均 <0 0 1 )。A组 0min、1 80min ,B组 3 0min、6 0min、1 2 0minC肽值与IGT组相同时相比较无明显差异 (P均 >0 0 5 ) ,A组明显低于B组 (P <0 0 1 )。结论　IGT时胰岛素分泌已有缺陷 ,使餐后血糖升高 ;2型糖尿病时胰岛B细胞损伤加重使血糖进一步升高。不论在IGT或 2型糖尿病胰岛素抵抗时胰岛素分泌仍然不足。胰岛B细胞初期分泌功能指数较C肽更能准确地反映胰岛素初期分泌功能状态。     

大鼠“膀胱经”上A-类初级传入纤维在跨节段信息传递中的电生理特性

目的　分析经脉线上初级传入神经参与跨脊髓节段信息传递的成分及其相关机制。方法　在 6 7只大鼠胸 9～ 1 2 (T9～1 2 )脊神经背侧皮支上分离细束 ,用电生理学方法观察了 1 47个A类初级传入纤维 (包括Aβ 和Aδ 两类 )的放电及其相关特性 ,电刺激相邻节段神经干后传入放电的改变。结果　 1 3个Aβ 类单位的平均传导速度为 (3 3 84± 1 46 )m/s;全部为快适应单位 ,平均电刺激阈值 0 2 7mA ,5 4 6 % (7/1 3 )的单位有低频自发放电 ,每 3 0s平均放电数为 1 3 1±0 2 0 ,跨节段电刺激后 ,放电无明显改变。 1 3 4个Aδ 类单位的平均传导速度 (1 3 5 1± 0 78)m/s,其中快适应单位 5 5个 ,慢适应单位 79个 ;平均电刺激阈值 0 2 2mA ,跨节段电刺激后 ,两种适应单位中被兴奋单位所占比例差异显著 ,P <0 0 0 5。 41 1 % (5 5 /1 3 4 )的Aδ 单位有散在而不规律的自发放电 ,每 3 0s平均放电数 0 73± 0 1 4。跨节段电刺激后 5 6 0 % (75 /1 3 4 )的单位放电迅速增加 ,在电刺激后 3 0s内达高峰 ,0～ 3 0s、3 0～ 6 0s、6 0～ 90s的平均放电数分别为 2 5 4±0 85、1 87± 0 5 2、1 49± 0 41 ,显著高于跨节段电刺激前 (P <0 0 0 1或 0 0 5 )。结论　A类初级传入纤维参与了外周末梢之间的跨节?     

纯化葎草花粉变应原免疫治疗的研究

目的　观察纯化草花粉变应原特异性免疫治疗 (SIT)的疗效。方法　采取凝胶过滤方法部分提纯草花粉变应原。将 86例季节性草花粉过敏性哮喘患者随机分为纯化草花粉变应原SIT观察组 (A组 )及粗制变应原SIT对照组 (B组 ) ,采取双盲法 ,为时半年。观察临床疗效、副反应 ,以及SIT前后的T淋巴细胞亚群、皮肤试验 (IT)风团直径、嗜碱性粒细胞脱颗粒试验 (HBDT)指数及特异性IgE (sIgE)指数均值。 结果　A组总有效率 90 .7%(39/ 4 3) ,B组 79.1% (34/ 4 3,P <0 .0 5 )。A组SIT后仅 1例出现轻度副反应。两组SIT后CD4细胞及CD4/CD8显著降低 ,CD8细胞显著升高 ,且A组变化更明显。两组SIT后ID风团直径、HBDT指数及sIgE指数均值都较SIT前明显下降 (P均 <0 .0 1) ;A组SIT后上述指标下降程度较B组更明显 (P均 <0 .0 1)。结论　纯化草花粉变应原SIT的疗效优于粗制变应原 ,副作用小。提示纯化草花粉变应原SIT后对变态反应抑制性强于粗制变应原。     

关于广义正定矩阵行列式不等式的注记

研究了广义正定矩阵的行列式不等式性质,得到了主要结论:设A、B∈Rn×n,若detA＞0,A-1B∈Ps+,有m(0≤m≤n/2)对非实的共轭特征值,α为实数,则1) 当α≥1/(n-m)时,有[det(A+B)]α≥(detA)α+(detB)α;2) 当0＜α＜1/(n-m)时,有[det(A+B)]α≥2α(n-m)-1[det(A)α+det(B)a].     

UNIQUENESS FOR SOLUTIONS OF NONHOMOGENEOUS A -HARMONIC EQUATIONS WITH VERY WEAK BOUNDARY VALUES

LetΩ be a bounded domain in Rn.We consid-er the quasilinear elliptic second order equationdiv A(x,u) =B(x,u) (1 )where A∶ Ω×Rn→Rn and B∶ Ω×Rn→R are func-tions satisfying the usual measurability conditions(Carathodory conditions) and,for1 0whenever h1≠ h2 (4)　　　 |B(x,h) |≤β|h|p -1(5)for almostevery x∈ Ω and all h,h1…     

低剂量米索前列醇用于足月妊娠引产的临床观察

目的　观察比较低剂量米索前列醇及蓖麻油餐用于足月妊娠引产的临床效果。方法　选择有引产指征、无引产及米索前列醇使用禁忌症的单胎、头位、胎膜完整的足月妊娠妇女 63例 ,随机分为A组 (2 0例 ,米索前列醇 2 5μg) ,B组 (2 0例 ,米索前列醇 50 μg)和C组 (2 3例 ,蓖麻油餐 )。2 4h阴道后穹窿置药一次。结果　A、B、C三组引产成功率分别为 85 0 %、80 0 %、86 95% ,用药后临产的时间分别为 (2 96± 1 46)min、(30 8± 2 31 )min、(2 0 6± 1 0 1 )min。分娩方式、新生儿体重、宫颈评分 ,三组比较差异均无显著性 (P >0 0 5)。B组第一产程和总产程较C组缩短 (P <0 .0 5) ,A组产时出血量较C组少 (P <0 0 5) ;宫缩过强羊水污染的发生率A组及C组较B组低。结论　低剂量米索前列醇用于足月妊娠引产是有效的。     

基于AIBA引发体系的聚丙烯酰胺合成与性能研究

以偶氮二异丁脒盐酸盐(AIBA)与过硫酸铵(APS)组成复合引发体系,采用分段引发法,在水溶液中聚合出了聚丙烯酰胺。以单体浓度、引发剂配比、初引发温度和尿素用量为实验因素,以分子量为考察指标,通过正交试验法得到最佳工艺条件为单体浓度40%,APS∶AIBA为1∶2,初引发时间为1 h,尿素占单体为0.05,合成出的PAM分子量达到550.6万。絮凝性实验表明分子量越高絮凝效果越好,溶解性实验说明合成时加入尿素会有效缩短溶解时间。     

具有液晶相的四烷氧基苯并菲-1,4-二醌的合成

研究合成了 6,7,10,11-四戊氧基苯并菲-1,4-二醌和 6,7,10,11-四庚氧基苯并菲-1,4- 二醌两个新化合物,经核磁氢谱和碳谱、质谱、IR 及元素分析等测定,对其结构进行了表征。该类化合物在紫外可见光区 250～630 nm 的范围有光吸收。采用偏光显微镜和示差扫描量热仪对其性能进行了研究,结果表明,该材料具有液晶性。此外,本文对该类化合物的合成方法也进行了改进,利用亚硝酸钠/三氟乙酸/二氯甲烷体系替代了常用的硝酸铈铵/四氢呋喃/水体系,反应时间可从原来的 2 h 缩短至 15 min,并在室温下完成;在合成中间体 1,2-二甲氧基-6,7,10,11-四烷氧基苯并菲时,采用二氯甲烷作为溶剂,将三氯化铁与 3,3＇,4,4＇-四烷氧基联苯的摩尔比从 8∶ 1 提高到 10∶1,反应时间可从原来的 5 h 缩短至 2 h。     

抗哇巴因鸡蛋黄抗体IgY的制备

目的制备出高特异性的抗哇巴因多克隆抗体,为进一步提高内源性哇巴因的检测的敏感性和特异性提供实验基础。方法采用不同剂量哇巴因-牛血清白蛋白耦联物(0.5 mg/kg;1.0 mg/kg)免疫母鸡,收集鸡蛋;采用聚乙二醇法分离、纯化鸡蛋黄中抗哇巴因抗体;用酶联免疫吸附法检测IgY(yolk immunoglobulin)的抗体效价。SDS-PAGE电泳分析IgY纯度。结果免疫后1周,鸡蛋黄中可检测出IgY;免疫后6周,鸡蛋黄中IgY的效价迅速升高,最高效价达到1∶10 240,持续至少4周。结果还显示,大剂量免疫母鸡获得高效价抗体持续时间较长。结论采用大剂量哇巴因-牛血清白蛋白耦联物免疫母鸡,可以获得较高效价的抗哇巴因IgY。该方法简单,高效价抗体持续时间长,是制备抗体较为有效的方法。     

尿毒症及肾病综合征患者血清蛋白电泳的变化

本文对50例尿毒症患者血清进行聚丙酰胺凝胶电泳,结果表明其α~-脂蛋白、部分α_1~-和α_2~-球蛋白明显下降,触珠蛋白、β-脂蛋白明显上升。同时对50例肾病综合征患者血清进行上述电泳,结果表明其白蛋白、部分α_1~-和α_2~-球蛋白明显下降,部分β_2-球蛋白及β-脂蛋白明显上升。对上述变化的机理及临床意义也进行了探讨。     

Increased expression of the 20S proteasome in peripheral blood mononuclear cells of type 2 diabetic patients

Objective To investigate the dynamic expression of the 20S proteasome in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) of type 2 diabetic patients without vascular complications. Methods PBMCs were prepared from 30 type 2 diabetic patients and 30 nondiabetic controls. The general indexes including weight, height and blood pressure were recorded. Fasting plasma glucose, fasting plasma insulin and glycosylated hemoglobin were measured. The protein level of the 20S proteasome was measured by Western blotting. The mRNA expression levels of the 20S proteasome β1, β2 and β5 subunits were detected by real-time PCR. Results Compared with that in the nondiabetic controls, the protein level of the 20S proteasome was significantly increased in the diabetic patients and was positively associated with glycosylated hemoglobin. Conclusion Type 2 diabetic patients without vascular complications have an increased 20S proteasome expression, the significance of which needs to be explored by further study.     

直接乙醇燃料电池阳极催化剂Pt-Rh-SnO2/C的制备与表征

用交替微波法制备了SnO2/C复合材料,以该材料为载体制备了不同Pt∶Rh比例的Pt-Rh-SnO2/C催化剂,应用透射电镜（TEM）及X射线衍射（XRD）方法对所制备催化剂的微观结构进行了表征,通过循环伏安法和计时电流法测试了催化剂对乙醇的催化氧化性能.结果表明,微波辅助多元醇法利用SnO2/C作为催化剂载体可以制备具有良好分散度的Pt-Rh-SnO2/C催化剂,不同比例的Pt-Rh-SnO2/C催化剂金属粒子的平均粒径都小于4nm,且粒径分布较窄;该系列催化剂中Pt具有面心立方结构,随着Pt含量不断增加,粒径逐渐增加.当Pt∶Rh比例为3∶1时,对乙醇的催化氧化具有最好的稳定性和活性.     

Calculation on the solid solution forming enthalpies of Re-Mo-Ti gradient alloy in thermodynamics

The idea about preparation of Re-Mo-Ti alloy is put forward because of applications of Re and Mo-Re alloys in aerospace. Basing on the thermodynamics theory, the feasibility of developing a new high temperature alloy Re-Mo-Ti is investigated. The solid solution forming enthalpies of binary alloys Re-Ti, Mo-Ti and Mo-Re are calculated with the Miedema thermodynamics theory. The Miedema theory of binary alloy can be used in ternary alloy through Kohler model or Toop model. The calculated results show that the forming enthalpies of binary alloys Re-Ti, Ti-Mo and Re-Mo are negative, which indicates that binary alloys Re-Ti, Ti-Mo and Re-Mo can form solid solution in wider component area. The forming enthalpies of Re-Mo-Ti ternary alloy are still negative and smaller than those of binary alloys Re-Ti, Ti-Mo or Re-Mo, which indicates it is possible to form large solid solution graph area among ternary alloys of Ti, Mo, Re elements. It is feasible to develop a new high temperature material in thermodynamics, in this material Re-Mo-Ti solid solution as base phase, and the Ti₅Re₂₄ intermetallic compounds or interphase ω (Ti₄Mo₃) as strengthening phase.     

两种四环素胶囊剂的溶出度及生物利用度的研究

通过对四环素碱胶囊剂和盐酸四环素胶囊剂溶出度及体内生物利用度的测定,表明四环素碱胶囊剂的溶出度低于盐酸四环素胶囊,但在生物利用度方面却优于后者。溶出度和生物利用度之间没有显著相关性。对于四环素碱和盐酸四环素来说,生物利用度不完全取决于溶出度,还与其在体内的吸收特性有关。所以,四环素碱胶囊剂以其价廉、生物利用度高的优点,有着广泛的临床价值。     

RP-HPLC method for the quantitation of β-Sitosterol in Elaeagnus Gon yanthes Benth

Objective To establish an RP-HPLC method for the determination of β-Sitosterol in Elaeagnus Gonyanthes Benth. Methods The separation was performed on a luna C8 (2) (150 mm×4.6 mm, 5μm) column with the mobile phase of methanol-water (88∶12, v/v) at a flow rate of 1.0 mL/min, the detection wavelength was set at 210 nm, and the temperature of the column was maintained at 35 ℃. Results The calibration curve of β-Sitosterol was linear over the concentration range of 0.075-0.375 mg/mL (r=0.9999) and the average recovery of β-Sitosterol was 96.30% with RSD of 3.60%(n=3). Conclusion The method is simple, rapid, and accurate, and can be used for the quality control of Elaeagnus Gonyanthes Benth.     

氯盐融雪剂对SBS改性沥青混合料路用性能的影响分析

为了分析融雪剂对沥青路面性能的影响,选取了NaCl和CaCl2两种氯盐融雪剂,分别配制了浓度均为0.3g/mL的溶液及二者按质量比1∶1混合的溶液,对SBS改性沥青混合料AC-13C试件进行了冻融处理,然后,分别进行了高温车辙、低温弯曲和冻融劈裂试验.分析结果表明:在融雪剂和水的冻融作用下,随着空隙率的增大,SBS改性沥青混合料的高温、低温和水稳定性能均明显下降,且有逐渐加剧的趋势.总体上,按路用性能衰减程度排列,融雪剂大小依次为:NaCl、混合剂、CaCl2和水.因此,在实际工程中,应严格控制沥青混合料的空隙率,并减少氯盐融雪剂的使用量,多研究并开发和应用环保型融雪剂.